Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
заряду пластоцианина, который преодолевает тилакоидную мембрану. 2)
Железосерный центр обычно включается в ферредоксин на определенном этапе
созревания молекулы. Таким образом, возможно, что этот центр
присоединяется в строме и по этой причине ферредоксин не может пересечь
мембрану тилакоида. 3) Ферредоксин обычно функционирует в строме в
комплексе с другими белками. Возможно, что домен ферредоксина в ПЦФД
связывается с этими белками и остается таким образом в строме. Эти
соображения часто усложняют интерпретацию экспериментов такого рода,
направленных на выявление сигнальных участков для импорта белков.
Г. Множественные полосы в ваших опытах-это ключ к пониманию импорта
белков в хлоропласты. Самая верхняя полоса для всех белков-это
предшественник, т. е. первичный продукт трансляции, поскольку он
присутствует в реакционной смеси при трансляции in vitro в отсутствие
хлоропластов (рис. 8-8, Б, дорожка 1). Полосы, расположенные ниже,
содержат белки, от которых отделилась часть молекулы. Вы ожидали, что
пептид должен отщепляться с N-конца (это то, из-за чего задумывался весь
эксперимент), и результаты действительно подтверждают, что сигнальные
пептиды локализованы на N-конце. Две полосы при электрофорезе
370 Глава 8
Рис. 8-22. Схема, иллюстрирующая роль сигнальных пептидов в направлении
транспорта ферредокси-на и пластоцианина к соответствующим компартментам
в хлоропласте (ответ 8-18).
обнаруживаются в том случае,
когда N-концевой сегмент происходил из ферредоксина (рис. 8-8, Б, ФДФД и
ФДПЦ, дорожка 2), а картина с тремя полосами наблюдается в том варианте
опыта, где N-концевой сегмент происходил из пластоцианина (рис. 8-8, Б,
ПЦПЦ и ПЦФД, дорожка 2).
Наличие только двух полос в
случае белков, несущих сигнальный пептид для ферредоксина, указывает на
то, что импорт ферредоксина в строму сопровождается одним актом
отщепления. Нижняя полоса соответствует функциональной форме ферредоксина
в строме (ср. ФДФД, ФДПЦ, дорожки 2 и 5). Образование трех полос в случае
белка с сигнальным пептидом для пластоцианина свидетельствует о том, что
при импорте этого белка в просвет тилакоида происходят два
последовательных расщепления пептидной связи. Самая нижняя полоса
соответствует функциональной форме пластоцианина в тилакоиде (ср. ПЦПЦ,
ПДФД, дорожки 2 и 7). Промежуточная полоса относится, вероятно, к
промежуточной стадии импорта и указывает на то, что сигнальный пептид
содержит два компонента, которые отщепляются последовательно. N-концевой
компонент сигнального пептида направляет белок в строму, а С-концевой
компонент того же пептида-в просвет тилакоида.
Д. Модель, суммирующая роль
сигнальных пептидов в импорте ферредоксина и пластоцианина в
соответствующие компартменты хлоропластов, изображена на рис. 8-22. Для
каждого белка сигнальный пептид показан как прямоугольник на N-конце
белка. Зачерненная часть прямоугольника соответствует той части
сигнального пептида, которая необходима для импорта через наружную и
внутреннюю мембраны хлоропласта. Этот сигнальный пептид отделяется, когда
белок пересекает мембрану и входит в строму. Незачерненная часть
прямоугольника, связанная с пластоцианином, нужна для импорта через
тилакоидную мембрану. Она удаляется при импорте в полость тилакоида.
Литература: Smeekens, S.,
Bauerle, С., Надетап, JKeegstra, К., Weisbeek, P.
The role of the transit
peptide in the routing of precursors toward different
chloroplast compartment. Cell
46, 365-375, 1986.
Наружная
Внутриклеточная сортировка макромолекул 371
Пероксисомы
8-19
А. пероксисомы
Б. глиоксилатный цикл; глиоксисомы
8-20
A. Неправильно. За редким исключением, как, например, в случае
эритроцитов, все клетки млекопитающих имеют в своем составе пероксисомы,
а для немногих типов клеток характерны крупные пероксисомы.
Б. Правильно.
B. Неправильно. Новые пероксисомы возникают из ранее существовавших в
результате роста и деления органелл. Все мембранные белки и липиды
пероксисом поступают из цитозоля.
8-21
A. Результаты опытов по гибридизации, представленные на рис. 8-9,
показывают, что мРНК генов 1 и 3 для ФГК экспрессируются у трипаносом из
человека, а мРНК генов 1 и 2 для ФГК-у трипаносом из мухи цеце.
Б. Гликосомная форма ФГК экспрессируется только в трипаносомах,
выделенных из организма человека. Поскольку олигонуклеотид-ный зонд к
гену 3 для ФГК гибридизуется с мРНК, которая экспрессируется только в
трипаносомах из человека, можно сделать вывод, что ген 3 для ФГК, по-
видимому, кодирует гли-косомную форму ФГК.
B. Результаты, представленные на рис. 8-9, указывают на то, что
неточность сортировки не является причиной слабой активности цитозольной
