Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уилсон Дж. -> "Молекулярная биология клетки " -> 214

Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.

Уилсон Дж., Хаит Т. Молекулярная биология клетки — М.: Мир, 1994. — 520 c.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyakletki1994.djvu
Предыдущая << 1 .. 208 209 210 211 212 213 < 214 > 215 216 217 218 219 220 .. 308 >> Следующая

эта асинхронность не имеет значения для интерпретации результатов. Если
митохондриальная ДНК реплицируется по времени случайным образом, то
синхронность клеточной популяции не существенна. Замечание вашего коллеги
относится к тому, что асинхронность клеточной популяции могла помешать
установлению временного хода репликации митохондриальной ДНК. Ваше
остроумное экспериментальное решение, однако, позволило обойти это
потенциальное препятствие. Если бы митохондрии реплицировались в какой-то
особый период клеточного цикла, то при добавлении на короткое время 3Н-
тимидина
% ДНК с измененной плотностью
358 Глава 7
20

_______________I_______________I_______________I_______________I_________
_______
0 5 10 15 20
25
Период между внесением двух меток, ч
Рис. 7-30. Пик изменения плотности ядерной ДНК (ответ 7-33).
метка включилась бы лишь в те клетки, которые находились на этом
этапе цикла. Поскольку в остальной части эксперимента вы следите только
за радиоактивными молекулами ДНК митохондрий, то кратковременное
добавление метки по существу позволило иметь дело как бы с синхронной
клеточной популяцией-вы не видите того, что происходит в других клетках,
которые в период мечения не реплицировались.
В. Анализ ядерной ДНК должен показать пик изменения плотности в период
между 15 и 20 ч и очень небольшие сдвиги в плотности радиоактивной ДНК
при более коротких промежутках между введением двух меток (рис. 7-30).
Поскольку ядерная ДНК реплицируется в особой S-фазе клеточного цикла, то
при добавлении 3Н-тимидина будут метиться только те клетки, которые
находятся в этой фазе цикла. Ядерная ДНК в меченых клетках не будет
реплицироваться вновь, пока клетки не пройдут весь клеточный цикл и не
вернутся в S-фазу. Если клетки были помечены 3Н-тимидином на стадии
окончания S-фазы, то они опять достигнут S-фазы через 15 ч (или около
этого)-именно в это время их плотность может измениться при инкубации с
БУДР. Если клетки во время мечения находились в начале S-фазы, они войдут
снова в S-фазу не раньше, чем через 20 ч. Изменение плотности меченой
ядерной ДНК действительно обнаруживается в интервале между
15 и 20 ч. ДНК с измененной плотностью проявляется в виде пика, а
не плато, потому что за время более длительное, чем 20 ч, меченая ДНК
выходит из S-фазы и снова становится неподверженной изменению плотности.
Г. Если бы молекулы ДНК митохондрий реплицировались в произвольные
моменты времени в пределах клеточного цикла, но перерыв между периодами
репликации отдельных молекул был равен времени одного клеточного цикла,
то пик изменения плотности наблюдался бы между 18 и 20 ч. Те молекулы,
которые реплицировались во время инкубации с 3Н-тимидином, должны были
пометиться. Если бы эти молекулы должны были ждать один клеточный цикл до
очередной репликации, то изменение плотности не коснулось бы их, пока не
прошел бы полный клеточный цикл. Таким образом, молекулы митохондриальной
ДНК, помеченные в начале опыта, не будут изменяться по плотности, пока не
пройдет 18-20 ч после отмывания невключенной метки. (Экспериментальные
данные будут сходны с данными по репликации ядерной ДНК, так как
последняя также реплицируется один раз за полный цикл; однако по времени
поведение этих ДНК несколько различалось бы, поскольку митохондриальная
ДНК реплицируется за 2 ч, а ядерная-за 5 ч.)
Литература: Bogenhagen, D., and Clayton, D. A. Mouse L cell
mitochondrial DNA molecules are selected randomly for replication
throughout the cell cycle. Cell 11:719-727, 1977.
7-34
А. Инициация синтеза белка в митохондриях отличается от инициации
синтеза белка в цитоплазме по двум признакам. Первое отличие очевидно:
кодон AUA в митохондриях служит кодоном инициации и кодирует метионин
(рис. 7-22, мРНК 13). При цитоплазматическом синтезе белка кодон AUA
кодирует изолейцин и не связан с инициацией синтеза белка. Второе отличие
более тонкое: в митохондриях кодирующая белок область начинается сразу от
5'-конца мРНК (рис. 7-22, мРНК 7 и мРНК 16). Цитоплазматические (и
бактериальные) мРНК обычно имеют
Преобразование энергии: митохондрии и хлоропласты 359
короткий участок из нетранслируемых нуклеотидов на своем 5'-конце,
который, как считают, способствует продвижению рибосом вдоль цепи мРНК. У
бактерий имеется короткая последовательность перед стартовым кодоном, с
которой гибри-дизуется рибосомальная РНК. В цитоплазме рибосомы
связываются с 5'-кэпом (модифицированный G, прикрепляемый пост-
транскрипционно к концу мРНК) и насаживаются на мРНК в месте, удаленном
на некоторое расстояние от первого стартового кодона. Ни одна из этих
особенностей не обнаружена на 5'-концах митохондриальной мРНК.
Б. Кодоны терминации синтеза белка в митохондриях являются необычными в
двух отношениях. Во-первых, кодон терминации в мРНК 16-это AGA (рис. 7-
22), который в ядре кодирует аргинин. Во-вторых, кодоны терминации в мРНК
Предыдущая << 1 .. 208 209 210 211 212 213 < 214 > 215 216 217 218 219 220 .. 308 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed