Методы культивирования клеток - Вахтин Ю.Б.
Скачать (прямая ссылка):
2. (Фриденштейн А. Я-, Дериглазова Ю. Ф., Кулагина H. H. и dp.) Fridenshtein A. Ja., Deriglasova Ju. F., Kulagina N. N. et al. Precursors for fibroblasts in different populations of hematopoietic cells as detected by in vitro colony assay method // Exp. Hematol. 1974. Vol. 2. P. 83—92.
3. (Фриденштейн А. Я-, Лациник H. В., Грошева А. Г., Горская Ю. Ф.) Fridenshtein A. Ja., Latsinik N. V., Grosheva A. G., Gorskaya Ju. F. Marrow microenvironment transfer by heterotopic transplantation of freshly isolated and cultured cells in porous sponges // Exp. Hematol. 1982. Vol. 10. P. 217—227.
4. Лациник H. В., Горская Ю. Ф., Грошева А. Г. и др. Содержание стромальных колониеобразующих клеток (КОКф) в костном мозге мышей и клональная природа образуемых ими колоний фибробластов//Онтогенез. 1986. Т. 17, № 1. с. 27—36.
5. Кейлис-Борок И. В., Лациник Н. В., Епихина С. Ю., Фриденштейн А. Я. Динамика формирования колоний фибробластов в монослойиых культурах костного мозга по данным включения Н3-тимидина // Цитология. 1971. Т. 13, № 11. С. 1-402—1409.
6. (Фриденштейн А. Я.) Fridenshtein A. Ja. Precursor cells of mechanocytes // Intern. Rev. Cytol. 1976: Vol. 47. P. 327—359.
7. Чайлахян P. К., Герасимов Ю. В., Фриденштейн А. Я¦ Содержание в костном мозге остеогенных клеток-предшественников и их размножение в культурах // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1984. Т. 98, № 11. С. 605—608.
8. Герасимов Ю. В., Фриденштейн А. Я., Чайлахян P. К-, Шишкова В. В. Дифферен-цировочные потенции клональных штаммов костномозговых фибробластов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1986. Т. 101, № 6. С. 717—719.
9. Owen М. Lineage of osteogenic cells and their relationship to the stromal system // Bone Mineral Res. 1985. Vol. 3. P. 1—25.
10. Фриденштейн А. Я-, Лурия E. А. Клеточные основы кроветворного микроокружения. М., 1980. 214 с.
11. (Фриденштейн А. Я., Чайлахян Р. К-, Лациник Н. В. и др.) Fridenshtein A. Ja., Ch.ailach.an R. К-, Latsinik N. V. et al. Stromal cells responsible for transferring the microenvironment of the hemopoietic tissues // Transplantation. 1974. Vol. 17. P. 331-340.
12. Фриденштейн А. Я., Чайлахян P. K-, Лациник H. В. и др. Стромальные клетки, ответственные за перенос микроокружения в кроветворной и лимфоидной ткани//Проблемы гематол. перелив, крови. 1973. № 10. С. 14—23.
13. (Фриденштейн А. Я-, Горская Ю. Ф., Кулагина Н. Н.) Fridenshtein A. Ja., Gorskaya Ju. F., Kulagina N. N. Fibroblast precursors in normal and irradiated mouse hemopoietic organs // Exp. Hematol. 1976. Vol. 4. P. 267—274.
14. Кулагина H. H., Лурия E. А., Астахова В. С., Генкина Е. Н. К методике клониро-
вания стромальных клеток костного мозга человека // Пробл. гематологии и переливания крови. 1981. № 11. С. 39—41.
15. Лациник Н. В., Горская Ю. Ф., Павленко Р. Г., Фриденштейн А. Я. Содержание
стромальных клоногенных клеток в костном мозге мышей//Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1986. Т. 101, № 4. С. 468—471.
16. Лациник Н. В., Сидорович С. Ю., Фриденштейн А. Я. Влияние трипсинизации
костного мозга на эффективность образования колоний фибробластов в моно-
слойных культурах // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1981. Т. 91, № 9.
С. 356—358.
Поддержание кроветворения и лимфопоэза в культурах на стромальных подложках
С. А. Кузнецов
- Институт эпидемиологии и микробиологии * '
им. Н. Ф. Гамалеи АМН СССР,
Институт химической физики АН СССР, Москва ,
Последнее десятилетие ознаменовалось значительным прогрессом в области культивирования кроветворной и лимфоидной ткани. Культивирование гемопоэтической ткани развивалось в нескольких направлениях. В культурах стромального компонента кроветворных и лимфоидных органов были изучены свойства клеток, создающих кроветворное микроокружение [1]. В полутвердых культуральных средах (агаровый и метилцеллюлозный гели и плазменный сгусток) удалось клонировать практически все существующие в кроветворной ткани коммитированные клетки-предшественники гемо- и лимфопоэза (см. [2]). При добавлении лимфокина из культур лимфоцитов, стимулированных митогенами, в полутвердом геле были получены колонии, образуемые непосредственно полипотентными стволовыми кроветворными клетками — СКК [3], а в суспензионных культурах — длительно пассируемые линии диплоидных Т-лимфоцитов [4].
Каждая из этих культуральных систем имеет свои преимущества, однако клеточные компоненты кроветворной либо лимфоидной ткани представлены в них порознь, а из всего многоступенчатого процесса кроветворения осуществляются, как правило, один или несколько этапов. Наиболее полного приближения к естественному ходу гемо-поэза позволяют достичь культуры кроветворных и лимфоидных клеток на стромальной подложке.
Впервые такая культуральная система была разработана Е. А. Лурия с соавторами в ИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи (Москва): в органных культурах фрагментов печени мышиных эмбрионов размножение СКК и миелоидное кроветворение поддерживаются около 10 нед и находятся в тесной зависимости от состояния стромальной ткани — печеночного эпителия (см. [5]). Перспективной представляется система культивирования клеточных суспензий кроветворных органов в коллагеновом геле, где развиваются колонии стромальных фибробластов [6], тесно связанные с областями активного гемопоэза [7]. Однако наиболее разработанной и открывающей самые широкие возможности для всестороннего изучения гемопоэза является в настоящее время система, предложенная Декстером [8] для культивирования костного мозга мыши, а позднее приспособленная для костного мозга тупайи и человека. Особенностью этой системы является ее двухфазность, благодаря которой кроветворные и лимфоидные элементы становятся доступными для использования в клинических целях и всестороннего исследования без какого-либо повреждения стромальной подложки.
