Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
A. В чем заключается основная ошибка в плане эксперимента?
Б. Как следует изменить план, чтобы исправить недостаток?
B. Если действовать по исходному плану, то можно ли подозревая что
какие-то другие типы мутантов (не имеющих отношеш к ядерному транспорту)
смогут выжить при данном способ отбора?
Таблица 8-1. Результаты опытов по выращиванию дрожжей, несущих плазмиды
pNL+ или pNL (задача 8-12)
Плаз Среда с Среда с
мида глюкозой галактозой
pNL+ Рост Г ибель
pNL~ Рост Рост
Внутриклеточная сортировка макромолекул 107
Транспорт белков в митохондрии и хлоропласты
(МБК 8.4)
8-14 Заполните пропуски в следующих утверждениях.
A. В митохондрии имеется четыре внутренних компартмента:
___________, __________, ___________, ___________ (в направлении
изнутри наружу).
Б. В хлоропластах имеется два дополнительных внутренних компартмента:
______________ и_____________
B. Белки цитозоля, предназначенные для импорта в митохондрии,
называются_____________.
Г. Считается, что импорт внутрь матрикса происходит в__________,
где внутренняя и наружная мембраны митохондрии, по-видимому,
соединяются.
Д. В хлоропластах имеется дополнительный, ограниченный мембраной
компартмент, называемый__________________
8-15 Укажите, какие из следующих утверждений правильные, а какие-нет.
Если утверждение неверно, объясните почему.
___А. Относительно немногочисленные белки, закодированные в геномах
митохондрий и хлоропластов, локализованы в основном во внутренних
мембранах этих органелл.
___Б. Митохондриальные сигнальные пептиды представляют собой ам-
фипатические а-спиральные структуры с положительно заряженными
аминокислотными остатками на одной стороне и отрицательно заряженными
аминокислотными остатками на другой стороне спирали.
___В. Движущей силой процесса встраивания митохондриального сигнального
пептида в наружную митохондриальную мембрану во время проникновения
белка-предшественника в митохондрию служит, по-видимому,
электрохимический протонный градиент.
___Г. Поскольку N-конец импортируемого белка может расщепляться
протеазой матрикса, а его С-конец доступен для действия наружных
протеаз, белки-предшественники, по-видимому, проникают через наружную и
внутреннюю мембраны одновременно.
___Д. Свернутое состояние пептидной цепи белка характеризуется более
низкой свободной энергией, чем развернутое, поэтому разворачивание
молекулы белка при переносе его в митохондрию связано с затратами
энергии.
___Е. Белки, предназначенные для внутренней митохондриальной мембраны,
по-видимому, проходят через наружную и внутреннюю мембраны в матрикс, а
затем встраиваются во внутреннюю мембрану.
_Ж. Поскольку в наружной мембране митохондрий имеются очень крупные
поры, она не является преградой для белков.
___3. Как в хлоропластах, так и в митохондриях движущей силой
транспорта белков-предшественников через наружную и внутреннюю
мембраны служит электрохимический протонный градиент.
8-16 Изучая импорт белков в митохондрии, вы обрабатывали клетки дрожжей
циклогексимидом, блокирующим движение рибосомы по мРНК. При исследовании
этих клеток с помощью электронного микроскопа вы с удивлением
обнаруживаете, что цитозольные рибосомы прикреплены к внешней поверхности
митохондрий. В отсутствие циклогексимида прикрепленных рибосом никогда не
наблюдалось. Чтобы выяснить причину этого явления, вы препаративно
выделяете митохондрии из клеток, обработанных цикло-
108 Глава 8
А Спирально-круговая проекция
Аминокислотная последовательность
Рис. 8-6. Возможные сигнальные пептиды для импорта в митохондрии (задача
8-17). А. Спирально-круговая проекция а-спирали. Числа показывают
положения первых 18 аминокислот а-спирали; аминокислота 19 должна
занимать такое же положение на проекции, что и аминокислота 1. Б.
Аминокислотные последовательности трех пептидов. N-концы расположены
слева; гидрофобные аминокислоты показаны серым цветом; заряд на
заряженных аминокислотах указан в кружке сверху; незаряженные
гидрофильные аминокислоты не имеют дополнительных обозначений.
е
К S
ее е
D Е ЩЩ R Т
Ф ФФ
"М^Я1" к I
ф
R
ф
R
Ф
S R
Ф
К
Ф
! R !
I А V .1
Ф
! Т R ЩШ s
Ф
R f L .
8-17
8-18
Рис. 8-7. Шесть компартментов хлоропластов (задача 8-18).
гексимидом, и экстрагируете мРНК, связанную с рибосомами, прикрепленными
к наружной поверхности митохондрий. Вы транслируете эту мРНК in vitro и
сопоставляете ее белковые продукты с продуктами мРНК из цитозоля,
транслированной таким же образом. Результаты четко показывают: рибосомы,
связанные с мембранами митохондрий, транслируют те мРНК, в которых
закодированы митохондриальные белки.
Вы поражены! Подтверждается то, что было хорошо видно на электронных
