Молекулярная биология гена - Уотсон Дж.
Скачать (прямая ссылка):
446 487 223 23 187 58 169
! 1 i 1
1 1 1 1 1 I
1 1 I !i 1 1
1 1 1 1 I
1 I
1 1 1 1 г !!
174 176 1<Ь 210 ll2 233 234
-ТирЛей Грс Гли I ш Г ли Сер
1! ! II II
Ц не Apr Иле Асп Лей
Аминокислота ь ферменте дикого типа Аминокислота и мутантном ферменте
Рис 8-1Ч Коллинеарность гена и его белконого ирод* кта
В качестве иллюстрации приведена генетическая карта одно» читвертоп пасти гена, кодирующего последовательность амшокцелот и Сетке -\ тршлофан-еннтазы Ь coli. Числа со стрелками (*-0,04—*- и ч и ) выражают рассгоннии на карте (частоты рекомбинации)
межд.\ различнммп ыутацпнмп (Л44С, A4S7 и т. п.). затрагивающими синтез трнптофая-синтазы Числа, относящиеся ic последовательности ампнокгелот, обозначают ноложе-оие д аннон аминокислоты в белке А, содержащем J67 ачннокпелотпых огтатков. NHj-консц отрезка цени находится слева иа схеме.
МУТИРУЮЩИЙ УЧАСТОК МОЖЕТ СУЩЕСТВОВАТЬ В НЕСКОЛЬКИХ АЛЬТЕРНАТИВНЫХ ФОРМАХ
Б неактивной триитофаи-синтазе, выделенной из разных мутантов, замены аминокислот не всегда совпадают, даже если мы имеем дело с разными му тациями в одном и том же мутирующем участке гона (доказательством того, что мутации затрагивают один и тот же участок, служит отсутствие рекомбинантов дикого типа). Гак, например, у разных штаммов бактерии мутация в одном и том же мутирующем участке может привести к замене глицина либо валином, либо глутаминовой кислотой Этот результат означает, что мутирующий участок мсякет существовать но крайней мере в трех альтернативных формах. В следующей главе мы обсудим экспериментальные данные, свидетельствующие о том, что мутирующие участки —• это дезоксинуклеотиды, из которых построены гены (участки молекулы ДНК) Известно всего четыре типа дезоксинуклеотидов, и, следовательно, можно думать, что генетическнн анализ никогда ие выявит больше четырех альтернативных конфигураций для какого бы то ни было мутирующего участка
ОДНА АМИНОКИСЛОТА ОПРЕДЕЛЯЕТСЯ НЕСКОЛЬКИМИ СОСЕДНИМИ МУТИРУЮЩИМИ УЧАСТКАМИ
Между мутирующими участками и аминокислотами не существует соотношения 1 1. Напротив, генетические данные показывают, что многие,
если не все. аминокислоты определяются совместным действием иесколь кнх соседних участков Доказательства этого были получепы при изучении замея аминокислот в положении 210 упомянутого фрагмента тринто фан-с.пнтазы {рис. 8-10). Из дикого тина Е. сой под денствием мутагена был получен мутант А23, у которого глицин в этом положении заменен аргинином, и мутант А46, у которого глицин заменен глутаминовой кислотой Различие между мутантами А23 и А46 касается разных мутирующих участков, так как при гепетическом скрещивании этих мутантов получаются рекомбинанты дикого типа (у которых в положении 210 стоит глицин; рис S-М) Если бы обе мутации затрагивали один и тот же мутирующий участок, то рекомбинанты дикого типа, конечно, не могли бы образоваться но очень низкая частота рекомбинаций указывает па то, что данные мутации, по-внднмому, находятся рядом.
Другого рода данные в пользу того же заключения былн получены из наблюдений над действием мутагенов на сами мутанты А23 и А46 Оказа лось, что при этом можно получить новые штаммы, у которых в положении 210 снова стоит глицин Эти обратные мутации скорее всего восстанавливают в участье первичной мутации исходную конфигурацию (т е копфя гурацию дикого тина). Однако нри обработке мутагенами появляются также и штаммы, у которых в положении 210 произошло новое замещение Очень важно то обстоятельство, что типы возможных замен у штаммов А23 и А46 различны. У штамма А23 стоящий в положении 210 аргннин может замещаться, помимо глицина (обратная мутация), также еерииом и треонином, тогда как у штамма А46 мутации ведут к замене глутаминовой кислоты на аланин и иалин (опять таки не считая глицнна). У штамма А23 мутации никогда не приводят к замене па аланин и валил, а у штамма А46 — к замене иа треонин и серии. Это было бы очень трудно объяснить исходя из допущении, что данным двум мутациям (А23 и А46) соответствуют различия в конфигурации одного и того же мутирующего участка Если же эти мутации затрагивают два разных мутирующих участиа. то тогда объ ясиить наблюдаемые соотношения можно Так, ианрнмер. можно представить себе, что для замены аргииина валином требуется изменение обоих участков; это совместное измеиение должно, очевидно, происходить со
Т риггтофаисин газпы и ген дикого типа
шшшшп
I лпцнп
/ \
Место мутации А23 к/ ^ Место мутации Л 46
Ген
нс«.ушии1
мчацию;
А23
ШШ1ШЩ -1? 0000D1D0D
20» hB»H 211 ч aiv Hffi
Аргинин Г i> 1 аминовая кисюга
А 23 Аргинин
Л 46 Г лутаминоваи*! кислота
