Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
ксисеквен за клони] 5-54).
Основные генетические механизмы 45
Рис. 5-44. Последовательности ДНК и кодируемого ею белка (задача 5-53).
LRDPQGGVI 5' - CTTAGAGACCCGCAGGGCGGCGTCATC
- 3'
(К), заменили глутамин на глицин (G) и просто удалили глутамин из
белка. Вы планируете произвести эти мутационные изменения путем
гибридизации соответствующего олигонуклеотида с ДНК вируса М13. Когда
олигонуклеотид расположится вдоль кольцевой молекулы М13, с участием ДНК-
полимеразы будет достроена полная цепь, кодирующая комплемент желаемого
мутант,-ного белка. В качестве первого шага в осуществлении мутационных
изменений предложите три олигонуклеотида размером 20 нуклеотидов, которые
могли бы гибридизоваться с клонируемым геном на одноцепочечной ДНК вируса
М13.
5-54 Наглядный пример использования дидезоксисеквенирующет о геля показан
на рис. 5-45. Попытайтесь разобраться в нем. Если чтение геля начать
снизу вверх, то последовательность будет соответствовать мРНК для белка.
Можете ли вы обнаружить открытую рамку
считывания в этой последовательности/
Рис. 5-45. Использование дидезо-ксисеквенирующего геля для анализа
клонированной ДНК (задача
5-54).
Плазматическая мембрана
Липидный бислой (МБК 6.1)
6-1 Заполните пропуски в следующих утверждениях.
A. Молекулы липидов в биологических мембранах
образуют________непрерывный двойной слой толщиной 5 нм,
называемый___________________
Б. В мембранах клеток присутствуют три основных типа липидов,
а именно____________,____________ и_____________
B. Все мембранные липиды-_____________, поскольку один конец их
молекул гидрофильный, а другой-гидрофобный.
Г. Гидрофильный конец молекулы фосфолипида состоит из
___________ головы, а гидрофобная часть состоит из двух
___________ хвостов.
Д. При помещении амфипатических молекул в водную среду они агрегируют
таким образом, что их гидрофильные концы контактируют с водой, а
гидрофобные спрятаны внутри. В результате этого возникают структуры двух
типов: сферические
___________ или плоские_____________В обеих структурах гидрофобные
хвосты размещаются между слоями гидрофильных головок.
Е. Искусственные бислои, содержащие определенные липиды или смесь
разных липидов, можно получить либо в форме сферических
везикул, называемых____________, либо в форме плоских бислоев,
называемых_____________ мембранами.
Ж. Метод электронного парамагнитного резонанса, который очень полезен
для изучения подвижности молекул липидов, требует введения в липиды
________________, например, нитроксильного ра-
дикала.
3. При определенной (характеристической) температуре искусственные
бислои липидов, получаемые на основе какого-либо одного типа фосфолипида,
переходят из жидкого в твердокристаллическое состояние (или наоборот);
такое изменение состояния называется
И. Липиды, содержащие олигосахариды и называемые _______________,
присутствуют только в наружной половине бислоя. Их углеводные группы
экспонированы на поверхности клетки.
К. Гликолипид_____________- основной нейтральный гликолипид мно-
гослойной мембранной оболочки, окружающей аксон нервной
клетки, (___________ оболочка) - может играть важную роль во
взаимодействии аксона с клеткой, влияя на обертывание мембраны
вокруг аксона.
Л. Гликолипиды, имеющие в своем составе сиаловую кислоту, называются
_______________. Один из таких гликолипидов -___________,
связывающий холерный токсин.
Плазматическая мембрана 47
6-2 Укажите, какие из следующих утверждений правильные, а какие-нет. Если
утверждение неверно, объясните почему.
__А. Липидный бислой-основной структурный компонент всех клеточных
мембран.
__Б. Для сохранения липидного бислоя в плазматической мембране
необходимо действие специальных ферментов и гидролиз АТР.
__В. Молекулы липидов свободно диффундируют в плоскости бислоя,
но не могут преодолеть его в поперечном направлении путем
мгновенного перескока молекулы с одной стороны бислоя на другую
(транслокация, или "флип-флоп"), если в мембране нет особых ферментов,
известных под названием транслокаторов фосфолипидов.
__Г. Температура, при которой мембрана эукариотических клеток
"замерзает", прямо зависит от количества содержащегося в мембране
холестерола.
__Д. Изменения формы мембран, обусловленные значительным сжатием или
растяжением обеих сторон липидного бислоя, возможны благодаря высокому
содержанию холестерола, так как в отличие от фосфолипидов холестерол
может легко перемещаться из одного монослоя в другой при таких
воздействиях.
__Е. Генетически измененные эукариотические клетки, потерявшие
способность к синтезу холестерола, подвергаются лизису при добавлении
холестерола в культуральную среду.
__Ж. Головы фосфолипидов на внешней поверхности клетки несут
чистый положительный заряд, потому что холиновые группы голов
фосфатидилхолина - (CH3)3N+СН2СН2ОН - размещаются преимущественно в
