Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Туркова Я. -> "Аффинная хроматография" -> 46

Аффинная хроматография - Туркова Я.

Туркова Я. Аффинная хроматография — М.: Мир, 1980. — 472 c.
Скачать (прямая ссылка): afinnayahromatografiya 1980.djvu
Предыдущая << 1 .. 40 41 42 43 44 45 < 46 > 47 48 49 50 51 52 .. 198 >> Следующая

цепями матрицы. В качестве примера приведем частичную вероятную структуру
О-а-ь-фукопирано-зильных производных (исходным мономером сополимеризации
служил аллил-а-ь-фукопиранозил):
но .
NHrC^H нс^-снг°Д-±
Ьн-CO-NH* HO-CO-NHj 1\0 [/он
p^l
ня 1
HjC С0 СН1 СО рнг
'CH-CO-NH, HO-CO-NHj
о Ht< 'СН*
^O-CHj-tCH^-CH NHrCO-<^H
1 риг
НС-CO-NHj CH-CO-NHj
Нг< >Нг
НС -NH. j.NH JCH
"У to' 'с< ЬсГУн,
NHj-CO-CH NHrCO-CH
нг</ г !снг но
Я рн i.___I
Н/С"CO-NHj
NHrCO-tH NHt-CO-CH |/OH
CH3
Для аффинной хроматографии гликопротеинов в качестве аффинных лигандов
используются антитела или лектины. Использование антител как аффинных
лигандов рассмотрено в разд. 6.3. Выделение гликопротеинов с помощью
иммобилизованных лек-
Таблица 6.1
Классификация лектинов8 по их основному сродству [29]
Группа
лектиноп
Свхар, по которому появляется специфичность
Источник лсктина, ctsofU'TBa
I, Фукоза
II
III
N-Аиетил- D-глюкоз" амин
N-Ahcth.i-D -галактоз-амин
IV
D -Галактоза
V
N-Ацетил-о галактоз-амии и D галактоза
VI
D -Глюкоза
Lotus tetragonoiobus, слабо ннгпбир*evu L -галактозой Ulex europaeus
(утесник обыкновенный) содержит другие лектнны, принадлежа шис к группе
VII Ulex parviflorus. слабо ингибируемый дру ГИМН сахарами Группа,
ингибируемая N-ацетилируемым!
хнтодекстринамн Triticum vulgare (зародыши пшеницы), ик гибируемый также
Ы-ацетилнейра\шновог кислотой
Solarium tuberosum (клубни картофеля), ингибируемый также мурамовой
кислого]. Dolichos biflorus
Pitaseolus lunatus (бобы лимы, называемы* также P. limensis)
Phaseolus vulgaris (фасоль, красная, чер ная, желто-восковая; источником
являет ся мука из фасоли)
Vicia сгасса; содержит также неспецифиче скис лектины группы VIII
Euonymus europaeus Helix pomatia (улитка)
Группа ингибируется также L -арабинозой D фукозой, лактозой, раффинозой и
мс либнозой
Crotalaria juncea (кроталярия), р-спецнфн чсский
Ricinus communis (бобы касторки)
Abrus precatorius Griff onia. simplicifolia
Эти лектины ингибируются почти одпнако во обоими сахарами Sophora
japonica (софора японская) Glycine max (соевые бобы), и-специфиче ский
Curagana arborescens
Bandaeirea simplicifolia, а-специфическин
Baukinia variegata вариант Candida
Momordia charantia
Erythrina subrosa
Coronilla van'a, п-специфическин
Crotalaria zanzibarica
Arachis hypogea, р-спеиифическиЙ
Sesamum indicum
Pisum sativum (горох); ингибируется при мерно в четыре раза лучше D-
маннозон
120
Глава 6
Продолжение табл. 6.!
Источник лектина, свойства
Г руППа лектннов
Сахар, по которому
проявляется специфичность
VII
VIII
IX
(i-Гликозиды и p-N-аце-тнлглюкозаминиды
Метил-а- D -маннозид, D-манноза, d -глюкоза, N-ацетил- D -глкжоз-амии, L-
сорбоза
N-Ацетилнейрэминовая
кислота
Группа ингибируется наиболее сильно N.N'-диацетилхнтобиозой, а также
салицин [2- (оксиметнл) фен ил-р- d -глюкопира-нозидом], фенил-p-D -
глюкопиранозидом и целлобиозой Ulex europaens (утесник обыкновенный);
содержит другой лектин, принадлежащий группе I Ulex galli Ulex nanus
Cylisus sessilifolius; ингибируется также лактозой
Laburnum alpinum; ингибируется также
лактозой
Clerodendrum viscosum: источником является мякоть
Сахара перечислены в порядке убывания ингибирования Pisum sativum
(горох); ингибируется также D-глюкозой, однако эффективность последней в
четыре раза ниже Lens culinaris (чечевица)
Canavalia ensiformis (канавалия, дает кон-каиавалин А); источником служит
мука бобов
Vicia crassa; содержит также лектнны группы III Lathyrus salivas L.
Limulus polyphemus (лимфа крови подковообразного краба)
Trilicum vulgaris (зародыши пшеницы); содержит также лектины группы II
1 Если не уназано особо, источником пектинов служат семена растений.
тинов основано на использовании их различной аффинности по концевым
углеводным остаткам, характеристичным для отдельных гликопротеинов. При
разработке подходящего метода очистки данных гликопротеинов или
гликопептидов с помощью лекти-нов Кристиансен [20] рекомендует следующие
этапы:
1) идентификация концевого сахара или сахаров в углеводной части
исследуемого вещества;
2) выбор лектина с соответствующей специфичностью;
3) приготовление выбранного лектина;
4) иммобилизация лектина путем образования ковалентной связи с
нерастворимым носителем;
5) нахождение оптимальных условий сорбции выделяемого вещества на
иммобилизованном лектине;
6) нахождение условий десорбции.
Выбор аффинных лигандов
121
При хроматографии на иммобилизованных лектинах можно выбрать либо
неспецифическое элюирование (изменение pH или концентрации соли), либо
любой специфический метод (например, вытеснение адсорбированного
гликопротеина конкурирующими углеводами).
Если известны концевой сахар или сахара гликопротеинов, можно выбрать
подходящий лектин. Как правило, специфичность лектинов не ограничивается
одним сахаром, хотя в степени их
I
О.
Объем элюирования, мл Рис. 6.8. Аффинная хроматография автолизата
клеточных стенок Bacillus subtilis 168 на конканавалнн А - сефарозе 4В
Предыдущая << 1 .. 40 41 42 43 44 45 < 46 > 47 48 49 50 51 52 .. 198 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed