Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уильямс Б. -> "Методы практической биохимии" -> 91

Методы практической биохимии - Уильямс Б.

Уильямс Б., Уилсон К. Методы практической биохимии — М.: Мир, 1978. — 273 c.
Скачать (прямая ссылка): metodiprakticheskoybiohimii1978.djvu
Предыдущая << 1 .. 85 86 87 88 89 90 < 91 > 92 93 94 95 96 97 .. 112 >> Следующая

Прибор для измерения pH. Применяемое для измерения pH оборудование состоит из стеклянного электрода, электрода сравнения с солевым мостиком (разд. 7.3) и рН-метра. Иногда фирменные электроды включают в себя одновременно и стеклянный электрод, и «наружный» электрод сравнения, как показано на рис. 7.4.
Конструкция стеклянного электрода изображена на рис. 7.3. На конце стеклянной трубки электрода имеется тонкостенный шарик, сделанный из «мягкого» натриевого стекла с низкой точкой плавления. Толщина его стенок всего 0,005 см, поэтому обращаться со стеклянным электродом нужно очень осторожно, так как его легко повредить. Электрический контакт с внутренней стороной мембраны осуществляется через раствор, в который погру-
220 Часть III. Аналитические методы
Рис. 7.4. Комбинированный электрод, _ состоящий из электрода сравнения и стеклянного электрода.
/ — внутренний электрод (Ag/AgCl); 2 — солевой мостнк; 3 — «наружные» электрод сравнения; 4 — жидкий контакт; В — стеклянная меыбрана; 6 — 0,1 М НС1.
жен внутренний хлорсеребряный электрод сравнения. Иногда в качестве внутреннего электрода сравнения применяют платиновый электрод, погруженный в 0,1 М раствор соляной кислоты, насыщенный гидрохиноном.
Э.д.с., создаваемую элементом, состоящим из стеклянного электрода и электрода сравнения, необходимо регистрировать приборами, обладающими высоким сопротивлением, т. е. потребляющими незначительный ток в системе: большая сила тока вызывала бы изменения в концентрации ионов, а следовательно, и pH. Требуемыми качествами обладают применяемые при рН-метрии ламповые электрометры (рис. 7.5). В триоде электроны, перемещаясь от катода к аноду, создают ток, сила которого существенно зависит от потенциала сетки. Разность потенциалов может быть определена путем подключения к катоду и сетке Лампы. Лампу либо включают в схему, непосредственно регистрирующую потенциал, либо используют в качестве нуль-индикатора. Последний способ точнее, однако требует некоторых навыков, и изменение потенциала в этом случае нельзя регистрировать непрерывно.
Для специальных измерений pH-существует модифицированное оборудование; например, имеются приборы, предназначенные для измерения pH крови, pH в различных участках ротовой полости, pH тканей и содержимого желудка. Обычные стеклянные электроды не годятся для измерений в сильно щелочных средах; для этих целей необходимы мембраны из специального стекла, содержащего щелочноземельные металлы или литий. Такого рода стеклянные электроды сохраняют линейную зависимость измеряемого потенциала от концентрации водородных ионов вплоть до pH 13. К счастью, в биологических исследованиях эта область, как правило, не представляет практического интереса. Для микробиологов очень удобны стеклянные электроды, которые можно стерилизовать паром. В полевых условиях пользуются портативным оборудованием, состоящим из рН-метра и электродов.
Ход работы. Новые или высохшие электроды перед работой необходимо вымочить в течение нескольких часов при pH 7 в воде или буферном растворе. Рекомендуется также активировать элект-
ь
кХ
Гл. 7. Потенциометрия, электрометрия и полярография 221
Рис. 7.5. Триод.
/ — анод; 1 — сетка; 3 — вакуум; 4 — катод (раскаленная проволока).
2,
X
роды выдерживанием их от 12 до 24 ч в .0,1 М растворе НС1, однако эта процедура не обяза- -т4
тельна. Электроды следует держать в дистил- — 5НГ_и
лированной воде, поскольку высушивание их е| —
приводит к изменению потенциала асимметрии, что требует частой калибровки прибора. Повторное вымачивание, как правило, восстанавливает электрод почти до нормального состояния, однако вследствие высыхания поверхность электродов изнашивается.
Для калибровки прибора необходимо иметь два буфера с разными pH. Исследуемый и стандартные буферные растворы должны иметь одну и ту же температуру; ручку температурной компенсации необходимо установить в соответствующее положение. Стеклянный электрод (и внешний электрод сравнения, если он смонтирован отдельно) погружают в буферный раствор, осторожно перемешиваемый для приведения системы в равновесие, и прибор настраивают в соответствии с известным значением pH. Затем электроды вынимают из раствора и отмывают их дистиллированной водой. После этого электроды погружают в другой буферный раствор; показания рН-метра должны соответствовать pH этого второго раствора. Отсутствие такого соответствия указывает на нарушения изоляции или повреждения электрода (трещины или царапины в мембране).
Стеклянный электрод с успехом применяется для измерения pH растворов, содержащих соли металлов, окисляющие или восстанавливающие агенты, так как посторонние воздействия не влияют на его показания. Стеклянный электрод нельзя использовать для точных измерений pH выше 9 или 10 (за исключением электродов специальной конструкции), а также в растворах с низкой концентрацией воды. Можно применять стеклянный электрод для измерения pH растворов, содержащих белок, и желатиноподобных растворов, однако нужно следить, чтобы эти растворы не высыхали на поверхности мембраны: образующаяся при этом пленка будет ухудшать реакцию электрода.
Предыдущая << 1 .. 85 86 87 88 89 90 < 91 > 92 93 94 95 96 97 .. 112 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed