Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
с помощью двумерного электрофореза с последующей радиоавтографией.
Предположите, какой должна была быть электрофоретическая картина
радиоактивных белков жгутика дикариона, есл поврежденный ген
контролировал синтез исчезнувших белков. Чем она должна была отличаться
от картины электрофоретического распределения для случая, если продукт
дефектного гена участвует в сборке жгутиковых структур?
Второй подход состоял в обработке мутанта pf\A мутагеном и поиске
ревертантов, у которых функция жгутика восстановлена не из-за исправления
исходного дефекта, а в результате вторичного изменения в том же гене,
компенсирующего первоначальное. (Для некоторых генов такие внутригенные
ревертан-ты могут быть довольно обычным явлением.) Белки из нескольких
таких ревертантов проанализировали с помощью двумерного электрофореза и
сравнили с белками из клеток дикого типа.
Каким образом этот подход позволяет выбрать одно из двун возможных
объяснений дефекта жгутика у pf 14?
Микротрубочки цитоплазмы (МБК 11.4)
11-21 Заполните пропуски в следующих утверждениях.
А. Алкалоид____________прочно связывается с тубулином, пре-
пятствуя его полимеризации.
Б. Минус-концы микротрубочек скрыты в _____________, которш
служит центром образования звезды.
В. Микротрубочки в клетках обладают свойством.
оно выражается в том, что индивидуальные микротрубочки ва
а. в< * 40 f 30 а
S. 20 ?
X
г ю
Б. ВП
х 60 а>
| 50
| 40 & s 2 о
5 ю
S
у
30
20
Рис. ]
бочек
ствии
конце
11-23)
диме!
субъе
Цитоскелет 207
время то равномерно растут, то быстро деполимеризуются.
Г. В функции____________входят стабилизация микротрубочек для
предотвращения их распада и обеспечение их взаимодействия с
другими компонентами клетки.
Д. Крупный белковый комплекс, называемый_______________, пере-
мещает везикулы вдоль аксональных микротрубочек в одном
направлении - из тела клетки к концу аксона.
|Д. В ОТСУТСТВИЕ ЦЕНТРОСОМ
О 10 20 30 40
Тубулин, мкМ
, В ПРИСУТСТВИИ ЦЕНТРОСОМ
10 20 30 40 50
Тубулин, мкМ
. 11-17. Образование микротру-ек в отсутствие (А) и в присут-гвии (Б)
центросом как функция Ьнцентрации тубулина (задача 1-23). Концентрация
указана для меров тубулина, служащих единицами при сборке.
11-22 Укажите, какие из следующих утверждений правильные, а какие-нет.
Если утверждение неверно, объясните почему.
__А. Микротрубочки ответственны за регуляцию полярности клетки,
за форму клетки, за подвижность, и, кроме того, они определяют
плоскость, в которой происходит деление клетки.
__Б. Добавленный к растущим в культуре клеткам колхицин за
несколько минут блокирует все их на стадии митоза.
__В. Таксол стабилизирует микротрубочки.
__Г. Быстрорастущие концы микротрубочек всегда направлены от
полюса веретена.
__Д. Для полимеризации тубулина требуется GTP.
__Е. Все микротрубочки, в том числе в ресничках и жгутиках,
обнаруживают динамическую нестабильность.
__Ж. Переход микротрубочек в более устойчивые формы, сохраняющие
интактность даже после обработки клеток колхицином, происходит при
отщеплении тирозина и/или ацетилировании.
__3. Тубулин подвергается посттрансляционным модификациям
только в состоянии свободного димера (но не в составе полимера).
И. Чтобы обеспечить движение везикул и органелл по аксону нервной
клетки в обе стороны, микротрубочки в аксоне также ориентированы в обоих
направлениях.
__К. Очищенный кинезин перемещает везикулы по микротрубочкам
только в одном направлении.
11-23 Принято считать, что функции микротрубочек зависят от
специфической пространственной организации их внутри клетки. Как же
создается это пространственное распределение и чем определяется
образование или исчезновение индивидуальных микротрубочек?
Для ответа на эти вопросы исследовали сборку тубулина в
микротрубочки in vitro. При концентрациях тубулина ниже 15 мкМ
образования микротрубочек не происходило, но при более высоких
концентрациях они интенсивно формировались (рис. 11-17, А). Если к
раствору тубулина добавляли центросомы, микротрубочки начинали
образовываться при концентрации ниже 5 мкМ (рис. 11-17, Б). (В этих двух
экспериментах использовали различные методы измерения-по общему весу
микротрубочек (рис. 11-17, А) и по числу микротрубочек на одну центросому
(рис. 11-17, Б), но определяемое снижение критической концентрации сборки
микротрубочек в присутствии центросом не зависело от метода измерения.)
А. Как вы думаете, почему концентрация, при которой начинается
образование микротрубочек (критическая концентрация) различна в этих двух
экспериментах?
Б. Почему кривая на рис. 11-17, А в области концентраций тубулина
выше 15 мкМ имеет линейно растущий участок, а кривая на рис. 11-17,в
области концентраций около 25 мкМ достигает плато?
