Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
высокой точностью определить ошибочное включение цистеина в белок.
Бактерии метили 35S04 [уд. активность 5,0 х 103 импДмин х х
пмоль)] в пределах точно одной генерации и при избытке немеченого
метионина (в этих условиях отсутствует какое-либо включение
радиоактивности в метионин). Образованный в результате флагеллин был
очищен и подвергнут электрофорезу в полиакриламидном геле. В 8 мкг
флагеллина, выделенного из геля, содержалось 300 имп/мин 35 S-
радиоактивности.
A. Какая доля молекул флагеллина, синтезированных в период ме-чения,
содержит цистеин? Считайте, что количество флагеллина удваивается за
период мечения и что удельная активность цистеина во флагеллине равна
удельной активности 35S04, используемой для мечения клеток.
Б. Во флагеллине цистеин ошибочно включается по аргининовым кодонам CGU
и CGC. Объясните на основе взаимодействия кодон-антикодон, какая ошибка
совершается при неправильном включении цистеина вместо аргинина?
B. Если считать, что во флагеллине содержится 18 молекул аргинина и что
все кодоны аргинина равноправны, то какова частота ошибочного считывания
каждого чувствительного кодона аргинина (CGU и CGC)?
Г. Предполагая, что частота ошибки в расчете на один кодон,
рассчитанная в пункте В, одинаково приложима к кодонам всех
Основные генетические механизмы 15
Время, мин
Рис. 5-7. Действие ингибиторов эдеина и циклогексимида на синтез белка в
лизатах ретикулоцитов (задача 5-10).
аминокислот, определите долю молекул, которые синтезируются
правильно, для белков длиной в 100, 1000 и 10000 аминокислот.
(Вероятность безошибочного кодирования равна единице минус вероятность
ошибки.)
5-10 Вы выделили из культуры бактерий антибиотик эдеин. Он ингибирует
синтез белка, но не затрагивает ни синтеза ДНК, ни синтеза РНК. При
добавлении эдеина к лизату ретикулоцитов синтез белка прекращается спустя
некоторое время, как показано на рис. 5-7. В отличие от этого
циклогексимид останавливает синтез белка сразу после добавления. Анализ
лизата после ингибирования эдеином, проведенный методом центрифугирования
в градиенте плотности сахарозы, показал, что после остановки синтеза
белка в лизате не оставалось полирибосом. Вместо них вся мРНК глобина
накапливалась в аномальном пике 40S, содержащем также эквимолярные
количества малых субъединиц рибосом и инициа-торную тРНК.
A. Какой этап в синтезе белка ингибирует эдеин?
Б. Почему синтез белка прекращается не сразу после добавления эдеина?
От чего зависит длительность этой задержки?
B. Следует ли ожидать исчезновения полирибосом, если вы добавите
одновременно с эдеином циклогексимид?
Механизмы репарации ДНК (МБК 5.2)
5-11 Заполните пропуски в следующих утверждениях.
A. Большая часть спонтанных изменений в ДНК быстро ликвидируется за
счет процесса исправления, называемого_____________; лишь
изредка механизм поддержания постоянства структуры ДНК не
срабатывает, и появившееся в последовательности нуклеотидов изменение
сохраняется; оно называется_____________
Б. Для генов, которые кодируют____________, участвующие в сверты-
вании крови, характерно накопление мутаций, не подвергающихся
давлению отбора.
B. Два наиболее распространенных изменения в ДНК-это
___________, возникающая в результате разрыва N-гликозидных
связей аденина или гуанина с дезоксирибозой, и___________, при
котором цитозин превращается в урацил.
Г. Репарация ДНК включает три этапа: узнавание и удаление измененной
части цепи ДНК ферментами, называемыми ______________; последующий
ресинтез удаленного участка ферментом __________ и сшивание разрыва,
оставшегося в цепи ДНК,
ферментом______________
Д. Нехватка основания, обычно соединенного с дезоксирибозой в молекуле
ДНК, быстро распознается ферментом__________________, кото-
рая разрезает фосфодиэфирный остов цепи ДНК в измененном участке.
Е. Каждая____________ узнает в ДНК измененные основания опреде-
ленного типа и катализирует их гидролитическое отщепление от сахара
дезоксирибозы.
Ж. Те повреждения ДНК, которые создают искажения в ее спиральной
структуре, удаляются с помощью механизма репарации
3. У Е. coli любая остановка репликации, вызванная повреждением
ДНК, служит сигналом для ______________, позволяющего преодо-
леть блок репликации и тем самым дающего клетке шанс на выживание.
5-12 Укажите, какие из следующих утверждений правильные, а какие-нет.
Если утверждение неверно, объясните почему.
__А. Фибринопептиды, которые отделяются от фибриногена при его
активации и образовании фибрина во время свертывания крови,
особенно полезны для оценки частоты мутаций, потому что они, по-видимому,
не связаны непосредственно с какой-либо жизненно важной функцией.
__Б. Оценки частоты мутаций, основанные на различиях в аминокислотном
составе между одними и теми же белками у разных видов, всегда будут
заниженными, поскольку некоторые мутации могут существенно затрагивать
