Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уилсон Дж. -> "Молекулярная биология клетки " -> 58

Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.

Уилсон Дж., Хаит Т. Молекулярная биология клетки — М.: Мир, 1994. — 520 c.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyakletki1994.djvu
Предыдущая << 1 .. 52 53 54 55 56 57 < 58 > 59 60 61 62 63 64 .. 308 >> Следующая

вариабельны по последовательности генов и размеру (от 218 т. п. н. у
турнепса до 2400 т. п. н. у мускусной дыни). Частично эта вариабельность
может быть результатом переноса ДНК из хлоропластов в митохондрии.
В одном из экспериментов по изучению переноса генетического
материала между геномами органелл был использован определенный фрагмент
рестрикции из хлоропластов шпината, который кодировал ген большой
субъединицы фермента рибулозобисфос-фат-карбоксилазы. В митохондриальном
геноме этот ген не обнаружен. ДНК митохондрий и хлоропластов выделяли из
цуккини, кукурузы, шпината и гороха. Все препараты ДНК обрабатывали одной
и той же рестриктазой и образовавшиеся фрагменты разделяли с помощью
электрофореза. Затем фрагменты переносили на фильтр и гибридизовали с
радиоактивным фрагментом-зондом, полученным из ДНК хлоропластов шпината.
Результаты авторадиографии схематически представлены на рис. 7-23.
А. Трудно ли выделить митохондриальную ДНК, не загрязненную
хлоропластной ДНК? Как в этих экспериментах контролируется степень
загрязнения препаратов митохондриальной ДНК?
Б. Какие из этих препаратов митохондриальной ДНК могли содержать ДНК
хлоропластов?
7-36 Ваша коллега изучала два мутанта гриба Neurospora, называя их
несколько причудливо року и puny. Скорости роста у обоих мутантов почти
одинаковые, но гораздо ниже, чем у гриба дикого типа. Найти такое
вещество, которое стимулировало бы скорость их роста, не удалось. С
помощью биохимического анализа у каждого мутанта были обнаружены
отличающиеся от нормы спектры поглощения цитохромов. Для получения
генетической характеристики мутантов их скрещивали с диким типом и друг с
другом и определяли скорости роста потомков. Вашу коллегу результаты этих
опытов привели в недоумение.
Она объяснила, что при спаривании у Neurospora гаплоидные ядра
родительских клеток сливаются, а затем делятся мейотически с образованием
четырех гаплоидных спор, которые легко проверить на скорость роста.
Вклады родительских клеток в диплоид
98 Глава 7
Рис.:
ление с дел! после pet49<
Таблица 7-4. Генетический анализ мутантов Neurospora (задача 7-36)
Гибрид Протоперитециаль Оплодотворяющий Количество спор
Быстрый Медленный
рост рост
1 року х Дикий тип 0 1749
2 Дикий тип х року 1334 0
3 puny х Дикий тип 850 799
4 Дикий тип х puny 793 801
5 року х puny 0 1831
6 puny х року 754 710
7 Дикий тип х Дикий тип 1515 0
8 року х року 0 1389
9 puny х puny 0 1588
7-37 Мутанты дрожжей с нарушением функционирования митохондрш растут на
сбраживаемых субстратах, например на глюкозе, но не способны расти на
несбраживаемых субстратах, например на глицероле. Ядерные и
митохондриальные мутации можно рас познать методом скрещиваний. Почти 200
разных ядерных генга идентифицированы с помощью комплементационного
анализа ядерных мутантов petite (pet). Удивительно, что примерно в чет
вертой части этих генов мутации затрагивают экспрессию одногс
митохондриального гена или их ограниченного набора, не блоки руя
экспрессию остальных.
Например, у мутантов pet494 уровни всех известных продукте!
митохондриальных генов не отличаются от нормы, кроме уровн; субъединицы
III фермента цитохромоксидазы (coxIII). Однаи уровень и размеры мРНК,
кодирующей сохШ, остаются обычны ми. Таким образом, следует предположить,
что в экспрессии гена кодирующего сохШ, есть некий посттранскрипционный
этап, кото рый регулируется продуктом нормального гена РЕТ494. Эт(
соединение может быть необходимо для поддержания трансляцш мРНК,
кодирующей сохШ, или для стабилизации сохШ во врем! сборки комплекса
цитохромоксидазы. Чтобы разобраться в этом были отобраны и
проанализированы митохондриальные мутации приводящие к подавлению
дефекта, вызванного мутацией pet494 Все эти мутации оказались делениями,
при которых участок кодирующий сохШ, соединялся с нетранслируемым 5'-
участко" другого гена, как схематически изображено на рис. 7-24.
А. Каким образом эти результаты могут помочь при выборе межд] двумя
возможностями: потребностью в указанном продукте да трансляции мРНК,
кодирующей сохШ, и потребностью в нем да стабилизации белка сохШ?
Б. Каждая из митохондриальных делеций приводит к потере одноп или
более генов, необходимых для реализации функций мито хондрий; несмотря на
это, указанные выше штаммы дрожжа
неодинаковы: одна из них (протоперитециальный родитель) дает ядро и
цитоплазму, другая (оплодотворяющий родитель) дает практически одно ядро-
это очень похоже на то, что происходит в случае яйца и сперматозоида у
высших организмов. Как видно из табл. 7-4, от "порядка" скрещиваний
Предыдущая << 1 .. 52 53 54 55 56 57 < 58 > 59 60 61 62 63 64 .. 308 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed