Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Туркова Я. -> "Аффинная хроматография" -> 40

Аффинная хроматография - Туркова Я.

Туркова Я. Аффинная хроматография — М.: Мир, 1980. — 472 c.
Скачать (прямая ссылка): afinnayahromatografiya 1980.djvu
Предыдущая << 1 .. 34 35 36 37 38 39 < 40 > 41 42 43 44 45 46 .. 198 >> Следующая

14. Holroyde M. Trayer I. P., Biochem. Soc. Trans., 2, 1310-1311 (1974).
15. Holroyde M. J,, Chesher J. 41. P.. Trayer I. P., Walker D, G.,
Biochem. J., 153,351-361 (1976).
16. Kalderon N., Silman I., Blumberg S., Dudai YBiochim. Biophys, Acfa,
207, 560-562 (1970).
17. Kasai K-, Ishii S., J. Biochem. (Tokyo). 77, 261-264 (1975).
18. Lowe C. R" Dean P. D. G., FEBS Lell., 18, 31-34 (1971).
19. Lowe C. R., Dean P. D. G., Affinity Chromatography, Wiley, New York,
London, 1974, pp. 272,
20. Lowe C. R., Harvey M. J., Craven D. B,, Dean P D. G., Biochem J.,
133, 499-506 (1973).
21. Lowe V. R., Harvey M. J., Dean P. D. G.. Eur. J. Biochem., 41. 341-
345
(1974).
22. Lowe C. R., Harvey M. Dean P. D. G., Eur. J. Biochem., 41, 347-351
(1974).
23. Morrow R, M" Carbonell R. G., McCoy B. J., Biotechnol. Bioeng.. 17.
895- 914 (1975).
24. Nishikawa A. H., Ballon P., Ramel A. H., Advan. Exp. Med. Biol., 42,
33- 42 (1974).
25. O'Carra P., Barry S., Griffin 77, Biochem. Soc. Trans., 1, 284-290
(1973).
26. O'Carra P., Barry S., Griffin T" Methods Enzymol., 34, 108-126
(1974).
27. O'Carra P., Barry S., Griffin Т., FEBS Lett., 43, 169-175 (1974).
28. Ohlsson R., Brodelius P.. Mosbach K-, FEBS Lett., 25, 234-238
(1972).
29. Robinson P. J., DunniU P., Lilly M. D., Biochim. Biophys Acta,
285, 28-
35 (1972).
30. Schmidt J., Raftery M. A., Biochemistry, 12, 852-856 (1973).
31. Sleers E., Cuatrecasas P., Pollard B., J. Biol. Cliem., 246, 196-200
(1971)
32. Winer A. D., Schwert G. W" J. Biol. Chem., 231, 1065-1083 (1958)
Глава 6
Выбор аффинных лигандов
6.1. ВЫСОКОСПЕЦИФИЧНЫЕ СОРБЕНТЫ И СОРБЕНТЫ С ГРУППОВОЙ СПЕЦИФИЧНОСТЬЮ
Соединение является подходящим аффинным лигандом для выделения
биологически активных веществ, если оно связывает эти вещества
специфически и обратимо. Следовательно, поскольку природа биологически
активных веществ очень различна, применяемые аффинные лиганды также могут
быть представителями самых различных соединений. Их классификацию поэтому
следует дать на основе биохимических функций, а не химической структуры.
Обзор аффинных лигандов, используемых для выделения ферментов,
ингибиторов, кофакторов, антител, антигенов, агглютининов, гликопротеинов
и гликополисахаридов, нуклеиновых кислот, нуклеотидов, транспортных и
рецепторных белков, гормонов и их рецепторов, липидов, клеток, вирусов и
других веществ дан в гл. 11 (табл. 11.1).
В этот обзор включены также аффинные лиганды с очень узкой
специфичностью. Например, если к носителю прикрепить ингибитор,
специфичный для единственного фермента, образующийся сорбент также будет
специфичен только для данного фермента. Однако для использования
специфических лигандов необходимо проводить различные и часто очень
трудоемкие синтезы сорбента для каждого разделения. Не все аффинанты,
которые подходят для комплементарного связывания макромолекул, имеют
также подходящие функциональные группы для их прикрепления к
нерастворимому носителю. Эти группы должны быть предварительно введены в
аффинный лиганд, так же как и подходящей длины пространственная "ножка",
необходимая главным образом для низкомолекулярных аффинных лигандов (она
позволяет осуществлять их специфические взаимодействия с сорбируемым
веществом). Практическая полезность специфических сорбентов возрастает,
если для их приготовления вместо узко специфических лигандов использовать
так называемый "общий лиганд" [37]. Очевидно, что матрица с групповой
специфичностью, содержащая общий лиганд, проявляет аффинность к большой
группе биологических макромолекул. Например, ферменты метаболизма
аспарагиновой кислоты обнаруживают групповую специфическую
Выбор аффинных лигандов
105
сорбцию на М-(ш-аминогексил) L-аспартат- сефарозе. На таком
иммобилизованном аффинном лиганде могут быть сортированы аспарагиназа,
аспартаза, аспартат-р-декарбоксилаза и аспараги-наза, .модифицированная
тетранитрометаном [54].
Для аффинных лигандов с групповой специфичностью каждый индивидуальный
фермент не обязательно различает один и тот
Рис 6.1. Изотерма адсорбции для четырех (/, 2, 3 и 4} ферментов,
взаимодействующих с одним и тем же иммобилизованным аффинным лигандом
[35].
же участок иммобилизованного лиганда и взаимодействует с ним одинаковым
способом. Так, например, если лиганд является общим для нескольких
ферментов и если он может быть иммобилизован различными способами, данные
аффинной хроматографии могут помочь в понимании природы взаимодействия
каждого индивидуального фермента с прикрепленным аффинным лигандом.
Различия в связываемости для ряда дегидрогеназ и киназ на 5'-АМР,
присоединенном к сефарозе (ом, табл. 4.2), показывают также, что для
взаимодействия с ферментом должна быть доступна либо свободная фосфатная
группа, либо свободная аденози-новая часть аффинного лиганда. Фосфатная
группа нуклеотида играет существенную роль при связывании, например,
алкогольдегидрогеназы или глицерокиназы; напротив, при взаимодействии
Предыдущая << 1 .. 34 35 36 37 38 39 < 40 > 41 42 43 44 45 46 .. 198 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed