Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уотсон Дж. -> "Молекулярная биология гена" -> 93

Молекулярная биология гена - Уотсон Дж.

Уотсон Дж. Молекулярная биология гена — М.: Мир, 1978. — 706 c.
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyagena1978.djvu
Предыдущая << 1 .. 87 88 89 90 91 92 < 93 > 94 95 96 97 98 99 .. 317 >> Следующая

Липким конец
\ L.
ЩЩЦЦГ-- AS*
I +
Чнпкнй конец новации
Рис. 9-13. Взаимопревращение линей-вои и кольцевой форм ДНК фага К
чьовиднаи форма обеспечивает некоторые преимущества при введении фаговой хромосомы через тонкий, отросток. Важно отметил., что многие другие липеипые молек>лы ДНК, папример ДПК фага Т7, также имеют потенциальные липкие концы, по никогда ие переходят in vivo в кольцевую форму Таким образом, кольцевая конфигурация, вероятно, не обязательна для репликации ДНК.
ОБРАЗОВАНИЕ СТРОГО ОПРЕДЕЛЕННЫХ ФРАГМЕНТОВ ДНК ПРИ ДЕЙСТВИИ ФЕРМЕНТОВ РЕСТРИКЦИИ
Ферменты, разрывающие фосфодн эфирные связи в полип у к л еотидпы х цепях, называются иуклеазами. Пуклеазы, разрывающие предпочтительно вмутрекпие связи, носят название эндонуклеаз, а те, что отщепляют копцевые нуклеотиды, — экзоиуклеаз (рис 9 14).
В течение долгого времени считалось, что все ондопуклеазы относи тельпо неспецифичиы и расщепляют в полипу ктеотпдах связи внутри самых различных последовательностей нуклеотидов Однако в течение последних нескольких лет был открыт новый класс эндопуклеаз микробного происхождения, действие которых ограничено весьма специфичными нуклеотидными последовательностями Эти специфические пуклеазы, которые называют ферментами рестрикции (рсстриктазамп) разрывают цепь только в последовательностях, обладающих симметрией второго порядка относительно определенной оси, папример:
Поскольку в обеих цепях обнаруживается одна и та же последовательность, располоишнпаи в протпвопо'юяишх направлениях, такпе ферменты всегда образуют разрывы в обеих цепях Описано много рес.т-риктаз с различной специфичностью (табл 9-3), что дает возможность расщеплят!- данные молекулы ДНК па ряд определенных более мелких фрагментов. Например, рсстриктаза Eco RI узнает последоичтельпость, представленную в ДНК вируса SV 40 (мол вес 3 10е) один рач, а рестрик-таза Hind II расщепляет ДНК SV- 40 в 5 различных местах (рис 20-11) Кроме того, последовательности присутствующие в одпой ДНК. часто отсут-
ААГ ЦТТ ТТЦ ГАА
Эндонукле па
Sryrmriry 1’%' •авяаяяаж
Эюпнуккаи
5 ч <Й ф
W
Полипу к icul ИЛ.1И1 а.
Рис. 9-14. Схема действия ферментов четырех различных типов расщепляющих и спитезн рующих связи остова ДНК.
ствуют в других ДНК. Например, ДНК фага Г7 (мол вес 25 • 10е) но содержит ни одной последовательности, узнаваемой ферментом Eco RI:
ГАА ТТЦ ЦТТ ААГ
Рестриктазы в настоящее время стали важнейшим инструментом изучения ДНК- Они пе только позволяют превращать кольцевые молекулы в линейные, имеющие определенные концевые последовательности, но дают также возможность выделить достаточно короткие фрагменты ДНК. в которых можно непосредствеипо определить последовательность нуклеотидов Еще два года назад даже маленькие молекулы ДНК казались слишком большими, чтобы можно было всерьез заняться изучением их последовательпостей пук шотидов Однако в настоящее время можно с помощью довольно простых методов определить последовательность 50—400 нуклеотидов (рис. 9 15).
ПАЛИНДРОМЫ
Неожиданным следствием расшифровки последовательностей нуклеотидов ДНК было обнаружение широко распространенных инвертированных повторяющихся последовательпостей (палиндромов), в которых одна и та же (или почти одна и та же) последовательность располагается г двух цепях в противоположных направлениях симметрично относительно оси / ... ГТАТЦЦГГАТАЦ \
симметрии » серодине палиндрома (например, цдТАГГЦЦТАТГ )
Некоторые палиндромы, например пачлпдромы, узнаваемые той или иной реетриктазой (табл. 9-3), относительно воротки (от 3 до 10 основании
Реп.и/кауил ДНК
Таблица У 3 После чояательнссти, узнаваемые некоторыми рес-триктааами
Микроорганизм Обознвчснне Участок узнавания Число мест узпяюпип в ггпимах
из которого пыде in ют фермента некоторых вирусом
энпоиуклеаву
Расщспляе Ось сим SV-40') Ь*) Аденови
мая связь метрии рус 2 s)
Б |
Escherichia coli KY13 Eco RI ГАА ТТЦ 1 Б
ЦТТ 4АГ
•V \ t
Hemophilus influenzae Hind II ГТПир ПурАЦ 5 34 720
Предыдущая << 1 .. 87 88 89 90 91 92 < 93 > 94 95 96 97 98 99 .. 317 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed