Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
и затем повторить инкубацию осадка с у-32Р-АТРл белок 170 к Да
фосфорилируется в ходе ФРЭ-стимулируемо! реакции (рис. 13-5, В, дорожка 3
и 4).
4. Если осажденный антителом белок вначале разгоняют i ¦ ДСН-геле,
а затем ренатурируют в этом геле, то последующи f
Рост и деление клеток 247
Ряс. 13-5. Анализ рецептора ФРЭ (задача 13-16). А. ДСН-гель препарата
мембран из клеток А-431.
?. ДСН-гель препарата мембран из меток А-431, инкубированных с Ш1-ФРЭ и
со сшивающим белки агентом в присутствии и в отсутствие избытка меченого
ФРЭ.
В. ДСН-гель осажденного с помощью антител рецептора ФРЭ, инкубированного
с у-32Р-АТР в присутствии и в отсутствие ФРЭ.
А. ОКРАШЕННЫЙ ГЕЛЬ Б. 125|-ФРЭ Ва у-^Р-АТР
Немеченый Немеченый
ФРЭ ФРЭ
кДа кДа кДа
170 - 170 - W 170 "
68 ~ 55 68 - 68 -
'ШШР' 1 2 3 4
Кумасси синий Радиоавтограф
Радиоавтогоаф
инкубация с у-32Р-АТР в присутствии и в отсутствие ФРЭ приводит
к такому же распределению, как приведенное на рис. 13-5, В.
A. Какой из опытов наиболее четко демонстрирует, что белок с мол.
массой 170 кДа является рецептором ФРЭ?
Б. Является ли рецептор ФРЭ субстратом для ФРЭ-стимулируемой
протеинкиназы? Как это можно определить?
B. Какие опыты показывают, что рецептор ФРЭ представляет собой
протеинкиназу?
Г. Можно ли сделать вывод, что рецептор ФРЭ служит субстратом для
своей собственной протеинкиназной активности?
13-17 Было высказано предположение, что ограниченность числа делений
нормальных клеток (до примерно 50 циклов) лимитирует максимальные размеры
опухолей и тем самым обеспечивается некоторая защита от рака. Приняв, что
108 клеток имеют массу 1 г, рассчитайте массу опухоли, возникающей при 50
делениях одной раковой клетки.
Гены "социального контроля" клеточного деления
(МБК 13.4)
13-18 Заполните пропуски в следующих утверждениях.
A. Клетки злокачественных опухолей проникают в другие
ткани тела, давая начало вторичным опухолям, называемым
___________.
Б. Причиной возникновения опухолей некоторых типов служат
_____________, инфицирующие нормальные клетки.
B. Клетки, не испытывающие социального контроля деления и вы-
тесняющие благодаря более быстрому росту нормальные клетки,
называют____________.
Г. Вирус саркомы Рауса относится к классу___________.
Д. Некоторые гены, называемые _____________, при попадании в
нормальные клетки могут трансформировать их в раковые клетки.
Е. Трансформирующий ген вируса саркомы Рауса обозначается
Ж. Гены нормальных клеток, гомологичные онкогенам, называют
248 Глава 13
13-19
___А.
___Б.
___В.
^_Г.
- Д-
___Е.
___Ж.
___3.
_и.
_JC.
__л.
13-20
Укажите, какие из следующих утверждений правильные, а какие-нет. Если
утверждение неверно, объясните почему.
Для трансформированных клеток характерен целый ряд признаков, которые
можно разбить на три группы: аномалии, связанные с плазматической
мембраной, аномалии прикрепления и аномалии роста и деления.
Трансформация клетки может быть вызвана одним геном.
Температурочувствительные мутанты по гену v-src из вируса саркомы Рауса
были использованы для демонстрации того, что трансформирующий ген
действует как переключатель в определенной точке клеточного цикла и в
другое время не нужен для поддержания трансформированного состояния.
При анализе трансформированных клеток на онкогены выявляются только
доминантные онкогены.
Рецессивные мутации генов социального контроля могут быть более
распространенной причиной рака, чем доминантные мутации.
В сущности все вирусные онкогены соответствуют либо естественным факторам
роста, либо рецепторам естественных факторов роста.
По-видимому, большую роль в трансформации клеток играет
тирозинспецифическая протеинкиназная активность, которой обладает продукт
гена v-src вируса саркомы Рауса.
Продукт гена v-src прикрепляется к плазматической мембране коротким
отрезком из гидрофобных аминокислот на N-конце полипептидной цепи.
Каким образом пролиферация клеток связана с их адгезией, неизвестно.
Нормальные клетки делятся только тогда, когда они плотно прикреплены к
субстрату, а пролиферация трансформированных клеток существенно
тормозится, если искусственно вызвать их прикрепление к субстрату.
Одинаковые размеры органов и тела у тритонов с разной плоидностью
указывают на то, что необходимый для регуляции размеров тела контроль
клеточного деления может зависеть от "измерения" длины, а не от простого
"подсчета" числа клеток или циклов деления.
Вирус саркомы Рауса (RSV) содержит онкоген v-src, который кодирует белок
с мол. массой 60 кДа, известный как р60'гс. Полагают, что этот белок
вызывает трансформацию клеток, действуя в качестве тирозинспецифической
протеинкиназы. p60src прикреплен к цитоплазматической поверхности
