Методы практической биохимии - Уильямс Б.
Скачать (прямая ссылка):
Неподвижная фаза Максимальная Исследуемые вещества
температура,
°С
¦Неопентилгликольадипат...... 200] Стероиды
Диклогександиметанолсукцинат . . 245J Барбитураты
Диэтилеигликольадипат ...... 1951
Диэтиленгликольсукцинат ..... 180 Жирные кислоты
Полиэтиленгликольадипат ..... 195
Динонилфталат .......... 145 Эфиры, спирты
Полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат . 1501 Полярные соединения
Сорбитанмоноолеат......... 145J Жирные кислоты
Тетраоксиэтилендиамин....... 125 Летучие амины
Бензилдифенил .......... 100 Ароматические соедине-
240 Жирные кислоты
Сквален.............. 145 Углеводороды
Силиконовое масло........ 250)
Полиметилсиликоновая смола . . . 300 Соединения с высокой
Метилвинилсиликоновая кислота . . 290
.Метилфенилсиликоновая "смола . . . 290 температурой кипения
Метилфенилвинилсиликоновая смола 290J
Трифторопропилметилсиликон . . . • 245 Стероиды
Диглицерин............ 140
Полиэтиленгликоль 400 ...... 851
Полиэтиленгликоль 600 ...... 100
Полиэтиленгликоль 1000 ...... 120 Полярные соединения
Полиэтиленгликоль 1500 ...... 150
Полиэтиленгликоль 20М...... 210
3.5.4. Наладка колонки
Для работы с колонкой необходимо знать ее эффективность {Е). Эффективность колонки измеряется числом теоретических тарелок или ступеней уравновешивания (разд. 3.1) и рассчитывается <рис. 3.9) по формуле
От эффективности колонки зависит скорость перемещения газа-носителя; обычно она лежит в интервале 50—60 см3-мин-1. Как правило, колонки имеют приблизительно 1500 теоретических тарелок на метр; естественно, что чем больше число теоретических тарелок, тем выше эффективность колонки.
4*
84 Часть II. Методы разделения
3.5.5. Детекторы
Наиболее часто используемый детектор — это пламенно-ионизационный детектор (ПИД); он годится для анализа почти всех органических соединений и, благодаря тому что его чувствительность остается линейной в широком диапазоне концентрации, может обнаруживать вещества в количестве до 1 нг. Одним из электродов является пламя, образуемое при воспламенении поступающей в детектор смеси водорода и воздуха. Другим электродом служит медная или платиновая проволока, укрепленная в верхней части пламени (рис. 3.8). Выходя из колонки, компоненты пробы попадают вместе с газом-носителем в детектор и ионизируются в пламени, соответствующий сигнал усиливается и регистрируется на самописце. Газ-носитель, проходя через детектор, создает небольшой фон, который регистрируется самописцем в виде базовой линии.
Детектор с захватом электронов (ДЗЭ) применяется для регистрации только таких соединений, которые способны захватывать электроны (например, галогенсодержащие соединения). Этот детектор особенно удобен для анализа соединений с высоким содержанием хлора, например пестицидов, ДДТ, диэлдрина и элдрина. Детектор отличается высокой чувствительностью и может обнаруживать эти соединения в количестве до 1 пг, однако диапазон, в котором сохраняется линейность, у него гораздо уже, чем у ПИД. ДЗЭ имеет источник радиоактивного излучения (63Ni), ионизующего находящийся в колонке газ-носитель; образовавшиеся электроны создают ток между электродами, к которым приложено напряжение. Анализируемые вещества, попадая с колонки в детектор, захватывают электроны, ток уменьшается, и это изменение регистрируется самописцем.
Термоионный детектор обладает особой чувствительностью к фосфоорганическим соединениям и поэтому широко применяется для анализа фосфоорганических пестицидов. Присутствие их даже в ничтожно малом количестве резко повышает диссоциацию на ионы бромистого цезия, служащего электродом. Возникающее при этом увеличение тока усиливается и регистрируется самописцем. Недавно были созданы азотные детекторы, являющиеся разновидностью термоионных детекторов; у них электрод изготовлен из хлористого рубидия. Азотные детекторы обладают чувствительностью только к фосфоорганическим и азотсодержащим соединениям.
3.5.6. Параметры удерживания и качественный анализ
При стандартных условиях (температура, скорость пропускания газа-носителя и т. д.) время прохождения исследуемого соединения через колонку является величиной постоянной и называется вре-
