Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
в направлении 5'-сайта сплайсинга, на минигене 1 должно образоваться два
продукта (рис. 9-46, А), а на мини-гене 2-один продукт (рис. 9-46,Б).
Б. Результаты вашего эксперимента не совпадают с ожидаемыми для любого
направления сканирования. Таким образом, представляется маловероятным,
что отбор сайтов сплайсирования происходит путем однонаправленного
сканирования интронов либо от 5'- к З'-сайту, либо от 3'- к 5'-сайту.
Каким образом клетки не допускают пропуска экзона, остается неясным.
Литература: Kuhne, Т.; Weringa, В.; Reiser,
Weissmann, С. Evidence against a scanning model for RNA splicing. EMBO J.
2, 727-733, 1983.
Контроль генной экспрессии
Стратегии генетического контроля
10-1
A. транскрипция
Б. процессинг РНК
B. транспорт РНК Г. трансляция
Д. деградация мРНК
Е. активность белка
Ж. белки-регуляторы генов
3. позитивная регуляция; негативная регуляция
И. комбинационная
К. главные белки-регуляторы
Л. myoDl
10-2
A. Правильно.
Б. Неправильно. При таком сравнении выявляется очень немного различий.
Большинство белков синтезируются в различных типах клеток со скоростями,
различающимися не более чем в пять раз. Лишь немногие белки (несколько
процентов от всего количества) сильно варьируют по своему содержанию в
разных тканях.
B. Правильно.
Г. Неправильно. Некоторые белки-регуляторы, связавшись с узнаваемой ими
последовательностью, подавляют транскрипцию соседнего гена.
Д. Правильно.
Е. Неправильно. У высших эукариот возможность транскрипции гена зависит
обычно от целого кластера белков-активаторов, действующих согласованно.
Ж. Правильно.
3. Правильно.
10-3
А. Перед обработкой форболовым эфиром белок NF-и В присутствует в
цитоплазме (рис. 10-1, дорожки 5 и 6). После обработки NF-кВ
обнаруживается в ядре (дорожки 3 и 4). В результате обработки форболовым
эфиром NF-иВ перемещается из цитоплазмы в ядро.
Б. Несмотря на то что обработка форболовым эфиром активирует
протеинкиназу С, которая может менять активность белков-мишеней путем
фосфорилирования, представляется маловероятным, что NF-xB активируется
непосредственно путем фосфорилирования. Активация NF-иВ при обработке
мягко денатурирующими ве-
ществами дает возможность предположить, что переход неактивной
формы этого белка в активную не связан с ковалентной модификацией. Более
вероятно, что эффект протеинкиназы С отстоит от активации NF-xB по
крайней мере на одну ступень.
В. Возможно, активация NF-x В в пре-В-клетках форболовым эфиром
осуществляется за счет простого молекулярного механизма: NF-xB неактивен
потому, что связан с ингибитором. В пользу такого предположения говорит
то, что NF-xB активируется при обработке мягко денатурирующими
веществами, которые могут приводить к отделению ингибирующей субъединицы.
Ингибитор может действовать, закрывая участок связывания NF-xB с энхан-
сером, а, возможно, также и участок, определяющий локализацию этого белка
в ядре. В соответствии с этим предположением обработка форболовым эфиром
должна приводить к активации NF-xB, вызывая отделение ингибитора. Так как
обычно при обработке форболовым эфиром активируется протеинкиназа С, то
диссоциация ингибитора может происходить либо вследствие прямого
фосфорилирования ингибитора, либо косвенным путем, вследствие
фосфорилирования какого-то другого белка.
Литература: Baeuerle, P. A.; Baltimore, D. Activation of DNA-
binding activity in an apparently cytoplasmic precursor of the NF-x В
transcription factor. Cell 53, 211-217, 1988.
10-4
А. Результаты, приведенные в табл. 10-1, соответствуют ожидаемым в
случае позитивной регуляции арабинозного оперона. Для стимуляции
транскрипции позитивный регулятор транскрипции должен связаться с
промоторными областями арабинозного оперона. Таким образом, если ген,
кодирующий белок-регулятор, делециро-ван, то арабинозные гены не могут
экспрессироваться.
Б. Если бы белок агаС действовал по принципу негативной регуляции
экспрессии, то арабинозные гены должны были бы полностью индуцироваться
независимо от того, присутствует или отсутствует арабиноза в среде.
Поскольку регуляторы, осуществляющие позитивный контроль, блокируют
транскрипцию, их удаление при делеции дало бы возможность арабинозным
генам транскрибироваться при всех условиях. Бактериальные опероны,
которые регулируются репрессором по принципу негативной регуляции
(например, лактозный оперон), ведут себя именно таким образом: в
отсутствие белка-репрессора их экспрессия осуществляется на высоком
уровне.
Литература: Schlief, R.F. Genetics and Molecular Biology, Chap. 13.
Reading, MA: Addison Wesley, 1986.
10-5
А. Зонды 2 и 3 нужны потому, что они являются специфическими для той
мРНК, которой нет в необработанных клетках ЮТ 1/2. Вы ищете мРНК,
имеющуюся в миобластах обоих типов, но отсутствующую в клетках 10Т1/2.
Гибридизация радиоактивных кДНК-копий РНК из миобластов с РНК из клеток