Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уилсон Дж. -> "Молекулярная биология клетки " -> 12

Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.

Уилсон Дж., Хаит Т. Молекулярная биология клетки — М.: Мир, 1994. — 520 c.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyakletki1994.djvu
Предыдущая << 1 .. 6 7 8 9 10 11 < 12 > 13 14 15 16 17 18 .. 308 >> Следующая

3' -* 5', то растущий конец цепи заканчивался бы 5'-трифосфатом или
в качестве предшественников должны были бы использоваться З'-
дезоксинуклеозидтрифосфаты.
__Ж. При утрате ДНК-полимеразой Е. coli (3' -> 5')-экзонуклеазной
активности должна уменьшиться скорость синтеза ДНК, но не его точность.
__3. Белки, связывающиеся с одноцепочечной ДНК в репликативной
вилке, держат две цепи ДНК разделенными, закрывая собой основания и
предотвращая тем самым их спаривание друг с другом.
__И. У Е. coli репаративная система, исправляющая неправильное спаривание
оснований и зависящая от их метилирования, может различать родительскую и
дочернюю цепи ДНК, когда одна или обе цепи метилированы, но не может
этого делать, если обе цепи не метилированы.
__К. У Е. coli и у вирусов, инфицирующих эукариотические клетки,
новые циклы репликации ДНК начинаются со специфического участка,
часто содержащего несколько копий короткой последовательности, с которой
связывается комплекс белков, участвующих в инициации процесса.
__JI. Для разрыва и сшивки заново цепей ДНК ферментом топо-
изомеразой I не нужен АТР, потому что энергия фосфодиэфирной связи
временно накапливается в ковалентной связи фосфотирозина в активном
центре фермента.
__М. В клетках дрожжей, мутантных по топоизомеразе II, ДНК может
реплицироваться, но хромосомы не могут разделяться в процессе
митоза.
5-22 Фрагмент ДНК, изображенный на рис. 5-15, является двухцепочечным на
концах и одноцепочечным в середине. Для верхней цепи указана полярность.
A. На каком конце фрагмента, 5' или 3', находится указанный на нижней
цепи остаток фосфата (Р)?
Б. Каким способом, по вашему мнению, будет заполняться с помощью
репаративных внутриклеточных процессов разрыв в цепи ДНК?
B. Сколько фрагментов будет содержаться в нижней цепи (рис. 5-15),
если разрыв в ней заполняется (в условиях реакции в пробирке) при наличии
в среде только дезоксирибонуклеозидтрифосфатов и ДНК-полимеразы?
24 Глава 5
8 с с-з
Рис. 5-16. Гипотетические структуры реплицирующихся молекул (задача 5-
23).
Рис. 5-17. Искусственный субстрат для изучения процесса коррекции,
осуществляемого ДНК-полимера-зой I у Е. coli (задача 5-24). Выделенными
буквами обозначены нуклеотиды с радиоактивной меткой.
Рис. 5-18. Коррекция ДНК-поли-меразой I в отсутствие (А) и в присутствии
(Б) dTTP (задача 5-24).
5-23 Важный подход к изучению репликации ДНК-это применение электронной
микроскопии, благодаря которой можно непосредственно наблюдать
репликативную вилку, а на мелких молекулах ДНК можно видеть всю
реплицирующуюся структуру. Кроме того, при использовании специальных
методов приготовления образцов можно отличать двухцепочечную ДНК от
одноцепочечной.
На рис. 5-16 изображен ряд гипотетических реплицирующихся молекул
с участками одноцепочечной ДНК, показанными тонкими линиями. В одном
раннем и очень важном электронно-микроско-пическом исследовании
репликации у бактериофага лямбда некоторые из этих структур были
действительно обнаружены и встречались часто, а другие никогда не
наблюдались.
А. Нарисуйте схематически репликационную структуру с двумя вилками,
смещающимися в противоположных направлениях. Пометьте концы всех цепей
(5' или 3') и укажите лидирующую и отстающую цепи в каждой репликативной
вилке.
Б. На основе своих знаний по репликации ДНК укажите четыре структуры на
рис. 5-16, которые наблюдались наиболее часто.
5-24 ДНК-полимераза I обладает кроме своей полимеразной активности еще и
(3' -* 5')-экзонуклеазной активностью. Эта активность проявляется во
время коррекции для удаления неправильно спаренных оснований с конца
новосинтезированной цепи ДНК. Чтобы определить эту активность, необходимо
приготовить искусственный субстрат с одной ро1у(ёА)-цепью и одной
ро1у(сГГ)-цепью, который содержит на З'-конце несколько остатков dT,
меченных 32Р, за которыми следует несколько остатков dC, меченных 3Н, как
показано на рис. 5-17. Вы измеряете потерю меченых остатков dT и dC в
отсутствие dTTP, когда синтез ДНК невозможен, и в присутствии dTTP, когда
синтез ДНК может происходить. Соответствующие результаты представлены на
рис. 5-18.
А. Для чего остатки Т и С пометили разными изотопами?
Остатки, содержащие радиоактивную метку

сР

сР
3'____AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA..
. .5'
А В отсутствие

дезокситимидинтрифосфата (dTTP)
Б В присутствии dTTP
Время, мин
Основные генетические механизмы 25
Рис. 5-19. Матричные последовательности М13 (слева) и соответствующие
последовательности ДНК, образуемые в каждом сайте (справа) во время
синтеза РНК-за-травки (задача 5-25). РНК-затравки были отделены от этих
Предыдущая << 1 .. 6 7 8 9 10 11 < 12 > 13 14 15 16 17 18 .. 308 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed