Органические реакции, Сборник 12 - Адамс Р.
Скачать (прямая ссылка):
H2NCHCOSCeHs+ HSCHjCH (NHj)COjH —> I
СН(СНа)2 XCIV
—у H2NCHCOSCH2Ch (NH2) CO2H
CH(CH3), XCV
і . ... :/
HSCHjCHCOjH * -
I. . '
«,NCHCONH - .
I
CH(CH2), . XCVI
2 мин при pH 7,5, прекращали ее прибавлением кислоты и конечный продукт реакции идентифицировали с помощью хроматографии. В тех же условиях замена глицина на цистеин приводила к образованию только следов валилглицина, тогда как с другими алифатическими аминокислотами валилпептиды не получались; это позволяет предполагать, что сначала реакция протекает по тиоловой группе. Из гистидина образовался валил-гистиднн; это указывает на то, что начальная реакция, верОят* но, протекала по азоту кольца.
Несколько неожиданным было последующее наблюдение, что тиофениловые эфиры ацилируют соседнюю амидную группу [290]. На дихлоргидрат 8-валил-Ы-глицилцистеамина (XCVH)
* Оптические конфигурации аминокислот, применявшихся прн изучении миграции, хотя и ее указаны, но, вероятно, это были конфигурации L1
270
/V. Синтез пептидов с помощью смешанных ангидридов
действовали основанием и продукт реакции хроматографиро-валн. Так как N-валилглицилцистеамин (А) и N-глицилвалил-цистеамнн (В) нельзя разделить этим способом, смесь обрабатывали S-метилизотиомочевиной и гидролизовали. Присутствие небольших количеств а-гуанидоуксусной кислоты наряду с большими количествами а-гуанидоизовалериановой кислоты показало, что частично глицин находился в концевом положении. Этот факт позволяет сделать вывод о том, что, по-видимому, бис-(аминоацил)имид(С)—новая форма смешанного ангидрида — был промежуточным соединением. Предполагаемые реакции приводятся ниже.
CH2-CH,
I Г
S NHCOCH2NH2 C=O
I
CHCH(CHj)2
NH2 XCVII
S-» n
СН» CH«
I' г
HS NHCOCHNHCOCHoNHj
CH(CH3). В
n-*-3
CH2-CH2
S-*n HS NHCOCh2NHCOCHNH2
CH(CHg)2
H-N
и-—и сн2 —CH2
SH N
O=C C=C
(сн3)2снсн X CH2
I/ \
NH2 NH2 c
Приведенная схема реакции была позднее подтверждена опытным путем: было отмечено, что диглицилимид претерпевает миграцию от N к N при рН^ 5 с образованием диглицин-амида [364].
Возможно, что такого же типа превращения может претерпевать и глутатнон в разбавленном растворе. Реакционноспо-' собное промежуточное соединение аминокислоты, как можно было ожидать, сначала реагирует с тиоловой группой с образо-
а-АциламинотиОАовые эфиры и толстые кислоты
271
ванием тиолового эфира. Миграция от S к N (к азоту глицина) через шестичленное циклическое промежуточное соединение с последующей миграцией от N к N цистеиновой половины молекулы через пятичленное циклическое промежуточное соединение привела бы к включению аминокислоты в глутатнон между остатками цистеина и глицина. Процесс этот мог бы и повториться. Синтез пептида с помощью S-метионилглутатиоНа осуществлен не был, но конечная цель предварительных исследований заключалась лишь в применении S-аминокислотных производных глутатиона для ацилирования других аминокислот^ а не в попытке включить аминокислоты в глутатионовую цепь.
Реакция Б-валил-Ы-аланилглицилцистеамина (XCVIII) сводным раствором углекислого кальция привела к смеси пептидных производных. Наличие N-аланилвалилглицилцистеамина среди продуктов реакции можно объяснить, если допустить, что валильная группа сначала мигрирует от серы к соседнему амид-ному атому азота. Последующая миграция от N к N может затем поставить или валин или аланин в предпоследнее положение [289].
CHj-CHj
I I
S NH I I
(CH3)J CHCH (NHj) СО COCHjNHCOCH (NH2) CH3 XCVIII
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ УСЛОВИЯ
Получение тиоловых эфиров и тиоловых кислот. Хотя в качестве исходных веществ при синтезе тиоловых эфиров или тиоловых кислот могут служить различные смешанные ангидриды а-ациламинокислот, наиболее широкое применение в этих реакциях получили смешанные ангидриды алкилугольных кислот. Алкилугольный эфир а-ациламннокислоты или пептида получают в нейтральном растворителе, а затем к раствору смешанного ангидрида прибавляют меркаптан. Последующий процесс аналогичен тому, которым пользуются при конденсации смешанных алкилугольных ангидридов с аминокислотами или эфирами.
Тиосалициловую или тиогликолевую кислоту обычно растворяют в этилацетате, содержащем 1 же триэтиламина, и этот раствор прибавляют к раствору а-ациламиноацилалкилкарбо-ната [343; 365, 365а]. Выдерживают в течение 0,5—4 час при комнатной температуре, затем смесь промывают водой и раз1 бавленной соляной кислотой, и выпаривают, чтобы получить
272
IV. Синтез пептидов с помощью смешанных ангидридов
тиоловый эфир. В случае тиофенола необходимо еще промывание бикарбонатом. Если растворитель смешивается с водой, то его удаляют в вакууме и остаток до промывания кислотой и бикарбонатом растворяют в этилацетате или другом не смешиг вающимся с водой растворителе.
Для получения тиоловых кислот раствор смешанного угольного ангидрида насыщают сероводородом при комнатной температуре в присутствии 1 экв триэтиламина. Раствор оставляют на ночь, затем растворитель удаляют в вакууме, остаток растворяют в воде и подкисляют разбавленной соляной кислотой [339, 340, 351].
