Методы культивирования клеток - Вахтин Ю.Б.
Скачать (прямая ссылка):
образно ввиду гибели части пролиферирующих миогенных клеток. Среду сменяют на 2—3-е сутки для удаления погибших и неприкре-пившихся клеток, а затем через каждые 3—4 сут в процессе культивирования.
Культуры дифференцированных кардиомиоцитов. После перфузии сердца раствором коллагеназы ткань диссоциируют и получают суспензию свободных клеток (см. выше). Для отделения клеток флаконы слегка встряхивают; пипетировать не следует ввиду значительного повреждения миоцитов. После посева клеток среду меняют на 5—6-е сутки. Для элиминации немышечных клеток в момент посева в культуры вводят ингибиторы репликации ДНК, которые затем удаляют при первой смене среды 2—3-разовым ополаскиванием средой без сыворотки, либо используют методику раздельного прикрепления.
Литература
1. Morvinsky R. The cultured myocardial cells as a model in cardiac research"// Biomed. biochim. acta. 1986. Vol. 45. P. 237—240.
2. Jacobson S. L., Piper H. M. Cell cultures of adult cardiomyocytes as models of the myocardium // J. Mol. Cell. Cardiol. 1986. Vol. 18. P. 661—678.
3. Harvey A. L. Cardiac muscle // The pharmacology of nerve and muscle in tissue culture. London; Canberra, 1984. P. 125—158.
4. Lieberman М., Horres C. R., Shigeto N. et al. Cardiac muscle with controlled geometry. Application to electrophysiological and ion transport studies I j Excitable cells in tissue culture / Eds P. G. Nelson, M. Lieberman. New York, 1981. P. 379—408.
5. Claycomb W. C., Palazzo М. C. Culture of the terminally differentiated adult cardiac muscle cell: a light and scanning electron microscope study // Develop. Biol. 1980. Vol. 80. P. 466—482.
6. Wollenberger A. Isolated heart cells as a model of the myocardium // Basic Res. Cardiol. 1985. Vol. 80. Suppl. 2. P. 9—14.
7. Grinwald P. М., Nayler W. G. Calcium entry in the calcium paradox // J. Mol. Cell. Cardiol. 1981. Vol. 13. P. 867—880.
8. Ganote C. ?., Nayler W. G. Contracture and the calcium paradox // J. Mol. Cell. Cardiol. 1985. Vol. 17. P. 733—746.
9. Farmer В. B„ Mancina М., Williams E. S., Watanabe M. Isolation of calcium
tolerant myocytes from adult rat hearts: review of the literature and description
of a method // Life Sci. 1983. Vol. 33. P. 1 — 18.
10. Wittenberg B. A., Robinson T. F. Oxygen requirements, morphology, cell coat and membrane permeability of calcium tolerant myocytes from hearts of adult rats // Cell Tissue Res. 1981. Vol. 216. P. 231—251.
11. Clark M. G., Gannon B. Bodkin N. et al. An improved procedure for the high-yield preparation of intact beating heart cells from the adult rat, biochemical and morphological study // J. Mol. Cell. Cardiol. 1978. Vol. 10. P. 1101 —1121.
12. Haworth R. A., Hunter D. R„ Berkoff H. A. The isolation of Ca2+-resistant
myocytes from the adult rat // J. Mol. Cell. Cardiol. 1980. Vol. 12.
P. 715-723.
13. Frangakis C. Bahl J. McDaniel H., Bressler R. Tolerance to physiological calcium by isolated myocytes from the adult rat heart; an improved cellular preparation // Life Sci. 1980. Vol. 27. P. 815—825.
14. Claycomb W. C., Lanson N. Isolation and culture of terminally differentiated adult mammalian ventricular cardiac muscle cell // In Vitro. 1984. Vol. 20. P. 647— 651.
15. Lundgren ?., Borg Т., Mardh S. Isolation, characterization and adhesion of calcium-tolerant myocytes from the adult rat heart // J. Mol. Cell. Cardiol. 1984. Vol. 16. P. 355-362.
16. Hume J. R., Giles W. Active and passive electrical properties of single bullfrog atrial cells // J. Gen. Physiol. 1981. Vol. 78. P. 19—42.
17. Tarr М., Trank J. W., Leiffer P. Characteristics of sarcomere shortening in single frog atrial cardiac cells during lightly loaded contractions // Circ.Res. 1981. Vol. 48. P. 189—200.
18. Isenberg G., Klockner V. Calcium tolerant ventricular myocytes delivered by preincubation in KB-medium // Pfluegers Arch.1982. Bd 395. S. 6—18.
19. Nag A. C., Cheng М., Fischman D. A., Zak R. Long-term cell culture of adult mammalian cardiac myocytes: electron microscopic and immunofluorescent analyses of myofibrillar structure // J. Mol. Cell. Cardiol. 1983. Vol. 15. P. 301—317.
20. Onorato J. Rudolph S. A. Regulation of protein phosphorilation
by inotropic agents in isolated rat myocardial cells j j J. Biol. Chem. 1981. Vol. 256. P. 10697—10703.
21. Ciaycomb W. C. Cardiac muscle cell proliferation and cell differentiation in vivo and in vitro // Adv. Exp. Med. Biol. 1983. Vol. 161. P. 249—265.
22. Cutiletta A. F., Aumont М. C., Nag A. C., Zak R. Separation of muscle and non-muscle cells from adult rat myocardium: an application to the study of RNA polymerase // J. Mol. Cell. Cardiol. 1977. Vol. 9. P. 399—407.
23. Aumont М. C., Swingheadauw B., Nag A. C., Cutiletta A. F., Zak R. Separation of muscle and non-muscle cells from adult rat myocardium // Biol. Cell. 1980. Vol. 37. P. 119—120.
24. Clubb F. J., Bishop S. P. Formation of binucleated myocardial cells in the neonatal rat //'Lab. Invest. 1984. Vol. 50. P. 571—577.
