Молекулярная биология гена - Уотсон Дж.
Скачать (прямая ссылка):
Оба оператора, левый и правый, содержат приблизительно по 75 пар оснований, причем в каждом из шгх находятся три сходных, но не одинаковых, симмстричиых участка связывания для димеров репрессора (рис 15-21 и 15-22). Каждый участок связывания состоит приблизите 1Ь но из 17 пар оснований, причем эти участки отдетены друг от друга областями с повышенным содержанием ЛТ-ттар. В значительной степеии перекрывающиеся последовательности Я-операторов представляют собой соответ-
1 евы й оператор П раин и опера top
Чевый промотор
V часгок связывания peri ресюра
С| Ipenpeccopl
Промотор регрессор»
I
.Ирины I
I и промотор
А
I им
Н>
<г
о
Б
Рпс 15-20 При лпзогения (А) образуется только ыРНК для репрессора фага Я. Когда репрессор инактивируется (/»), начинается транскрипция ранних фагом их мРПН (с чева
в справа)
Участь богатым АТ шрам и
Учасюк рогаты и АТ парами
Инццмщия транскрипции геьд 'taf'
ТАллт1[глт11ЛЦ11П1ЛАГГГЛТАААТАтГААиАЦЦГГГи1уГТТГШТАТТТТАиЦ.Ти.ТГГигП^АТААТ1УТТГЦЛТГГАЦТААГГАГПТГ
АТТГАГАТАГТГги1ГТТЦЦЦТАТТГАТАГ/17-ГГТГГ1(АЦГ1МйААШ'ГАТААААТГГ/1ГАЦ11ГЦЦЛЦГА7ТА1ЩЛА11,ГГАЦАТГАТТ1111Тци.Щ
76 70 €5 SO 55 SO 45 40
Л ос пело c;i тел ьн<н. т и, обеспечивающие узнавание Р|1 К-полимеразы
Рис. 15-21 Последовательность нуклеотидов характеризующиеся симметрией второго по-в правом операторе фаг» к. рядка, что даст им возможность сеязшагь
>казаны три участка связывания репрессора. Димеры репрессора.
Каждый участок имеет последовательности
Участки;! И К фага дикого тигы
Участки ДНК мутантов
Oti а т А Т Ц А Ц Ц г ц- --- у2 --- ---¦ т Т и А[А]Ц Г
Ь ТАЦЦА и Г Г г- Чо? ---> г Гг] ц ц А Ц т Г г
CV а т А т Ц А Ц и г ц
Ь Т а Ц и Т а т г г
а Ц А А И. А ц ц г и
Ь Т А Т Ц Г и т г г
о*8 а Ц А А Ц А и г Ц А - -vH- ---> Ц А Ц А 0Г Ц
Ь Т А А Ц А И ц г г
Or-* а Т А Т ЦЦ И т т г
Ь Т А Т Ц А наг ц
Ol3 а т А Т Ц А ц ц г и
тЯа„теЧ„А8 «яЧЛ Us С II о
Чг А3 Т2 ТАЦ, ь ot* 6 2 0
Uz 4i Г, г, А, Ofi' 5 2 1
тл Ol* 4 2 2
о«г 5 1 2
<V 5 1 2
Рис. 15-22. Сравнение половин известных участков связывании репрессора у фага Я (Mamatis et al., 1У75).
Последовательности записаны в направлении 5* 3*; а — транскрибируемая цепь, Ъ —
комплементарная цепь. Показаны также замены основании в результате трех мутации (V?, V101l VN), приводящие к снижению эффективности связывания репрессора Эти замены затрагивают пары основании, неизменно встречающиеся во всех известных участках. В рамке впизу справа схема, показываю-
щая наличие симметрии вращения второго порядка в участках связывания репрессора Ось симметрии проведена через 8-е основание каждого участка (все они состоит из 17 пар оснований). Типы симметрии для 16 основании, расположенных по обе стороны от 9-го обозначены следующим образом' С — совершенная симметрия, П — симметрия в отношении расположения пуриновых и пиримвд* новых оснований, О — отсутствие симметрии При случайном расположении основании симметрия должна была бы быть С2Пй08.
ствующие промоторы, участвующие в первичном узнавании PIIK-по ли-меразы и последующей инициации синтеза РНК. Весьма важно, что участки с наибольшим сродством к Х-репрессору непосредственно примыкают к стартовым точкам синтеза РНК, в то время как более диотально рас полоякенпые участки связывают репрессор менее эффективно В чем смысл наличия нескольких участков связывания репрессора в каждом Х-операторе, до сих пор неясно, хотя само собой напрашивается предположение, что последовательное связывание репрессора делает еще более невероятным расплетание промоторного участка, а это условие необходимо для связывания РНК-полимеразы
Инактивация Я-репрессора зачастую происходит в условиях, когда синтез ДНК ингибирован (например, после УФ-облучения). Это дает возможность начаться транскрипции мРНК иа двух раиних оперонах (рпс. 15-20) Один иэ этих оперонов составляют в основном гены, содержащие информацию для белков, участвующих в рекомбинационных процессах, в результате которых фаговая хромосома (гл. 7) исключается из хромосомы Е. coli. Второй оперой содержит, помимо прочих, гены, продукты которых обеспечивают репликацию фаговой ДНК
