Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Трошин А.С. -> "Структура и функции биологических мембран " -> 47

Структура и функции биологических мембран - Трошин А.С.

Трошин А.С. Структура и функции биологических мембран — М.: Наука, 1975. — 345 c.
Скачать (прямая ссылка): strukturaifunkciibiologicheskihmembran1975.djvu
Предыдущая << 1 .. 41 42 43 44 45 46 < 47 > 48 49 50 51 52 53 .. 159 >> Следующая

Рис. 38 Микроденситограммы мембран изолированной прото плазмы
а — поверхностная мембрана, б — внутренняя мембрана
а
Л
п
114 СТРУКТУРНАЯ И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ КЛЕТОЧНЫХ МЕМБРАН
поверхностной (а) и внутренней (б) мембран капли. В обоих случаях поперечное сечение мембран характеризуется двухвершинными кривыми, отображающими два электронно-плотных слоя со светлым промежутком между ними. На приведенной денситограмме поверхностная мембрана выглядит более асимметричной, но, ввиду ограниченного числа наблюдений, нельзя утверждать, что это ее характерный признак
Для того чтобы составить представление о способе формирования и природе мембраны, важно знать характер межмолекулярных взаимодействий в упорядоченной мембранной структуре С этой целью была предпринята попытка выяснить роль нековалентных взаимодействий в стабилизации вновь сформированных мембран, таких, как гидрофоб-ные, водородные и ионные связи. Специфическими агентами на гидрофобные связи были взяты твин-20, твин-80, тритон Х-100, дезокси-холат натрия; на водородные связи — мочевина; на ионные — растворы хлористого калия. Детергенты использовались в концентрациях 0,03 %—10 %, растворы мочевины 0,1—4 М, растворы КС1 — 0,5—4 М. Ввиду специфики экспериментального материала количественные определения, подобные проведенным на других объектах (Лукоянова, 1971, Лукоянова и др., 1972; Гельман и др., 1972), не проводились. Для испытания перечисленными выше агентами капли протоплазмы, находящиеся в агаровых микрокапсулах, помещали в камеру, смонтированную на предметном столике микроскопа и заполненную раствором, идентичным тому растврру, который использовался для получения капель. Затем раствор в камере замещался изотоничным раствором сахарозы, после чего добавляли испытуемый реагент, приготовленный для соблюдения изотоничности на соответствующем растворе сахарозы. Чтобы можно было отметить начало взаимодействия мембраны с испытуемым раствором, в последний в качестве индикатора вводили частицы туши. В итоге было установлено, что все концентрации детергентов оказывают деструктивное действие на пограничную мембрану. Время, проходящее от начала контакта с детергентом до момента разрушения мембраны, было различным и зависело как от типа детергента, так и от его концентрации (табл. 3).
ТАБЛИЦА 3
Вреця полного разрушения пограничной мембраны капли изолированной протоплазмы (в мин )
Реагент Концентрация детергента, %
10 | 1 0,5 0,2 0 1 0,07 j 0 03
Твин-20 1-3 20—30 25-45 35-60 40—70 90—100 120—180
Твин 80 15-20 30- 60 120-130 120—140 130—160 130—190 140—190
Тритон Х-100 < 10 сек 3-5 8-12 20—30 25—40 25—50 40—60
Дезоксихолат Na 1 сек 1 1-3 10—20 15—30 20—45 40 -60
Как видно из таблицы, при воздействии твина-20 время разрушения мембраны увеличивается от 1—3 мин. до 3—4 час в зависимости от концентрации вещества Характер действия детергента был также различен При концентрациях от 1,5 до 10 % спустя некоторое время происходило
ГЛАВА 7 ОСОБЕННОСТИ УЛЬТРАСТРУКТУРЫ МЕМБРАН КЛЕТОК РАСТЕНИЙ Ц5
, iOO мн
40 Л
\
Рис 39 Влияние твина-20 на капли изолированной протоплазмы
а —* начальная фаза Отслаивание протоплазмы от поверхностной мембраны и формирование новой мембраны, б — разрушение поверхностной мембраны, вслед за которым наступит разрушение второй мембраны и выход протоплазмы в среду
Рис 40 Влияние мочевины на капли изолированной протоплазмы
118 СТРУКТУРНАЯ И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ КЛЕТОЧНЫХ МЕМБРАН
разрушение пограничной мембраны и высвобождение содержимого капли. При концентрациях детергента от 0,03 до 1,25 % наблюдалось отслаивание протоплазмы от поверхностной мембраны. Отслоившаяся протоплазма формировала шар, который в свою очередь покрывался пограничной мембраной (рис. 39, а). Через некоторое время обе мембраны под воздействием детергента разрушались, и содержимое выходило в раствор (рис. 39, б). Для твина-80 в зависимости от концентрации время разрушения мембраны составляло от 2—3 до 15—20 мин. Отслаивание протоплазмы и формирование вторичной мембраны наблюдались при тех же концентрациях, что и в экспериментах с твином-20. Как видно из таблицы, тритон Х-100 и особенно дезоксихолат натрия действуют наиболее активно, вызывая быструю деструкцию мембраны. В экспериментах с тритоном при концентрациях от 0,07 до 1 % также происходило отслаивание протоплазмы, но менее выраженное, чем при воздействии твинами. Дезоксихолат, как правило, вызывает быстрое разрушение мембраны, в результате чего отслаивания протоплазмы и формирования новой мембраны не происходит. При более мягких воздействиях (твином-20 и 80) вторичное образование мембраны можно объяснить частичным нарушением структур мембраны детергентами, что увеличивает ее проницаемость. Компоненты окружающей среды, в том числе и бивалентные катионы, проникают за мембрану и способствуют формированию новой мембраны на поверхности отслоившейся протоплазмы.
В целом эксперименты с детергентами показали, что в процессе формирования пограничных мембран изолированной протоплазмой определяющую роль играют гидрофобные взаимодействия. Это указывает на общность структуры и, вероятно, свойств вновь сформированных мембран с другими биологическими мембранами.
Предыдущая << 1 .. 41 42 43 44 45 46 < 47 > 48 49 50 51 52 53 .. 159 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed