Практикум по физиологии растений - Третьяков Н.Н.
ISBN 5-10-001653-1
Скачать (прямая ссылка):
Порядок работы. В чашках Петри на фильтровальной бумаге проращивают по 50 семян в трех повторностях. Фильтровальную бумагу увлажняют раствором сахарозы с осмотическим давлением 10, 14, и 18 атм. Подсчет проросших семян осуществляют на третий и седьмой день. Результаты опыта записывают по следующей форме:
Вариант Число семян, Числе семян, Вывод
проросших на проросших па
третий де! ь седьмой день
Материалы и оборудование. Семена пшеницы, проса, гороха, вики, кукурузы, ячменя; растворы сахарозы с осмотическим давлением 10, 14, 18 атм.
Чашки Петри, фильтровальная бумага, термостат.
Работа 106. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЗАСУХОУСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ ПО СОДЕРЖАНИЮ ПРОЧНОСВЯЗАННОЙ ФРАКЦИИ ХЛОРОФИЛЛА а не
Вводные пояснения. Устойчивость растений к засухе тесно связана с состоянием пигментного комплекса. При повышении температуры и ухудшении влагообес-печенности повышается активность хлорофиллазы, разрушающей хлорофилло-белково-липоидный комплекс. Обнаруживая результат деятельности этого фермента, можно установить относительную устойчивость растений к засухе. Метод основан на определении прочносвязанной фракции хлорофиллов а и Ь, которые экст-
рагируют при помощи полярных (ацетон) и неполярных (бензин) растворителей с последующим спектро-фотометрированием.
Порядок работы. Двухнедельные проростки различных по засухоустойчивости сортов оставляют в одной серии сосудов без полива, в другой серии—'выращивают при влажности почвы 60 % НВ. После наступления у растений первой серии устойчивого завядания отбирают пробы листьев, в которых определяют содержание пигментов.
Для этого берут от четырех-пяти растений листья верхнего яруса, измельчают их (можно брать высечки пробочными сверлами диаметром 6 мм), тщательно перемешивают и нз средней пробы взвешивают три навески на аналитических весах по 200 мг каждая. Навески переносят в ступки, добавляют СаС03 и растирают. Затем добавляют небольшими порциями 80%-й раствор ацетона и растирают окончательно до гомогенной консистенции.
Содержимое ступки количественно переносят на фильтры Шота № 3 и № 4 и фильтруют при помощи вакуумного , насоса в колбу Бунзена (в колбе Бунзена устанавливают сахарную воронку, пробирку на 20 мл для удобства извлечения фильтрата), тщательно вымывая пигменты из осадка ацетоном. Затем фильтрат из пробирки переносят в мерную колбу на 50 мл. Фильтрат доводят до заданного объему, на спектрофотометре (СФ-4 или СФ-16), определяют величины эк-стинкции для хлорофилла а и b при соответствующей длине волны (для а — Ет, для b — Е645).
Расчет выполняют по формулам:
C.= 12,7?eM-2,69?G45;
Сь=22,9?645-4,63?б68;
С=Са+Сь = 8,02?ш + 20,2Ет >
где Са — концентрация хлорофилла а; Сь — концентрация хлорофилла /;; С — сумма концентраций хлорофиллов а и Ь.
Определяют концентрацию хлорофилла (мг/л). Для расчета содержания пигментов в 1 г сырого вещества используют формулу
где К — это Са, Сь или С; V — объем разведения; Р — навеска.
Для пересчета содержания пигментов на 1 г сухого вещества листьев составляют пропорции с использованием уже известных величин количества хлорофилла в 1 г навески , сырого вещества. Результаты опыта записывают по следующей форме:
Вари^лт Содержание пигментов на 1 г Вывод
сухого вещества
Материалы и оборудование. Растения двух-трех сортов, различающихся по засухоустойчивости, СаСОз, 80%-й раствор ацетона. Пробочные сверла диаметром 6 мм, ножницы, ступки, фильтры Шота, вакуумный насос, колбы Бунзена, сахарные пробирки на 20 мл, мерные колбы на 50 мл, спектрофотометр.
Работа 107. ДИАГНОСТИКА ЗАСУХОУСТОЙЧИВОСТИ
И ЖАРОСТОЙКОСТИ РАСТЕНИЙ ПО ИЗМЕНЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ СТАТОЛИТНОГО КРАХМАЛА
Вводные пояснения. Метод определения устойчивости по изменению содержания статолитного крахмала применяют в селекции. Статолитиый крахмал, находящийся в корневом чехлике, почти не расходуется в. процессе жизнедеятельности растительного организма, в связи с этим содержание его в растении довольно постоянно. Однако при воздействии повышенной температурой или обезвоживанием происходит гидролиз этого крахмала (в большей степени у менее устойчивых растений). Определяя количество оставшегося крахмала, можно судить об устойчивости сорта.
Порядок работы. Семена проращивают на влажной фильтровальной бумаге в чашках Петри при 25 °С. Для .определения устойчивости растений к засухе двух-трех-диевные проростки подсушивают в эксикаторах над раствором глицерина (100 мл воды-1-37 мл глицерина) в течение 24 ч при 16. ..17°С или над раствором NaCl (8 г соли на 100 мл воды) в течение 24 ч при
20.. .21 °С. Опыт проводят в темноте.
Для определения жаростойкости проростки выдерживают в воде при 37°С в течение 1 ч. По окончании прогрева или подсушивания у главного корня бритвой срезают кончики длиной 2.. .3 мм и окрашивают их раствором Люголя (1%-й раствор йода в йодиде калия) 30 с. В качестве контроля окрашивают кончики
