Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уилсон Дж. -> "Молекулярная биология клетки " -> 56

Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.

Уилсон Дж., Хаит Т. Молекулярная биология клетки — М.: Мир, 1994. — 520 c.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyakletki1994.djvu
Предыдущая << 1 .. 50 51 52 53 54 55 < 56 > 57 58 59 60 61 62 .. 308 >> Следующая

несколько белков больше, чем гораздо более мелки митохондриальные геномы
животных клеток.
__3. Наличие интронов в генах органелл не должно удивлять, поскол
ку похожие интроны были обнаружены в сходных генах бактерш от чьих
предков, как принято считать, произошли митохондри и хлоропласты.
__И. Мутации, наследуемые по законам Менделя, затрагивают ядерни
гены; мутации, которые не наследуются согласно этим закона"
локализованы, по-видимому, в генах органелл.
__К. Зеленые и белые пятна на пестрых листьях обусловлены митоп
ческой сегрегацией нормальных и дефектных митохондрий.
__JI. Митохондрии, которые образуются путем простого деления, мс
гут реплицироваться в пролиферирующих эукариотических клй ках
неопределенное число раз.
__М. Функции митохондрий и хлоропластов, а также экспрессия н линия; ,
генов в значительной мере контролируются ядром клетки. ния cepi
Преобразование энергии: митохондрии и хлоропласты 95
__Н. В различных тканях одного организма митохондрии содержат
одинаковый набор белков, закодированных в ядерном и митохондриальном
геномах.
__О. Перенос белков через мембраны митохондрий и хлоропластов
происходит, по-видимому, через специальные адгезионные участки в
местах контакта наружной и внутренней мембран этих органелл.
__П. Хлоропласты сами синтезируют большую часть своих липидов,
тогда как митохондрии получают их из цитоплазмы.
__Р. Митохондрии как животных, так и растений произошли, вероятно,
от особого вида пурпурных фотосинтезирующих бактерий, которые
утратили способность к фотосинтезу и сохранили только дыхательную цепь.
7-33 В клетке мыши содержится примерно 1000 молекул митохондриальной ДНК.
Репликация отдельного митохондриального генома длится всего около часа,
что составляет 5% от времени генерации клетки (20 ч). Поскольку число
митохондриальных геномов на клетку в среднем постоянно, то они должны
реплицироваться один раз за клеточный цикл. Как координируется репликация
митохондриальных геномов? Реплицируется ли митохондриальная ДНК в любое
время на протяжении клеточного цикла или, подобно репликации ядерной ДНК,
на какой-то особой стадии цикла, например в S-фазе?
Вы предлагаете элегантный способ ответа на этот вопрос. В общих
чертах подход состоит в том, что 3Н-тимидин за время непродолжительной
инкубации (2 ч) включается в митохондриальную ДНК клеток мышцы, затем
клетки переносят в среду с нерадиоактивным тимидином (для "изгнания"
метки) на разные периоды времени, после чего проводят мечение 5-
бромурацил-дезоксибозидом (БУДР) в течение двух часов (рис. 7-19). Любая
ДНК, реплицировавшая во время обеих инкубаций, будет радиоактивной
(благодаря 3Н-тимидину), а ее плотность станет более высокой, чем у
нормальной митохондриальной ДНК (благодаря БУДР). Поскольку молекула
митохондриальной ДНК имеет форму кольца, ее можно легко отделить от
ядерной ДНК и провести анализ этих двух фракций порознь. Используя
центрифугирование в градиенте плотности, можно отделить ДНК с высокой
плотностью (содержащую БУДР) от ДНК с низкой плотностью (не содержащую
БУДР) и измерить количество радиоактивности, связанной с каждой из них.
Ваши результаты полного анализа
Митохондриальная ДНК, реплицирующаяся во время добавления о
Н-тимидина
Митохондриальная
ДНК, реплицирующаяся во время добавления БУДР
дриальной ДНК (задача 7-33). Немеченая митохондриальная
Рис. 7-19. Схема опыта по оценке времени репликации митохон-
ДНК-сплошная линия; ДНК, меченная 3Н-тимидином,- штриховая линия; ДНК,
меченная БУДР,-лини серого цвета.
о
Меченная Н-тимидином митохондриальная ДНК, обнаруженная на
аналитической стадии эксперимента
96 Глава 7
Длительность промежутка между периодами мечения, ч
Рис. 7-20. Фракция меченной 3Н-тимидином митохондриальной ДНК с
повышенной плотностью при разных по длительности промежутках времени
между введением двух меток (задача 7-33). Фракция определена как
отношение радиоактивности ДНК с большей плотностью к общей
радиоактивности ДНК. Длительность промежутка -период времени от окончания
мечения 3Н-тимидином до начала мечения БУДР.
Рис. 7-21. Карта транскрипции митохондриальной ДНК человека (задача 7-
34). Отдельные гены для тРНК обозначены черными кружками; аминокислоты,
которые переносятся этими тРНК, указаны однобуквенным кодом. Три мРНК,
детальные последовательности которых приведены на рис. 7-22, указаны
числами.
митохондриальной ДНК, приведенные на рис. 7-20, показывают, что
доля меченной 3Н-тимидином митохондриальной ДНК с большей плотностью была
постоянной независимо от длительности промежутка между введением меток
(длительности отмывания нерадиоактивным тимидином).
A. Чему больше соответствуют эти результаты: тому, что репликация
происходит в какой-то определенный момент клеточного цикла, или тому, что
Предыдущая << 1 .. 50 51 52 53 54 55 < 56 > 57 58 59 60 61 62 .. 308 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed