Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
2 нг клонированной ДНК, которая на 43 т. п. н. содержит 1
гибридизующийся ген U2, эквивалентны 10 мкг геномной ДНК, несущей
неизвестное (и) число генов U2 на 3 х 10б т.п.н. (Хотя в клонированной
ДНК содержится два гена U2, но лишь один из
428 Глава 10
Рис. 10-33. Определение гена, находящегося на 5'-конце кластера генов
(ответ 10-33). А. Ген В-типа на 5'-конце. Б. Ген В-типа на З'-конце.
них участвует в гибридизации
с фрагментами размером 6 т. п. н.)
1 ген U2 п
генов U2
----------х 2 нг =--------2--
------х 10000 нг,
43 т.п.н. 3 х 10б т.п.н.
3 х 10б т.п.н. 2 нг
и = - -----------------х
43 т.п.н. 10000 нг' п =
14.
Таким образом, в геноме
человека содержится около 15 генов U2 (принимая во внимание один ген U2 в
невидимом соединяющем фрагменте).
Литература: van Arsdell, S. W.; Weiner, A. M. Human genes for U2 small
nuclear RNA are tandemly repeated. Mol. Cell. Biol. 4, 492-499, 1984.
10-33
A. В случае обработки Rsal
вариант ПДРФ, характерный для гена A-типа, отсутствует у мужчин, не
отличающих зеленый цвет, а вариант ПДРФ, характерный для гена В-типа,
отсутствует у мужчин, не отличающих красный цвет (рис. 10-24).
Следовательно, ген A-типа кодирует зеленый зрительный пигмент, а ген В-
типа кодирует красный зрительный пигмент.
Б. Гены красного и зеленого
зрительных пигментов физически сцеплены, так как они присутствуют на
одном фрагменте Notl (рис. 10-25). Поскольку зонд, комплементарный обоим
генам, гибридизуется только с одним фрагментом Notl даже у индивидов с
различным числом генов А- и В-типа, то гены должны быть расположены на
одном и том же фрагменте.
B. Ген В-типа (красный пигмент)
расположен на 5'-конце кластера, а ген A-типа (зеленый пигмент) на его
З'-конце. Как показано на рис. 10-33, Sfil-фрагмент, разрезаемый Notl,
может содержать последовательность, комплементарную зонду, лишь в том
случае, если ген В-типа расположен на 5'-конце кластера.
Г. Присутствие весьма сходных
(идентичных на 98%) генов вблизи этого участка позволяет предположить,
что вариабельность среди мужчин с нормальным цветовым зрением возникает
скорее всего вследствие гомологичной рекомбинации (неравный кроссинговер)
между тандемно повторенными генами. В пользу этого предположения
свидетельствует и то, что у индивидов с увеличенным числом этих генов
наблюдается одинаковое приращение (на 39 т.п.н.) размеров фрагмента Notl
(рис. 10-25). Другими словами, фрагменты Notl у мужчин с 2 генами (105
т.п.н. у индивида 1)
А. 5'-конец
t (tm) t
Sfil Зонд Sfil
Б. З'-конец
Зонд
Контроль генной экспрессии 429
Рис. 10-34. Неравный кроссинго-вер, в результате которого происходит
делеция гена или образуется гибридный ген (ответ 10-33). Рекомбинация по
гомологичным сайтам, указанным стрелкой 1 (А), приводит к образованию
гибридных генов (Б). Рекомбинация по гомологичным сайтам, указанным
стрелкой 2, приводит к делеции генов в одной хромосоме и добавлению их к
другой (В).
А. НЕРАВНЫЙ КРОССИНГОВЕР МЕЖДУ ГЕНАМИ, КОДИРУЮЩИМИ ЗРИТЕЛЬНЫЕ ПИГМЕНТЫ
Б. ПРОДУКТЫ РЕКОМБИНАЦИИ ПО САЙТАМ, УКАЗАННЫМ СТРЕЛКОЙ 1
---
=?>-1=?>-'W'
В. ПРОДУКТЫ РЕКОМБИНАЦИИ ПО САЙТАМ, УКАЗАННЫМ СТРЕЛКОЙ 2
отличаются от размеров фрагмента Notl у мужчин с 3 генами (144 т.
п. н. у индивида 3) на 39 т. п. н.
Если неравный кроссинговер между этими генами происходит часто,
на что указывает вариабельность генов, наблюдаемая среди мужчин с
нормальным цветовым зрением, тогда дальтонизм может возникать в
результате этого же процесса. Неравный кроссинговер может приводить к
элиминации гена путем делеции либо к изменению функции при образовании
гибридного гена (рис. 10-34). Веским аргументом в пользу этого
предположения служит тот факт, что отличие генов мужчин-дальтоников,
исследованных с помощью рестриктазы Notl (рис. 10-25, индивиды
7, 12 и 14), от генов нормальных мужчин, состоящее в приращении
Notl-фрагмента (39 т. п. н.), точно соответствует такому различию среди
нормальных мужчин. Простейшее объяснение подобного приращения в размерах
фрагмента-это неравный кроссинговер внутри семейства тандемно повторенных
генов.
Литература: Nathans, J.; Thomas, D.; Hogness, D.S. Molecular
