Практикум по физиологии растений - Третьяков Н.Н.
ISBN 5-10-001653-1
Скачать (прямая ссылка):
Липазы, присутствующие в семенах масличных растений, проявляют активность при различных значениях pH. Поэтому иногда употребляют названия нейтральной, кислой и щелочной липазы. Наиболее активны в семенах масличных кислая и щелочная липазы. Определение их активности основано иа учете концентраций жирных кислот, образующихся при действии на чистый препарат какого-либо жира (масла) экстрактом липаз, выделенным из семян разных периодов проращивания.
Порядок работы. Две навески очищенных от кожуры прорастающих семян подсолнечника (по 3 г каждая) помещают в фарфоровые ступки, приливают по 1 мл чистого подсолнечного масла и тщательно растирают в течение 3.. .4 мин. Затем в одну из ступок приливают 5 мл ацетатного буфера с pH 4,7, а в другую — 5 мл боратного буфера с pH 8,5, продолжают растирание еще 2 мин. Затем содержимое ступок количественно переносят в две конические колбы на 100 мл. Ступку и пестик ополаскивают 5 мл воды, сливая промывные воды в соответствующую колбу, добавляют по пять капель толуола, колбы плотно закрывают пробками и ставят на ротатор, где перемешивают в течение 30 мин. После этого колбы ставят на 20 ч в термостат при 30 °С.
Одновременно готовят две контрольные колбы (для каждого pH), с которыми проделывают те же, операции, что и при исследовании образцов, однако перед помещением контрольных колб в термостат их содержимое кипятят 5. ..10 мин на электроплитке для инактивации липаз.
Через 20 ч (на следующий день) колбы вынимают из термостата, приливают в каждую из них по 50 мл смеси этилового спирта с эфиром в соотношении 4:1,
встряхивают и дают несколько минут отстояться. Далее добавляют по четыре-пять капель тимолфталеина и содержимое колб титруют 0,1 п. спиртовым раствором NaOH. Активность кислых н щелочных липаз выражают в миллилитрах ОД н. спиртового раствора NaOH, пошедшего на нейтрализацию жирных кислот, образовавшихся в результате действия липаз на 1 г семян. Расчет активности липазы (кислой или щелочной) ведут по формуле
где а и b — количества 0,1 н. спиртового раствора NaOH, затраченного на титрование опытного и контрольного образцов, мл; Т — поправка к титру 0,1 н. раствора NaOIi; Я —навеска семян, г.
Данные записывают по форме (табл. 57).
57. Определение активности липаз
Номер Объект Навеска Пошло па титрование 0,1 и. Активность
исследо раствора NaOH, мл липазы
колбы вания, материала исследуемого Контрольного (АЛ), мл
PH (Я), г раствора (а) раствора (6) (ОД н. раство
ра NaOH, г)
1
2
3
4
Материалы и оборудование. Семена подсолнечника, отобранные в различные периоды прорастания; ацетатный буфер с pH 4,7; бо-ратный буфер с pH 8,5; подсолнечное масло; 0,1 н. спиртовой раствор NaOH; смесь этилового спирта с эфиром (4:1); толуол;
1 %-й спиртовой раствор тимолфталеина.
Фарфоровые ступки с пестиками, конические колбы на 100 мл, мерные цилиндры на 10 и 50 мл, ротатор, аналитические весы, термостат, электроплитка.
Глава 8
РОСТ И РАЗВИТИЕ
Рост и развитие растений —важнейшие физиологические процессы, определяющие структуру, величину и качество урожая. Поэтому агроном должен хорошо знать их, уметь исследовать и контролировать. Рост — необратимое увеличение размеров и массы тела, свя-
занное с новообразованием элементов структуры организма. Рост растения складывается из роста клеток, тканей и органов. Развитие — качественные изменения структуры и функций растения и его отдельных частей — органов, тканей и клеток, возникающие в процессе онтогенеза.
Все процессы роста и развития растений осуществляются через деление, растяжение и дифференциацию клеток. Рост в длину и ветвление побегов и корней происходят благодаря деятельности апикальных меристем верхушек побегов и кончиков корней; рост в толщину — в результате деятельности камбия. В период роста клетки меристем и камбия непрерывно делятся: внешняя часть клеток остается в меристемном состоянии, а все остальные растут и дифференцируются в ткани и органы. Следовательно, каждая клетка в процессе роста проходит три фазы: меристемную или эмбриональную; роста, или растяжения; дифференциации.
Меристемные клетки имеют тонкую пектоцеллюлоз-ную оболочку, заполнены густой цитоплазмой и, как правило, не имеют вакуолей. В фазе растяжения клетки сильно увеличиваются в размерах главным образом благодаря поглощению воды и образованию крупных вакуолей, но при этом увеличивается также масса клеточной оболочки и цитоплазмы. Зона растяжения у корней составляет около 1 см, у стеблей — 5. ..10 см.
Еще в зоне растяжения клетки начинают дифференцироваться в ткани, но окончательная дифференциация и рост в толщину наблюдаются ниже этой зоны в стеблях и выше — в корнях.
Общий закон роста — его неравномерность, или периодичность, обусловленная внутренними причинами. Вначале рост органа или всего растения происходит медленно, затем быстрее и потом снова замедляется. Нарастание общей массы органа или растения графически выражают в виде плавной S-образной кривой, а скорость роста, или прирост массы, в виде плавной, более или менее симметричной кривой с одним максимумом.
