Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уилсон Дж. -> "Молекулярная биология клетки " -> 40

Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.

Уилсон Дж., Хаит Т. Молекулярная биология клетки — М.: Мир, 1994. — 520 c.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyakletki1994.djvu
Предыдущая << 1 .. 34 35 36 37 38 39 < 40 > 41 42 43 44 45 46 .. 308 >> Следующая

диффузии.)
6-34 Возвращаясь к экспериментальным данным, приведенным в задаче
6-33, вспомним, как обстоит дело с метаболизмом ЛНП у больного II.
Его клетки обладали тем же сродством к ЛНП, что и нормальные, и связывали
почти то же количество ЛНП, но это связывание не приводило к поглощению
последних. Такое нарушение можно объяснить двумя способами:
1) рецепторы ЛНП в клетках больного II имеют какой-то дефект в той
их части, которая обращена к мембране, так что они не могут проникнуть в
клетку, хотя их домены, связывающие ЛНП на поверхности клетки, совершенно
нормальны;
2) рецепторы ЛНП клеток больного II нормальны, но в результате
мутации, затрагивающей механизм проникновения частиц ЛНП внутрь клеток,
рецептор с присоединенной к нему частицей ЛНП не может попасть в клетку.
Для выяснения причины нарушения было проведено обследование
родителей больного II. Поскольку ген, кодирующий рецептор ЛНП, является
аутосомным, каждый из родителей должен был передать один из двух своих
генов потомку, больному II. Его мать страдала умеренно повышенным
содержанием холестерола в крови. При 4°С ее клетки в культуре связывали
вдвое меньше ЛНП, чем нормальные клетки; но после нагревания до 37°С
связанные частицы ЛНП оказывались внутри клеток так же быстро, как и у
здоровых доноров. У отца больного II также была умеренная
гиперхолестеролемия, но его клетки при 4°С связывали на 50% больше ЛНП,
чем нормальные. При 37°С около половины общего количества метки
поглощалось клетками с нормальной скоростью, но другая половина в клетки
не попадала. В последующем с помощью электронной микроскопии с
использованием частиц ЛНП, меченных ферритином, у всех членов этой семьи
исследовали связь между расположением клеточных рецепторов ЛНП и
окаймленными ямками. Результаты исследования представлены в табл. 6-7.
А. Почему у матери больного II была умеренная гиперхолестеролемия?
Какой ген рецептора ЛНП она передала своему сыну?
Таблица 6-7. Распределение рецепторов ЛНП на поверхности клеток больного
II,
его родителей и здоровых доноров (задача 6-34)
Количество рецепторов ЛНП

В окаймленных ямках Вне окаймленных ямок
Здоровый мужчина 186 195
Здоровая женщина 186 165
Больной II 10 342
Отец больного II 112 444
Мать больного II 91 87
70 Глава 6
А. ПОГЛОЩЕНИЕ

ПЕРОКСИДАЗЫ ХРЕНА
0 10 20 30 40
Концентрация ПХ в среде, мкМ
Б. ПОГЛОЩЕНИЕ ФАКТОРА РОСТА ЭПИДЕРМИСА 51-----------------------
0 20 40 60 80
Концентрация ФРЭ в среде, нМ
Рис. 6-14. Поглощение клеткой перокхидазы хрена (ПХ) и фактора роста
эпидермиса (ФРЭ) в зависимости от их концентрации в среде (задача 6-35).
Б. Почему у отца больного II наблюдалась умеренная гиперхолесте-
ролемия? Можно ли привести довод в пользу объяснения 1 либо 2 (см. выше),
опираясь на тот факт, что клетки отца больного II оказались не способны
поглощать все связанные на их поверхности ЛНП?
В. Можно ли объяснить гиперхолестеролемию у больного II на основании
поведения рецепторов ЛНП на поверхности клеток у его родителей?
Г. Какое нарушение в поглощении ЛНП клетками больного II вытекает из
анализа данных электронной микроскопии?
6-35 Клетки поглощают внеклеточные молекулы с помощью эндо-цитоза,
опосредуемого рецепторами, либо жидкофазного эндо-цитоза. Соотношение
эффективностей этих двух путей было исследовано на культуре клеток
эпителиальной карциномы; чтобы количественно охарактеризовать эндоцитоз,
опосредуемый рецептором, эти клетки инкубировали с фактором роста
эпидермиса (ФРЭ), а для измерения жидкофазного эндоцитоза - с
пероксидазой хрена (ПХ). Для анализа поглощения этих соединений
использовали ФРЭ, меченный ферритином, в концентрации 40 нМ и ПХ-в
концентрации 20 мкМ, т. е. в 500 раз большей, чем концентрация ФРЭ. После
различных периодов инкубации клетки фиксировали, а затем определяли в них
ПХ (по цветной реакции) и наличие ферритина в везикулах. Оказалось, что
ФРЭ и ПХ находятся внутри мелких везикул с внутренним радиусом 20 нм,
причем везикул с ФРЭ было гораздо больше, чем везикул с ПХ.
Скорости поглощения ФРЭ и ПХ клетками оценивали по кривым,
представленным на рис. 6-14. Поглощение ПХ было пропорциональным
длительности инкубации и концентрации вещества, составляя 1 пмоль/ч при
концентрации IIX 20 мкМ (рис. 6-14, А). Поглощение ФРЭ клетками вначале
было линейным, а при больших концентрациях в среде достигало плато (рис.
Предыдущая << 1 .. 34 35 36 37 38 39 < 40 > 41 42 43 44 45 46 .. 308 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed