Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уилсон Дж. -> "Молекулярная биология клетки " -> 176

Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.

Уилсон Дж., Хаит Т. Молекулярная биология клетки — М.: Мир, 1994. — 520 c.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyakletki1994.djvu
Предыдущая << 1 .. 170 171 172 173 174 175 < 176 > 177 178 179 180 181 182 .. 308 >> Следующая

время репликации.
Б. Кинетика удаления метильной группы Об-метилгуанина имеет
своеобразный характер, поскольку количество отщепляемых метальных групп
не возрастает во времени, как можно было бы ожидать в случае типичного
фермента. К тому же это количество прямо пропорционально количеству
очищенного белка, добавленного в реакционную смесь. Одним из возможных
объяснений такой кинетики может быть то, что данный фермент очень
нестабилен; однако идентичность результатов при инкубации в условиях 5 и
37°С противоречит такому объяснению.
B. Расчет числа деметилированных оснований на одну молекулу фермента
показывает, что каждая молекула фермента отщепляет только одну метальную
группу. Следовательно, белок используется стехиометрически, а не
каталитически, чем и объясняется своеобразие кинетики. Например, в
присутствии 2,5 нг белка из ДНК удаляется 0,13 пмоль (0,5 х 0,26 пмоль)
метальных групп. Таким образом, число молекул фермента равно:
нмоль 6,0 х 1014молекул
Число молекул фермента = 2,5 нг х-----------х-------------------
19000 нг нмоль
= 7,9 х Ю10 молекул, а число метальных групп равно:
6 х 1011 метальных групп число
метальных групп = 0,13 пмоль х----------------------------=
ПМОЛЬ
= 7,8 х Ю10 метальных групп.
Оказывается, отщепленная метильная группа переносится на
определенный остаток цистеина в этом белке. Как только последний
метилируется, он перестает функционировать и в конечном итоге
разрушается. Поскольку метилтрансфераза инактивируется во время реакции,
она не является ферментом в обычном смысле этого слова-фермент-
катализатор, который по определению не расходуется во время реакции.
Заметьте, что механизм репарации при образовании Об-метилгуанина сходен с
механизмом ферментативной фотореактивации (задача 5-17): в обоих реакциях
происходит непосредственное обращение процессов, вызвавших повреждение
ДНК.
Литература: Lindahl, Т.; Demple, В.; Robins, P. Suicide
inactivation of the E. coli. Oe-methylguanine-DNA methyltransferase. EMBO
J. 1, 1359-1363, 1982.
Механизмы репликации ДНК 5-20
А. ДНК-полимераза
Б. репликативная (репликационная) вилка ДНК
В. фрагменты Оказаки Г. ДНК-лигаза
Д. ведущая (лидирующая) цепь; отстающая (запаздывающая) цепь Е.
затравочная (праймерная) цепь Ж. экзонуклеазная 3. РНК-праймаза И. ДНК-
геликаза
К. белки, вызывающие дестабилизацию спирали (белки, связывающиеся с
одноцепочечной ДНК, или SSB-белки)
JI. коррекция неправильного спаривания М. точки начала репликации Н.
ДНК-топоизомеразы
5-21
A. Правильно. (Если репликативная вилка движется вперед со скоростью
500 п.н./с, то ДНК впереди вилки должна вращаться со скоростью 500/10,5 =
48 об/с, или 2880 об/мин.)
Б. Правильно.
B. Неправильно. Последовательность нуклеотидов в синтезируемой цепи
совершенно отличается от последовательности родительской цепи, несмотря
на то что две цепи связаны комплементарно спаренными основаниями.
Г. Правильно.
Д. Неправильно. Весь синтез ДНК проходит в направлении от 5'-к З'-
концу. ДНК отстающей цепи собирается из фрагментов, которые соединяются
воедино позже, так что отстающая цепь удлиняется в направлении от 3'- к
5'-концу.
Е. Правильно.
Ж. Неправильно. В отсутствие (3' -*¦ 5')-корректирующей экзонуклеаз-ной
активности в синтезированной ДНК будет гораздо больше ошибок.
3. Неправильно. Белки, связывающиеся с одноцепочечной ДНК, держат две
цепи ДНК разделенными посредством присоединения к их фосфатным остовам;
при этом основания остаются свободными, так что они могут служить
матрицей для синтеза ДНК.
И. Неправильно. Действие репаративной системы, зависящей от
метилирования, основано на том, что метальные группы есть в родительской
цепи, но отсутствуют в растущей цепи; именно это и позволяет их
различать.
К. Правильно.
Л. Правильно.
М. Правильно.
5-22
A. Указанный фосфат (Р) находится на 5'-конце того фрагмента, к
которому он прикреплен.
Б. Промежуток будет заполняться путем непрерывного репаратив-ного
синтеза ДНК, начинающегося от указанной на нижней цепи ОН-группы и
продолжающегося в направлении от 5'- к З'-концу (влево), до фосфатной
группы (Р) на соседнем фрагменте.
B. При отсутствии ДНК-лигазы два фрагмента нижней цепи останутся
несоединенными даже после того, как заполнится промежуток между ними.
5-23
А. Репликационный глазок с двумя репликативными вилками, движущимися в
противоположных направлениях, изображен на рис. 5-48.
Основные генетические механизмы 293
Рис. 5-48. Маркированная схема репликационного глазка (ответ 5-23).
Рис. 5-49. Структуры, которые наблюдались и не наблюдались в
реплицирующихся молекулах ДНК бактериофага лямбда (ответ 5-23). Частота
встречаемости различных структур указана слева.
Предыдущая << 1 .. 170 171 172 173 174 175 < 176 > 177 178 179 180 181 182 .. 308 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed