Аффинная хроматография - Туркова Я.
Скачать (прямая ссылка):
29. Кери&нгольц Б, М., Угарова H. Н" Березин И. В., Бноорг. хим., 2, 264-
272 (1976).
30. Копеспу J., Slanicka J., Biochim. Biophys. Acta, 403, 573-578
(1975).
31. Копеспу I., Slanicka J., Pathol. Microbiol,, 42, 245-247 (1975).
32. Lagerloj E., Nathorst-Westjeldt L., Ekstrom B., Sjoberg B., Methods
Enzymol., 44, 759-768 (1977).
33. Manecke G., Vogt H. G., International Symposium on Analysis and
Control of Immobilized Enzyme Systems, Compiegne, France, 1975.
34. Manecke G., Vogt H. G., Makromol. Chem., 177, 725-739 (1976),
35. Marshall J. J., Rabinowitz M. L., Arch. Biochem. Biophys., 167, 777-
77?
(1975).
36. Mattiasson B,, Mosbach K, Biochim. Biophys. Acta, 235, 253-257
(1971).
37. Immobilized Enzymes for Industrial Reactors, R. A. Messing (Ed.),
Academic
Press, New York, 1975.
38. Mosbach K" FEBS Lett.. Suppl., 62, E80-E95 (1976).
39. Methods Enzymol., K. Mosbach (Ed.), 44, 1-999 (1977).
40. Mosbach K-, Danietsson B., Borgerud A., Scott М., Biochim. Biophys.
Acta, 403, 256-265 (1975).
41. Mosbach K-. Mattisson B., Acta Chem. Scand., 24, 2093-2100 (1970).
42. Ong E. B,, Tsang Y., Perimann E. G,, J. Biol. Chem., 241, 5661-5666
(1966).
43. Enzyme Engineering, E, K. Pye, L. B. Wingard, Jr. (Eds.). Vol. 2,
Plenum Press, New York, London, 1974.
44. Insolubilizcd Enzymes, M. Salmona, C, Saronio, S. Gerattini (Eds.),
Raven Press, New York. 1974.
45. Schnapp J., Shalitin Y.. Biochem. Biophys. Res. Comm., 70, 8-14
(1976).
46. Sundaram P. V.. Hornby W. E.. FEBS Lett.. 10, 325-327 (1970).
47. Sundaram P. V., Pye E. K-, Chang Т. M, S., Edwards V. H., Humphrey A.
E., Kaplan N. O,, Katehalski E., Levin У., Lilly M. D., Manecke G.,
Mosbach K-, Patchornik A., Porath J.. Weetall H. H., Wingard L. B., Jr.,
Biotechnol. Bioeng. Symp., No, 3, 15-18 (1972).
48. Svensson B., Biochim, Biophys. Acta, 429, 954-963 (1976).
49. Tanizawa K-, Bender M. L., J. Biol. Chem,, 249, 2130-2134 (1974).
50. Tosa Т., Mori Т., Fuse N.. Chibata I., Enzymologia, 31, 225- 238
(1966).
51. Turkova J., Hubdlkovd O., Krivdkovd Af., Coupek J., Biochim. Biophys.
Acta, 322, 1 9 (1973b
52. Turkova J., Vancurooa D., Saber М., unpublished data.
53. Vatcntooa O., Turkova J., Lapka R., Zima J., Coupek J., Biochim
Biophys. Acta, 403, 192-196 (1975).
54. Wan H., Horvath C.. Biochim. Biophys. Acta, 410, 135-144 (1975).
55. Weetall H. H., in: Immobilized Enzymes for Industrial Reactors, R. A.
Messing (Ed.), Academic Press, New York, 1975, pp. 201-226.
56. Weetall H. H., Mason R. D., Biotechnol. Bioeng., 15, 455-466 (1973).
57. Enzyme Engineering, L. B. Wingard, Jr. (Ed.), Interscience, New York,
1972.
58. Handbook of Enzyme Biotechnology, A. Wiseman (Ed.), Ellis Horwood,
Chichester, 1975,
Дополнения К главе 5
Исследуя гидрофобные пространственные группы, Jloy [1] показал, что
гидрофобная цепь может вносить ощутимый вклад в образование
специфического комплекса.
На рис. 1 показана хроматография L-лактат- и L-аланиндегид-рогеназ на
сефарозе с привязанными производными аденозин-5'-монофосфата (АМР). Длина
пространственных групп для всех производных одинакова, но гидрофобность
этих групп различна. Гидрофобность первой группы гексаметилендиамина
(рис. 1 ,а) максимальна. Следующие за ней пространственные группы (рис.
1,6,в,г), содержащие пептидные связи, обладают постепенно понижающейся
гидрофобностью, причем последнее производное с гидроксилом у адениновой
группы наиболее гидрофильно. Оба фермента сильно сорбируются на
производном аденозина, содержащем гидрофобный гексаметилендиамин. При
увеличении гидрофильное(tm) пространственной группы сорбируемость линейно
уменьшается. Из данных ренттеноструктурного анализа некоторых
дегидрогеназ следует, что аденозиновая часть NAD+ связывается в
"кармане", выстланном неполярными аминокислотными остатками, и что важную
роль при связывании этой часта кофермента с ферментом играют гидрофобные
взаимодействия.
Для исследования влияния гидрофобных цепей на взаимодействие
лактатдегидрогеиазы с 8- (ш-аминоалкнл) -производными аде-нозин-5'-
фосфата Jloy [1] синтезировал производные, содержащие полиметиленовые
пространственные группы разной длины. Как видно из рис. 2, определенные в
растворе значения констант ингибирования (Ki) лежат в интервале 1--6
ммоль/л, достигая максимальной величины для 8-(4-аминобутил)аденозин-5'-
фосфата. Для иммобилизованных производных на сефарозе сила взаимодействия
между лакгатдегидрогеназой и соответствующими иммобилизованными аффинными
лигандами, определенная по концентрации NADH, необходимой для вытеснения
фермента со специфического сорбента, при увеличении числа метиленовых
групп возрастает, что можно объяснить повышающейся доступностью
иммобилизованного аффинного лиганда. На основании этих наблюдений
снижение способности дегидрогеназ сорбироваться на производных с
Дополнения
447
гидрофильными пространственными группами (рис. 1) можно, вероятно,
объяснить образованием водородных связей между гидрофильной группой и
