Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уилсон Дж. -> "Молекулярная биология клетки " -> 76

Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.

Уилсон Дж., Хаит Т. Молекулярная биология клетки — М.: Мир, 1994. — 520 c.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyakletki1994.djvu
Предыдущая << 1 .. 70 71 72 73 74 75 < 76 > 77 78 79 80 81 82 .. 308 >> Следующая

электрофореза и радиоавтографии.
ном состоянии приток белков на каждом этапе секреции точно равняется
их оттоку.) Затем вы гомогенизируете клетки, чтобы разбить ЭР и аппарат
Гольджи на отдельные везикулы, и разделяете последние путем
центрифугирования в градиенте плотности сахарозы, после чего измеряете
количество меченых альбумина и трансферрина в каждом из двух типов
везикул (рис. 8-20).
Где протекает медленная стадия конститутивной секреции
трансферрина, в ЭР или в аппарате Гольджи, и где-медленная стадия
конститутивной секреции альбумина? Каким образом описанные здесь опыты
позволяют вам определить это?
8-42 Поляризованные эпителиальные клетки должны производить
дополнительные операции по сортировке белков, так как их плазматические
мембраны разделяются на апикальную и базолатеральную области, несущие
разные наборы белков. Белки, предназначенные для этих двух участков, по-
видимому, мигрируют по направлению к ним прямо из аппарата Гольджи. Один
путь сортировки белков по этим областям мембраны мог бы состоять в
использовании для одного класса белков специфического сортирующего
сигнала, который бы активно узнавался и направлял белки к одной из
областей плазматической мембраны. Белки второго класса могли бы двигаться
к другой области мембраны по пути, не требующему сигнала (в соответствии
с остаточным принципом).
Чтобы выяснить детали этого последнего пути, рассмотрим
следующий эксперимент. Клонированные гены для нескольких чужеродных
белков были встроены в поляризованные клетки при помощи техники
рекомбинантной ДНК, чтобы они экспрессировались в этих клетках. (Клетки
других типов выделяли данные белки, но поляризованные клетки их не
экспрессировали.) После включения этих генов в поляризованные клетки
определяли, в каких участках мембраны они выделяются. Оказалось, что хотя
клетки и оставались поляризованными, чужеродные белки выделялись из них
практически в одинаковых количествах в апикальных и базолатеральных
областях мембраны.
А. Какой результат должен был бы получиться в эксперименте, если
исходить из предположения, что направление к одной области плазматической
мембраны происходит за счет активного сигнала, а к другой-по остаточному
принципу?
Б. Подтверждают ли эти результаты концепцию остаточного пути,
изложенную выше?
Везикулярный транспорт и сохранение индивидуальности компартментов (МБК
8.10)
8-43 Заполните пропуски в следующих утверждениях.
А. Везикулы, покрытые ____________, осуществляют опосредуемый
рецептором эндоцитозный транспорт от плазматической мембраны к
эндосомам, а также опосредуемый рецептором транспорт из транс-сети
Гольджи к эндолизосомам.
Б. Везикулы,___________, переносят заключенный в них материал из
ЭР в аппарат Гольджи, от j/мс-компартмента к промежуточному
компартменту и далее-к транс-компартменту этой органеллы.
8-44 Укажите, какие из следующих утверждений правильные, а какие-нет.
Если утверждение неверно, объясните почему.
126 Глава 8
__А. Чтобы внутриклеточная сортировка была специфической, кажда!
транспортная везикула должна нести на своей поверхности метку,
своего рода "молекулярный адрес", чтобы доставлять свое содержимое к
определенным клеточным мембранам.
__Б. Если прямое движение от ЭР к плазматической мембране происходит
автоматически, то постоянно присутствующие в ЭР и аппарате Гольджи
макромолекулы должны иметь сигнальные участки, благодаря которым они
селективно задерживаются внутри этш органелл.
8-45 Везикулярный транспорт по конститутивному пути между стопками Г
ольджи и наружу, к плазматической мембране, осуществляется, по-видимому,
в везикулах, не покрытых клатрином. Особенность такого вида транспорта,
называемого объемным, заключается в том, что содержимое аппарата Г ольджи
не концентрируете! в везикулах. Зная, что транспорт в везикулах, покрытых
клатрином, связан со значительным концентрированием веществ, вы
сомневаетесь в том, что при объемной конститутивной секреции ж происходит
концентрирования.
Чтобы выяснить, концентрируются ли вещества в везикула! при
конститутивном пути, вы заражаете клетки вирусом везикулярного стоматита
(VSV) и следите за появлением вирусного G-белка. Ваша смелая идея
заключается в том, чтобы сравнит! концентрацию G-белка в полости стопок Г
ольджи с его концентрацией в транспортных везикулах, не покрытых
клатрином. Вв хотите измерить концентрацию G-белка, приготовив тонкие
срезь клеток, инфицированных вирусом VSV, и проинкубировав их со
специфическими антителами к G-белку, меченными частицам золота. Частички
золота видны на электронных фотомикрографиях как маленькие черные
пятнышки, поэтому довольно просто подсчитать их в полости транспортных
везикул (как полностью сформированных, так и отпочковывающихся) и в
аппарате Г ольджи. Вы определяете концентрацию G-белка двумя способами:
1) по числу частиц золота на поперечном срезе и 2) по числ] частиц золота
Предыдущая << 1 .. 70 71 72 73 74 75 < 76 > 77 78 79 80 81 82 .. 308 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed