Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
а2, вероятно, в результате взаимодействия с ним. В эксперименте по
связыванию фрагмента, представленном на рис. 10-10, при низком содержании
гаплоид-специфические фрагменты связываются в незначительном количестве;
если же а,
Контроль генной экспрессии 417
Рее. 10-32. Регуляция экспрессии генов с участием генов типа спаривания у
нового штамма дрожжей (ответ 10-18).
ТИП СПАРИВАНИЯ ХАРАКТЕР ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ ФЕНОТИП
ЛОКУС ТИПА СПАРИВАНИЯ ДРУГИЕ ГЕНЫ
м Ml М2 Msg Fsg Ssg Гаплоидная клетка
ВКЛЮЧЕН ВЫКЛЮЧЕН М-тип спаривания
Включен ВЫКЛЮЧЕН
Включен |---^.не влияет f
F F1 F2 Msg Fsg Ssg Гаплоидная клетка^
ВКЛЮЧЕН F-тип спаривания
Включен ВЫКЛЮЧЕН ВЫКЛЮЧЕН
Включен I "Г
¦ 1-1
1 " Не влияет
M/F М1 * 12 Ft F2 Msg Fsg Ssg Диплоидная клетка
Вкл ВЫКЛЮЧЕН ЭЧЕН нет спаривания
Включен очен Включен ВЫКЛЮЧЕН ВКЛ
Включен I I
присутствует в избытке, то
связывание гаплоид-специфических фрагментов происходит довольно активно.
Самое простое объяснение воздействия дефектного репрессора а2 состоит в
том, что он связывается с белком а15 снижая таким образом возможность
связывания белка ах с нормальным репрессором а2.
Следует отметить, что ни
один из этих экспериментов не исключает возможности того, что белок ах
каталитически воздействует на репрессор а2. Однако для того, чтобы
объяснить действие белка aj его каталитическими свойствами на основе
данных, полученных в эксперименте, потребовалось бы сделать некоторые
допущения. Поэтому представляется наиболее вероятным, что репрессор в той
форме, в какой он связывается с гапло-ид-специфическими
последовательностями, содержит как белок а1; так и репрессор а2.
Литература: Goutte, С.;
Johnson, A.D. a, protein alters the DNA-binding
specificity of a2 repressor.
Cell 52, 875-882, 1988.
10-18 На рис. 10-32 представлена схема
регуляции, объясняющая поведение мутантов. F-специфические гены остаются
включенными до тех пор, пока они не репрессируются продуктом гена Ml. М-
специфические гены остаются включенными до тех пор, пока они не
репрессируются продуктом гена F2. Гены, специфические для споруляции,
выключены, пока они не активируются продуктами как гена F1, так и гена
М2, присутствующими только в диплоидных клетках.
На первый взгляд кажется,
что в такой массе мутантов и фенотипов невозможно разобраться. Однако
большинство схем, объясняющих экспрессию генов, было получено именно на
основании подобных генетических данных. (Лишь потом предсказанные
взаимодействия молекул проверяли биохимическими методами и уточняли'все
подробности.) Среди генетических данных, приведенных в табл. 10-3,
имеются три важные подсказки, помогающие построить всю схему регуляции. В
том, что касается типа спаривания М, обнаружено следующее. У мутантов М1~
происходит экспрессия как М-специфических, так и F-специфических генов.
Это позволяет предположить, что продукт гена Ml может быть репрессором F-
специфических генов. В клетках, принадлежащих к типу спаривания F, при
мутации
27-1428
F2~ происходит экспрессия как F-специфических, так и М-специ-
фических генов. Следовательно, продукт гена F2 может быть репрессором М-
специфических генов. И наконец, хотя мутации М2~ и Fl~, по-видимому, не
оказывают воздействия на гаплоидные клетки, в диплоидных клетках каждая
из этих мутаций препятствует экспрессии генов, специфических для
споруляции. Это говорит о том, что они могут действовать совместно,
активируя гены, специфические для споруляции. Эти три подсказки помогают
выявить три типа регуляторных взаимодействий и, таким образом,
согласовать между собой все полученные результаты. Для того чтобы считать
схему, приведенную на рис. 10-32, целиком доказанной, необходимы
дополнительные генетические и биохимические эксперименты.
-19
A. Интенсивности полос РНК макси-гена и нормальной 5S-PHK при
электрофорезе смеси матриц, не обработанных рестриктазами (дорожки,
обозначенные "Без обработки" на рис. 10-11, J51), одинаковы,
