Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Вольпе П. -> "Биохимия клеточного цикла" -> 14

Биохимия клеточного цикла - Вольпе П.

Вольпе П. Биохимия клеточного цикла — М.: Мир, 1979. — 98 c.
Скачать (прямая ссылка): biohimiyakletochnogo1979.djvu
Предыдущая << 1 .. 8 9 10 11 12 13 < 14 > 15 16 17 18 19 20 .. 22 >> Следующая

2, Если синтез клеточных белков происходит главным образом в фазах Gi и G2, то синтез вирусных белков осуществляется в фазе S. Следовательно, к вирусным белкам неприменим принцип «или ДНК, или белок». Другими словами, трансляция вирусного генома (мРНК) может идти одновременно с репликацией генов клетки.
Таким образом, при литической вирусной инфекции в фазе S может разыгрываться ряд одновременных событий— репликация генов клетки, репликация генов вируса, их транскрипция и трансляция [1].
Нормальный кариотип человека. XX — полоЬые хромосомы женского набора; XY — половые хромосомы мужского набора. Способны ли хромосомы человека, подобно хромосомам животных клеток, включать в себя геном онкогенного вируса? В какие хромосомы он включается? В какой период?
VI. Онкогенная вирусная инфекция
20. Новая экспериментальная база
для генетической инженерии
Рассмотрим значение описанных выше исследований для понимания вирусного канцерогенеза (в частности, процесса интеграции ДНК онкогенного вируса с ДНК клетки-хозяина) и роли так называемых «гомологичных» зон онковирусной РНК и клеточной ДНК.
Обратимся к экспериментам с неравномерным мети* лированием ДНК [1]: СН3-группы не включаются случайным образом по всей длине ДНК-полимера, а кон-1 центрируются преимущественно в определенных генах [39].
Эта избирательность была использована для специфической маркировки ДНК, чтобы выяснить, когда, где и как происходит интеграция генома онкогенного вируса с геномом клетки [1]. Как известно, явление интеграции было впервые описано в 1968 г. Дульбекко и его сотрудниками [79, 80]: двухцепочечная ДНК онкогенного вируса, например SV40, включившись в геном, вызывает трансформацию нормальной клетки.
Первый вопрос (когда?) касался фазы клеточного цикла, в которой возможен процесс интеграции [1]. К его постановке привели два открытия: в 1967 г. Ричардсон обнаружил, что в клетке небольшие фрагменты ДНК могут соединяться с помощью фермента, получившего название ДНК-лигазы [32]; в 1968 г. японский ученый Оказаки установил, что ядерная ДНК в фазе S клеточного цикла не реплицируется сразу в виде длинных цепей — новая ДНК строится отдельными фрагментами [33]. Сопоставление этих данных позволило заключить, что в фазе S фрагменты Оказаки соединяются при участии ДНК-лигазы [33]. В связи с этим возник вопрос: быть может, ДНК онковируса, проникнув в нормальную клетку не в
Рис. 32. Возможные схемы включения онковирусной ДНК в область транскриптона [1]. I — полная утрата регуляции; // — частичная утрата регуляции. Я —промотор; К и В — означают «клеточный» и «вирусный» соответственно.
фазе S, сначала находится в состоянии «покоя» в ожидании фазы S, когда она смешивается с фрагментами Оказаки в единый пул, чтобы затем включиться в клеточную ДНК с помощью ДНК-лигазы? Иными словами, предполагалось, что интеграция могла бы происходить в период, когда клетка занята сборкой своих фрагментов Оказаки [1]. Изучение процесса интеграции онкогенной ДНК, по-видимому, подтвердило эту гипотезу [1].
Второй вопрос (где?) касается места включения ДНК онкогенного вируса в геном клетки. Была сделана попытка установить, в каких участках более вероятна интеграция вирусной ДНК — в области регуляторных генов или
же в области структурных генов клетки. Как показали предварительные результаты исследований, вероятными местами включения онковирусных геномов являются регуляторные гены [1, 81, 82].
Третий вопрос — каким образом происходит интеграция?— логически вытекает из предыдущего. Как уже отмечалось, транскрипционная единица ДНК (транскриптон) состоит из регуляторной зоны с повторяющимися последовательностями и структурной зоны, представляющей собой уникальную последовательность [55]. ДНК-зависимая РНК-полимераза начинает транскрипцию с 5'-конца (от промотора) и продвигается к З'-концу. Исходя из этого, можно представить себе два варианта интеграции онковирусной ДНК (рис. 32): а) включение
между регуляторной и структурной зонами (интеграция вирусной ДНК в структурной зоне маловероятна);
б) включение в регуляторной зоне.
Рассмотрим случай интеграции онковирусной ДНК между регуляторной и структурной зонами. РНК-полимераза начнет транскрипцию от вирусного промотора, минуя клеточный промотор. В результате образуется гетерогенная (химерная) РНК, часть которой будет комплементарна ранним генам вируса (начиная от вирусного промотора), а другая часть — структурному гену клетки. Таким образом, структурный ген клетки полностью выйдет из-под контроля ее регуляторных генов; регуляция его будет утрачена [1].
Рассмотрим теперь вариант с включением онкогенной ДНК в регуляторную зону. РНК-полимераза всегда будет начинать транскрипцию с вирусного промотора, не затрагивая промотор клетки. При этом будут транскрибироваться ранние гены вируса, часть регуляторной зоны и весь структурный ген. В этом случае утрата регуляции будет не полной, а лишь частичной.
По имеющимся данным [79, 80], с клеточной ДНК может интегрироваться до 6—7 вирусных геномов. Из этого ясно, как важно было бы выяснить фактическую степень нарушения регуляции и установить, какие белки при этом затронуты. Не касается ли это, например, синтеза тех белков, которые ответственны за контактное торможение?
Предыдущая << 1 .. 8 9 10 11 12 13 < 14 > 15 16 17 18 19 20 .. 22 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed