Молекулярная биология гена - Уотсон Дж.
Скачать (прямая ссылка):
Fd ЦЛПур ПирТГ
5’ | \
Hind III АА1 ЦТТ 6 В 11
11Ц ГАА
5 \ t
Hemophilus paramf- Hpa I ГТТ ААЦ 3 11 6
luenzae ЦАА ТТГ
Б | \
Нра II цц ГГ 1 750 750
ГГ цц
5 \ t
Hemophilus aegyptius Use III Г1 цц 17 750 750
ЦЦ гг
\
1} Мол веь з 108 2) Мол вес 32 Юв S) Мол вес 25 106
в одном направлении) Другие гораздо длиннее и состоят из сотеи пар оснований. Многие короткие палиндромы служат, по всей вероятности, участками узнавания в ДНК для олигомерных белкой, состоящих на идентичных субъединиц;. Одпако роль более длинных палппдромов совершенно неясна. Возможно, они иногда претерпевают пространственную перестройку при которой комплементарные последовательности одной цепи спариваются и образуют крестообразные (шпилечные) петли, выступающие из основной двойной спирали (рис 9 15, В)- Такие петли могут иногда \ чествовать в узнавании ДНК связывающимися с пеп белками
Как бы то ни бы хо, участки цепей РНК, транскрибированные с па шн-дромов, дотжны стремиться образовывать шнилечиые петли, связанные водородными связями, а их стабильность должна иепосредствсшго завп сеть от степени совершенства симметрии палиндромпых последоннтель постей- Таким образом, многие палиндромы, возможно, возникли для обеспечения структурной компактности считываемой с них РНК.
КАРТЫ ЧАСТИЧНОЙ ДЕНАТУРАЦИИ
Не up о до л жито ль но е воздействие депатурпрующих факторов (например, высокой температуры, высоких или низких значении pH, веществ, раз рушающих водородные связи) на линейные молекулы ДНК вызывает прежде всего расплетание участков, богатых ЛТ-нарами, а > част к и кото рые удерживаются преимущественно значительно более прочными ГЦ-
\ - Т I - II I - \
«Qc
TT
Рис 9-15. А Участок оператора ДНК фага повторяющиеся последовательности (палив*
?. (Ol) длиной в 45 пар основании, участвую- дромы) могут образовывать петли в форме
щего л регуляции выражения гена- Заштрихо- шпилек Обратите внимание, что несовершев
ванн фрагменты, образующие несовершенный ныи палиндром, изображенный внизу, образ}
палиндром (ею середина обозначена черной ст несовершенные пстти
точкой) Б Показано, как инвертированные
парами «снований, остаются интактньши. Если частично денатурированные молекулы обработать формальдегидом, одиоценочечпые участки стабилизируются, так как формальдегид взаимодействует со свободными аминогруппами аденина и препятствует восстаноьлешш АТ-пар. При изучении молекул, обработанных таким образом, с помощью электронной микроскопии расплавленные участки выявляются в виде одноцепочечных «пузырей», располагающихся в одпцх и тех же местах молекул ДНК определенного типа (рис. 9-16) Получаемые при jtom карты денатурации предоставляют возможность дегьо различать концы линейных молекул ДНК н таким образом точно определять, в каком месте (или местах) начинается репликация ДНК.
_
В
Рис. S-16 А Электронная микрофотография частично денатурированной молекулы ДНК фага Т7 Б Карта денатурации молекулы, изображенной на фотографии А В Гисгограм-иа суммирующая расположение одноцепочеч них участков у большого числа денатуриро-вавных молекул. На фотографии А стрелкой отмечена одвоценочечная выступающая петля, которая имелась в молекуле ДНК еще до частичной денатурации- Эта петля образуется вз-ва того, что била взята не обычная, а гетер-«дуплексная молекула ДНК фага 17 (гч. 10)
Таьая молекула образуется при отжиге выделенных одиночных ценен ДНК фага Т7 дикого т;ша с цепями молекул ДНК фага Т7, с-одср-гйащего деагецпю. С помощью генетического картирования было показано, что делецпя расположена вблизи левого конца Этот донол пптельныи физический маркер позволяет утвер кдать, что АТ-богатые участки частично)! денатурации расположены на левом конце хромосомы бактериофага (С любезного раз решения д ра Вояьфсоиа и Д-ра Дресслера )
ИССЛЕДОВАНИЕ РЕПЛИКАЦИИ ЛПНЕЙПОП МОЛЕКУЛЫ ДНК С ПОМОЩЬЮ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ
