Молекулярная биология гена - Уотсон Дж.
Скачать (прямая ссылка):
геназе
и 206000 Прикреплен к внутрен ? Нечувствителен 3 ч
(миозин?) ней поверхности кле
точной мембраны (?)
А 47000 В плазматической мемб Есть » 3,6 ч
ране
l) По данным электрофореза в полиакриламиде с додецилсульфатом натрия. Этот метод дает зава* щрнпыр оценки молекулярного веся, гели белок содержит итого сахарных групп-
СМЛСН.)л СО NH II \ /
I ULPAMII I (Ц1'И
О
0г-
Рис. 18-29 Сиитез гакпиоандои Гори аоитальнои стрелки» указан этап, который, ш видимом*, блокирован и опухолевых клетках. Нормальные клетки ра;ат все четыре гапглиозпда, и то время кнк и опухолевых i имеется в основном лишь самый простои пз ~—I.M3 Указан углеродиьш атом цер&ми ia, к котором^ последовательно ирисоеишяются остатки сахаров 1 лк— глюкоза, Га т — галактоза, Л ЯК — аце-тилиеираминовая кислота, Гал А — Х-ацети хгалактозамиа, Ферменты обозначены цифрами- J — глкжпзшгтранс-фераза, 2 — галактозилтрапсфераза, I — сиалилтрансфсрава, 4 — ацетил гмакточамишмтрансфераза, 5 — гала-кгозплтрансфераза 6 — снялилтранс-фераза
ЦМЮ
ЦМФ
-Г ik-|.i I Г1чЛ 1,п
I
АПК
|ца>|-г «.-(.и ft
--- I 1
I АПК АПК j© 1м®4—А
I ИЕН Глк 1 ал-Га |Д Г m
I-----1 | [
ЛИК АПК
R1
ED
ЕИ
И
тате отбора после какого-то первичного изменения. Сходная дилемма встает н при оценке изменений гликолипидов, не содержащих сватовой кислоты, в клетках хомячков- Опять таки выясняется, что некоторые лилии трансформированных клеток содержат менее сложные компоненты (рис 18 30) Но и здрсь такие изменения либо возникают ие на самых ранних этапах вирусной трансформации, либо отмечаются не во всех линиях клеток, трансформированных данным вирусом.
В последние годы значительно больше внимания стали уделять изучении) главных белковых компонентов нарукпон плазматической мембраны, особенно пнконротеидам, поверхность которых, выступающая
(ЦП') |
и
0
0
ЦЕР }-Глк Г ал-Гал-Г,ал А
| 11LP |-Г ж-Гал-Гал -Гал А Гал А
Рис 18-30 Путь синтеза глнко.чииидов в кликах хомячка Превращение ГЛ 2 в 1Л-3 в опухолевых клетках хомячка подавлено, что приводит к образованию меньших количеств ГЛ-3, ГЛ-4 и ГЛ-5 ГЛ 1 — церамлд-моногексозид, ГЛ-2 — церамицдигексозид, ГЛ 8 — церампдтритексозид 1Л 4 — церамвд-тетрагеигоадд, 1Л-5 — церамидиенталчко-зцд = антигеи Форемана. Остальные сокращения те гке, что и на рис. 18-20,
наружу, несет углеводные Группы (табл. 18-3). Возможно, что здесь уда лось обнаружить изменения, присущие всем типам раковых клеток Одно из них — это утрата трансформированной клеткой поверхностного гликопротеида с мол. весом около 46 ООО (рис 18-31). Это изменение происходит па очень раннем этапе трасформацпи и потому может претендовать па роть первичного события Предстоит еще выяснить, чем обусловлено резкое снижение уровня гликопротеидов в трансформированных клетках — сокращепием их синтеза нлн увеличением отдачи во внеклеточную среду. Еще одним характерным изменением является медленное исчезновение бодка с мол. весом около 240 ООО, который находится иа наружной поверхности. Оно происходит спустя долгое время после полного проявления «раковой» морфологии, так что отсутствие
Рис 18-31. Сравнонио важнейших белковых компонентов нормальной куриной клетки и клетки, трансформированной вирусом саркомы Рауса (Robbins et al. Cold Spring Harbor Syrnp, XXXIX, 1173, 1975).
Белки были окрашены после эгектрофорсза в полиакриламидном геле, в котором разделение ыдот но молекулярному весу. В трансформированной клетке содержание трех бельов 4, й ц7 характерных д 1я нормальной клетки значительно спижело, а иногда их даже вовсе нет.
данного белка, видимо, нельзя считать существенной особенностью ракового состояния клетки.
Более ва.кным признаком могло бы быть отсутствие белка с мол. весом около 200 ООО, который исчезает после трансформации клеток вирусом саркомы Рауса и аденовирусами По величине молекулы он близок к миозину, и возмолшо, что речь идет здесь о каком-то изменении в организации внутриклеточных фибрилл мышечного тина.
ИЗБИРАТЕЛЬНАЯ СЕКРГЦИЯ ПРОТЕАЗ ОПУХОЛЕВЫМИ КЛЕТКАМИ
Любая форма рака, за исключением рака кроветворных ткапеи, характеризуется внеклеточной секрецией аномально больших количеств прстео-литическия ферментов Хотя и нормальные клетки обычно секретируют протеазн в гранулах (лнзосомах'*) , в опухолевых клетках этот процесс значительно усилен. Глашюп из этих столь избирательно секретируемых нротеаз является фермент, называемый «клеточным фактором»; ею мол, вес около 40 ООО. В растущих опухолях, а также в кулыуре клеток основное действие этого белка, по-видимому, состоит в протеолитической активации инертного сывороточного белка нлазминогена В результате образуется п хазмин — протеолнтическин фермент, известный до последнего времени главным образом по его способности растворять сгустки крови (рис. 18-32). В результате этого каскадного процесса в неносред ственнон близости от всех опухолевых клеток образуются большие количества протеолитическн активных белков. Б связи с этим возникает вопрос о чувствительности клеточных поверхностей к плазмину Действи тельпо ли этот фермент действует подобно трипсину, которым в опытах
