Методы практической биохимии - Уильямс Б.
Скачать (прямая ссылка):
140 Часть II. Методы разделения
Методы, применяемые для разделения, должны основываться на всех возможных различиях в свойствах молекул. После применения какого-либо одного из них применение другого, основывающегося на тех же физических свойствах, нецелесообразно, поскольку это скорее всего даст лишь относительно небольшую дополнительную очистку.
Когда встает вопрос о выборе конкретного метода (или методов) очистки вещества, следует иметь в виду, что, хотя в принципе бывает возможно применить несколько методов, предпочтительными оказываются лишь некоторые из них. При этом следует принимать во внимание ряд факторов:
а) с какой целью — аналитической или препаративной — проводится разделение; в зависимости от этого применяют метод с высокой разрешающей способностью и (или) емкостью;
б) физические свойства вещества, например растворимость, летучесть, молекулярный вес и заряд;
в) стабильность исследуемого вещества в данных условиях;
г) имеющиеся в литературе данные по разделению сходных соединений;
д) доступность оборудования;
е) стоимость процедуры.
Ниже приводится таблица, которая составлена с целью помочь читателю подобрать наиболее подходящие методы для разделения некоторых веществ. Нужно подчеркнуть, что эта таблица является только руководством к выбору методов. Вероятно, можно найти частные случаи, для которых рекомендации -но применению того или иного метода, даваемые в таблице, не будут соответствовать результатам, полученным экспериментально.
Руководство к выбору методов разделения некоторых биологических молекул
Методы
Хроматография к.
Вещества разделитель адсорбционная адсорбционная проникающая газожидкост противоточ- ионообменная к Электрофорез К
ная (бумага) (тонкий слой) (колонка) ная иая сб о,
* и
35 ЙК
Я « %
¦0* I&
•&
л
Аминокислоты + ++ ++ +++ _ Ь+ _
Пептиды + ++ --- + ++ ++ + ~Ч- -
Белки + ++ +++ + + +++ -++ ++-Ь
Пурины и пиримидины + +++ н-
Нуклеиновые кислоты + --- ++ --- ++ + +++ +-Н-
Моио- и днсахариды ++ н---ь + --- ++ --- + --- + ---
Олиго- и полисахариды --- + +++ --- --- --- --- н---ь
ТКирные кислоты + Ч + ++
Фосфолипиды + + --- --- --- - ---
Терпены, каротенонды, хлоро + +++ +++ --- + + --- --- + ---
- ++ ++ - ++ “М-"Ъ - - -
Часть III
АНАЛИТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Рассмотренные в этом разделе методы широко используются для количественных и качественных исследований биологических систем на молекулярном уровне.
Глава 5
СПЕКТРОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Спектроскопия на протяжении ют уже нескольких десятков лет используется химиками для структурных исследований и изучения химических превращений. Главное преимущество спектральных методов состоит в том, что вещество в процессе исследования не разрушается. Кроме того, методику исследований легко модифицировать и автоматизировать. Такие свойства спектроскопических методов делают их незаменимыми при исследовании биологических объектов.