Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Юриной Н.А. -> "Практикум по гистологии, цитологии и эмбриологии" -> 5

Практикум по гистологии, цитологии и эмбриологии - Юриной Н.А.

Юриной Н.А., Радостиной А.И. Практикум по гистологии, цитологии и эмбриологии — М.: УДН, 1989. — 253 c.
ISBN 5-209-00126-1
Скачать (прямая ссылка): praktikumpogistologii1989.djvu
Предыдущая << 1 .. 2 3 4 < 5 > 6 7 8 9 10 11 .. 119 >> Следующая

9. Приготовление полутонких срезов толщиной 1—2 мкм и окраска их метиленовым синим.
10. Приготовление ультратонких срезов толщиной 400— 800 нм, перенесение их на сеточки.
11. Окрашивание (контрастирование) ультратонких срезов на сеточках уранилацетатом (10 мин), а затем цитратом свинца (10 мин).
Цель занятия — ознакомление с принципами гистологических и гистохимических методов.
Задачи: 1. Овладеть основными методиками приготовления фиксированных и окрашенных препаратов клеток, ткайей и органов для световой микроскопии и работой на микротоме.
2. Овладеть некоторыми цито- и гистохимическими методами исследования.
3. Ознакомиться с методами прижизненного изучения клеток и тканей.
Необходимый исходный уровень знаний: 1. Понятие о видах гистологических препаратов.
2. Требования к гистологическому препарату для микроско-пирования в световых и электронных микроскопах.
3. Понятие о цито- и гистохимических методах исследования.
Задания:
1. Залить в парафин материал, проведенный ранее, до второго парафина (схема 1).
2. Изучить конструкцию санного микротома и овладеть методами приготовления парафиновых срезов и получения замороженных срезов в криостате.
3. Пользуясь сведениями, приведенными в схеме 2, окрасить парафиновый срез гематоксилин-эозином. Обратить внимание па то, что гематоксилин (основной краситель), окрашивает ядра в фиолетовый цвет, а эозин (кислый краситель) — цитоплазму клеток в розовый цвет.
4. Пользуясь указаниями схем 4 и 5, окрасить срезы акридином оранжевым и метиловым зеленым-пироиииом.
5. Приготовить препарат свежей крови и исследовать в фа-зово-контрастиом микроскопе.
6. Овладеть методом суправнтального окрашивания мазков крови с помощью красителя бриллианткрезилового синего, позволяющим выявлять ретикулоциты (молодые эритроциты). Обратить внимание на окрашивание структуры ретикулоцитов в синий цвет.
П
7. Ознакомиться с методиками приготовления гистологического материала для электронной микроскопии.
Контрольные вопросы:
1, Какие виды гистологических препаратов вы знаете?
2* Каковы основные этапы приготовления гистологических срезов?
3. В чем заключается сущность фиксации тканей и органов? Какие бывают фиксаторы и каков механизм их действия?
4. Для чего используют заливку в твердые среды (парафин и др.) гистологических объектов?
5. С какой целыо применяют замораживание кусочков органов?
6. С какой целью применяют окрашивание препаратов? Какие основные группы красителей используют в гистологических исследованиях? Почему структуры называют оксифильными или базофильными?
7. Для чего производят «заключение» препарата, какие средь* для этого применяют?
8. Какие методы называют гистохимическими, в чем их сущность?
9. Назовите методы прижизненного исследования клеток и тканей.
10. В чем состоят особенности приготовления препаратов для электронной микроскопии?
Ситуационные задачи:
1. Врач должен срочно получить ответ о состоянии органа. Каким методом можно быстро приготовить гистологический срез?
2, Необходимо выявить наличие жира в клетках. Какой фиксатор вы рекомендуете использовать?
3. Вами получен материал, фиксированный спиртовым фиксатором. Какие этапы обработки можно исключить?
4, При исследовании клеток в люминесцентном микроскопе после окрашивания акридиновым оранжевым вы обнаружили зеленое и красное свечение структур. Каков их химический состав?
Подтема 2 МЕТОДЫ МИКРОСКОПИРОВАНИЯ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ
Основными методами исследования гистологических объектов являются световая и электронная микроскопия, которые широко используются в клинической и экспериментальной практике*
Световой микроскоп. Устройство и принцип работы
Основная оптическая часть микроскопа состоит из объектива и окуляра. Объектив является наиболее ответственной оптической системой, дающей увеличенное изображение предмета.
Объективы подразделяются: а) по степени совершенства исправлений .аберраций (искажений) на монохроматы (предназначены для работы при
монохроматическом освещении), ахроматы (хроматическая аберрация исправлена для 2 цветов спектра); апохроматы (хроматическая аберрация исправлена для 3 цветов спектра); планмонохроматы, планахроматы, плана-,похроматы (исправлена кривизна поверхности изображения);
б) по степени увеличения на объективы малых увеличений (увеличение <Л0); объективы средних увеличений (увеличение ^40); объективы больших у в ел и чем и и ( ув олич ейис^ 40);
в) по свойствам иммерсии на безиммерсиоиные (сухие системы) и им-мер си о и и ые си сте м ы.
Получение максимального увеличения возможно только с помощью иммерсионного объектива (как правило, объектива с увеличением 90).
Иммерсионные объективы рассчитываются на работу с покровными стеклами не толще 0,17 мм.
Предыдущая << 1 .. 2 3 4 < 5 > 6 7 8 9 10 11 .. 119 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed