Жидкостная хроматография при высоких давлениях - Энгельгардт Х.
Скачать (прямая ссылка):
Свойства химически связанных фаз с функциональными группами пока мало изучены, тем не менее мы сочли необходимым остановиться и на этом вопросе. Вероятно, в дальнейшем такие фазы в сочетании с водными элюентами будут широко применяться в ситовой хроматографии.
Развитие жидкостной хроматографии при высоком давлении еще продолжается.
В заключение мне хотелось бы поблагодарить всех коллег, друзей и сотрудников за их ценные указания и предложения.
Саарбрюккен, март 1977
X, Энгельгардт
ПРЕДИСЛОВИЕ АВТОРА
К ПЕРВОМУ ИЗДАНИЮ
Эта книга знакомит хроматографиста, начинающего работать в области скоростной жидкостной хроматографии, с аппаратурой, приемами разделения и возможностями метода. Для того чтобы читатель мог выбрать нужные ему элементы прибора, мы подробно обсуждаем основные вопросы работы аппаратуры.
Теория метода изложена нами очень кратко; в главе «Основные положения» упоминаются только важнейшие параметры прагматической хроматографии. В то же время факторы, влияющие на разделение, рассматриваются очень подробно и сравнительно большое внимание уделяется параметрам, которые приводят к ошибкам и плохой воспроизводительное™ Я надеюсь, что ни у кого из читателей не создастся впечатление, что надежность скоростной жидкостной хроматографии меньше, чем у других хроматографических методов. Такое мнение было бы ошибочным.
Жидкостная хроматография при высоких давлениях развивается настолько быстро, что в тот момент, когда эта книга выйдет, ее уже можно будет дополнить новыми материалами. Поэтому пусть меня простит мой коллега, если он обнаружит отсутствие цитаты из его последней важной работы.
В этой книге приведены результаты и идеи длительной плодотворной дискуссии в области «прикладной физической химии», проходившей в университете Саара. Я благодарю за терпение и помощь моего уважаемого коллегу профессора, доктора И. Халаша и сотрудников рабочей группы, особенно докторов Й. Ассхауера, К. Хофмана и И. Себестиана. Я благодарю моего уважаемого учителя профессора, доктора Г. Хессе Эрлангена за содействие в работе.
Саарбрюккен, февраль 1975
X. Энгельгардт
Глава I МЕТОД ХРОМАТОГРАФИИ
Хроматографическое разделение с жидкой подвижной фазой впервые было проведено русским ботаником Цветом [1]. Этот метод предназначался для качественного и количественного анализа смесей, а также для препаративных разделений. Диаметр первых колонок превышал 1 см [2 — 5]. Подвижная фаза перемещалась по колонке под действием силы тяжести, иногда, чтобы ускорить движение, создавали гидростатическое давление, однако скорость потока не превышала 60 мл/ч на 1 см2 поперечного сечения колонки (т. е. линейная скорость была меньше 0,02 см/с). Для того чтобы получить при заданном давлении такую скорость потока, брали насадку со средним диаметром частиц примерно 100 мкм (или больше). Разделительная способность таких колонок была не особенно хорошей, в частности из-за постоянной перегрузки колонки анализируемой пробой.
Разработанные позднее методы хроматографии в тонких слоях, а именно бумажная [6, 7] и тонкослойная хроматография [8, 9], в значительной степени вытеснили колоночную хроматографию, так как последние два метода позволяют быстрее и лучше разделить анализируемые соединения, кроме того, используя напыляемые реагенты, значительно проще идентифицировать разделенные соединения.
В последние годы интерес к колоночной хроматографии с подвижной жидкой фазой вновь резко возрос, так как, во-первых, появились чувствительные детекторы, позволяющие обнаруживать в элюа-те вещества пробы, во-вторых, в жидкостной хроматографии начали применять методики и приемы, отработанные для газовой хроматографии [10].
В жидкостной хроматографии при высоких давлениях [11 — 15] разделение проводят в тонких колонках с внутренним диаметром 2—6 мм. Колонки заполняют частицами, средний диаметр которых составляет менее 50 мкм. Обычная линейная скорость перемещения жидкой фазы равна 0,1 —0,5 см/с и более; достигается это в результате использования высокого давления (10—400 атм) на входе в колонку.
10
Глава I
Классификация хроматографических методов
Любое хроматографическое разделение возможно лишь при условии, что входящие в состав анализируемой пробы соединения перемещаются с разной скоростью благодаря различным величинам вероятности задерживания в неподвижной фазе. Подвижная фаза, вместе с которой перемещается разделяемое вещество, может быть газообразной или жидкой. В зависимости от типа неподвижной фазы различают два основных хроматографических метода. Если неподвижная фаза — твердое вещество с большой активной поверхностью, а подвижная фаза — газ, метод носит название газоадсорбционной хроматографии, если же подвижная фаза — жидкость, то это жидкостная адсорбционная хроматография. Когда неподвижной фазой служит жидкость, насыщающая инертный носитель с большим объемом пор, то в зависимости от характера подвижной фазы различают газораспределительную (газожидкостную) хроматографию и жидкостную распределительную хроматографию. В адсорбционной хроматографии в качестве неподвижной фазы используют активное твердое вещество. Четко разграничить адсорбционную и распределительную хроматографию практически невозможно. Так, в адсорбционной хроматографии, где часто используют предварительно пропитанные адсорбенты, наблюдается непрерывный переход от чистой адсорбции к более или менее явно выраженному распределению [16]. Точно так же рассматривая распределительный механизм, нельзя пренебрегать влиянием носителя жидкой неподвижной фазы, особенно если поверхность носителя велика.
