Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
protein kinase that phosphorylates the agonist-occupied form of the
receptor. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83, 2797-2801, 1986.
12-30
А. Если фосфорилирование двух упомянутых субъединиц происходит
независимо и с равными скоростями, то должны получаться четыре разные
формы рецептора: нефосфорилированный, фос-форилированный по у-
субъединице, фосфорилированный по 8-субъединице и фосфорилированный и по
у-, и по 8-субъединице. При соотношении 0,8 моль Pj/моль рецептора будет
фосфори-лировано 40% и не фосфорилировано 60% субъединиц каждого типа.
Таким образом, содержание разных форм рецептора составит: 36% без Pi(0,6
х 0,6), 24%-с фосфатной группой только на у-субъединице (0,4 х 0,6), 24%-
с фосфатной группой только на 8-субъединице (0,4 х 0,6) и 16%-
фосфоршшрованно-го по обеим субъединицам. При исходных условиях 1,2 моль
Р;/моль рецептора соотношение форм будет следующим: 16%
нефосфорилированных молекул, 24% - фосфорилированных по у- и 24%
фосфорилированных по 8-субъединице, 36%-фосфорилированных по обеим
субъединицам.
Б. На основании этих экспериментов можно заключить, что для
развития десенситизации достаточно одной фосфатной группы на рецептор в
составе либо у-, либо 8-субъединицы. Для обоих препаратов размер фракции,
сходной по характеру активности с необработанным рецептором, ближе всего
к расчетному содержанию формы, не несущей фосфатной группы; 36 и 36% для
условий 0,8 моль Pi/моль рецептора, 18 и 16% для условий 1,2 моль Р^/моль
рецептора. Это означает, что фосфорилирования любой из двух субъединиц
достаточно для "включения" десенситизации. Если бы для этого требовалось
фосфорилирование какой-то определенной субъединицы, то в каждом препарате
доля молекул рецептора, сходных по активности с необработанными,
составляла бы 60% (24 + 36) для условий 0,8 моль Pj/моль рецептора и 40%
(24 + 16) для условий 1,2 моль Pj/моль рецептора.
Литература: Huganir, R.L.; Delcour, А.Н.; Greengard, P.; Hess,
G.P.
Phosphorylation of the nicotinic acetylcholine receptor
regulates its rate
of desensitization. Nature 321,774-776, 1986.
12-31 Сопоставить набор интактных рецепторов бактерий с набором
вызывающих ответ аттрактантов несложно: Tsr, например, отсутствует только
у линии 2, и только эта линия не реагирует на серин. Следовательно,
реакция на серин опосредуется рецептором Tsr. Точно так же выясняется,
что Таг опосредует реакцию на аспартат, Trg-на рибозу, а Тар-на
дипептиды.
Специфичность хемотаксических рецепторов закодирована в их
названиях. Название Tsr образовано из первых букв слов taxis for serine
and certain repellents; Tar соответствует faxis for aspartate and certain
repellents; Trg- faxis for ribose and galactose. Сокращение Tap вначале
обозначало /axis-associated protein и относилось к связанному с
хемотаксисом белку, функция которого была неясна, но было показано, что
его ген кластеризован с группой других хемотаксических генов; по удачному
совпадению Тар можно расшифровать и как taxis for peptides.
Межклеточная сигнализация 471
Литература: Manson, M.D.; Blank, К; Brade, G.; Higgins, C.F.
Peptide chemotaxis in E. coli involves the Tap signal transducer and the
dipeptide permease. Nature 321: 253-258, 1986.
12-32
A. Оба клонированных рецептора, нормальный и укороченный, выполняют
свою функцию-передачу сигнала-так же, как и рецепторы в бактериях дикого
типа. При добавлении аспартата у бактерий всех трех типов изменения в
направлении вращения тут же подавляются, значит, сигнал о присутствии во
внешней среде аттрактанта (аспартата) передается на жгутики бактерий всех
трех типов.
Б. Адаптивные свойства бактерий, несущих клонированные рецепторы,
резко отличаются от таковых у бактерий дикого типа. Если эти последние
возвращаются к нормальной частоте кувырканий (изменений направления
вращения) в течение 3 мин, то бактериям с клонированными нормальными
рецепторами требуется на это около 50 мин, а бактерии с клонированными
укороченными рецепторами не начинают кувыркаться и спустя 3 ч. Таким
образом, бактерии с клонированными нормальными рецепторами адаптируются
медленнее, чем бактерии дикого типа, тогда как бактерии с клонированными
укороченными рецепторами, судя по всему, не адаптируются вовсе.
B. Нарушение адаптации в случае бактерий с клонированными
рецепторами указывают на изменения в скорости или степени метилирования
рецептора. В основе неспособности бактерий с укороченным клонированным
рецептором адаптироваться к высокой концентрации аспартата лежит
неспособность укороченного рецептора метилироваться. Молекулярный
механизм различий по способности к адаптации между нормальными бактериями
и бактериями с клонированными нормальными рецепторами гораздо тоньше и
имеет количественную природу. Заметим, что периоды адаптации у бактерий
этих двух типов различаются примерно в 15 раз (3 мин и 50 мин) и точно
