Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Вахтин Ю.Б. -> "Методы культивирования клеток" -> 154

Методы культивирования клеток - Вахтин Ю.Б.

Вахтин Ю.Б., Соминина А.А. Методы культивирования клеток — Л.: Наука, 1988. — 313 c.
Скачать (прямая ссылка): metodikultivirovaniya1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 148 149 150 151 152 153 < 154 > 155 156 157 158 159 160 .. 171 >> Следующая

% | \ 1 N. t ls /
)
Щ i i T t t 7 t
м7 ¦--- Ш --- P i- I5 --- t i- -i- If
if j
% t -i- _--- ' -i---
f i
д% ( t t i i r t H
ft 1 - : %
i « T T r TI T'
Mft,. 1 % 1 1
t T ----- t w
| | * T -4- 1Г 1
5
Рис. 9. Фрагмент рядов идентичных маркерных хромосом из семи клеток линии M-HeLa.
а
12 3
I У. I i
7 0
II nr
13 n 15
19 20
Маркеры
ill
10 11 12
II 85
16
n m
21
22
1 2 3 7 в 10 П 15
Рис. 11. Кариотип клетки Raji, 2n=48.
a ~' 8, маркерных хромосом; б — обобщенный реконструированный кариотеп. Сплошной линией обведены нормальные хромосомы или их фрагменты, восстановленные из маркеров.
пт.
Рис. 2. Микрофотографии живых клеток, полученные с экрана монитора (о, в, г) и непосредственно на пленку с микроскопа (б, д, в).
•в —клетки ЗТЗ-, инкубированные 15 мин с МГ-Ф при 37° С; б — клетки -Л4311, инкубирован-®ые 30 мин с 9ФР-Р при 37° С; в и г — одна и та же клетка А431, инкубированная сутки -с ФИТЦ-декстраном, до (в) и после (г) действия метиламина (использовался набор фильтров № 12); д и е — клетка ЗТЗ, инкубированная 20 мин с ДФГТ при 37° G, в свете флюоресценции ДФГТ (в) и в фазовом контрасте (е).
Культивируемые клетки сердца. Г :
с — свежеизолированная мышечная клетка из желудочка сердца взрослой крысы; б — кар-диомиоцит 2-недельной крысы на 3 сутки культивирования, в областях вставочных дисков формируются отростки; в — 5-суточная культура клеток желудочков сердца 2-недельной крысы, мышечные клетки (в центре) легко отличимы от фибробластов (внизу и вверху), пояснения см. в тексте; а—в — фазовый контраст; гид — PAS-реакция — цитохимический маркер кардиомиоцитов, 3Н-тнмидиновые автографы клеточных культур из желудочков сердца ¦6-месячного эмбриона человека (г) и предсердий 2-недельной крысы (6), стрелки — меченые ядра PAS-негативных фибробластов; инкубация с аН-тимидином (74 кБк/мл) в течение 24 ч.
Рис. 1. Взаимосвязь лимфоидных элементов с фибробластоподобной клеткой линии КМПГ-1. Окраска по Романовскому—Гимза, Х500.
Рис. 2. Фибробластоподобная клетка, служащая «подкормкой» для лимфоидных клеток КМПГ-1 в культуре. Окраска по Романовскому—Гимза, Х900.
Рис. 3. Общий вид спонтанно трансформированной культуры СПГ-2, Х160.
Рнс. 4. Морфология клеток лимфоидной линии павиана гамадрила СПГ-2. Окраска по Романовскому—Гимза, Х500.
Рис. 5. Ультраструктура клеток лимфоидной линии павиана КМПГ-1. Ультра-тонкий срез, X 15 ООО.
Рис. 6. Морфология клеток лимфоидной культуры человека ЧСЛ-1. Окраска по Романовскому—Гимза, х800.
Рис. 7. Многоядерная клетка лимфоидной линии ЧСЛ-1, полученной от больного лимфогранулематозолг (64-й пассаж). Окраска по Романовскому—Гимза, X1200.
Рис. 8. Лимфоциты павиана гамадрила до трансформации, Х160.
Рис. 9. Лимфоциты павиана гамадрила после трансформации лимфотропным герпесвирусом павианов, Х160.
Через 3—4 сут происходит массовое слияние миобластов в мио-тубы. Сокращение в миотубах наблюдается через 4—5 сут после эксплантации.
Миогенез в культурах скелетно-мышечных клеток можно оценить количественно. Определяют количество ядер в миотубах относительно общего количества ядер в поле зрения (при подсчете не менее 500 ядер для одной культуры). Миотубами считаются многоядерные структуры, содержащие не менее трех ядер. Подсчет производят в различных полях зрения (не менее 10).
Постоянные миогенные клеточные линии. Основные этапы миоге-неза в миогенных клеточных линиях (L6, L8) протекают так же, как в первичных культурах скелетно-мышечных клеток. Однако процесс слияния в постоянных клеточных линиях не является таким массовым, как в первичных культурах. Даже при благоприятных условиях определенная часть миобластов остается неслившейся. Дифференцировка в постоянных клеточных линиях не всегда сопровождается спонтанным сокращением миотуб. Клеточные линии поддерживаются таким образом, чтобы плотность клеток в них была бы низкой. В противоположном случае клетки будут сливаться в миотубы. Будет происходить селекция низкодифференцированных, пролиферирующих клеток. При длительном культивировании может наблюдаться утрата способности клеток к днфференцировке. В этом случае с помощью клонирования можно отобрать из исходной популяции клон клеток, сохраняющий способность к миогенезу.
Предыдущая << 1 .. 148 149 150 151 152 153 < 154 > 155 156 157 158 159 160 .. 171 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed