Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Третьяков Н.Н. -> "Практикум по физиологии растений" -> 48

Практикум по физиологии растений - Третьяков Н.Н.

Третьяков Н.Н. Практикум по физиологии растений — М.: Агропромиздат, 1990. — 271 c.
ISBN 5-10-001653-1
Скачать (прямая ссылка): praktikumpofiziologii1990.djvu
Предыдущая << 1 .. 42 43 44 45 46 47 < 48 > 49 50 51 52 53 54 .. 102 >> Следующая

Для определения пользуются прибором, который состоит из каталазника 1, бюретки 5 на 50 мл и стеклянной груши 4, соединенных каучуковыми трубками и
стеклянным тройником 2. Каучуковая трубка на свободном конце тройника снабжена винтовым зажимом 3. Бюретка и стеклянная груша закреплены в штативе.
Их заполняют дистиллированной водой до половины объема (рис. 20).
Порядок работы. Навеску в 0,5 г листьев растирают в фарфоровой
ступке с кварцевым песком и добавляют 0,5 г мела для создания щелочной реакции (pH 7,7
Рис. 20. Прибор для определения активности каталазы:
1 — каталазник; 2 — стеклянный тройник; 3— винтовой зажим; 4 — стеклянная груша; 5 — бюретка на 50 мл
С==Оз
о
оптимальна для работы каталазы). Во время растирания вливают небольшими порциями 20 мл воды, смесь вносят в одно колено каталазиика. В другое колено помещают 5 мл 3 %-го раствора перекиси водорода. Ката л аз ник соединяют с каучуковой трубкой, не допуская смешивания жидкостей.
Открывают зажим и перемещением воронки устанавливают уровень воды в бюретке на нуль. Закрывают зажим и быстрым изменением положения каталаз-ника смешивают жидкость в обоих коленах. Затем, все время потряхивая каталазиик, по снижению уровня воды в бюретке отмечают объем кислорода (в мл), выделенного в течение 3 мин на 1 г массы сырого материала.
Во время опыта каталазник нельзя держать всей ладонью, так как при нагревании от руки воздух в колбе расширяется, что может повлиять на точность отсчета. При отсчете вода в круглой воронке и бюретке должна быть на одном уровне.
Определяют активность каталазы отдельно в листьях верхнего и нижнего ярусов. Можно использовать также проростки различных сортов сельскохозяйственных культур, различающихся по скороспелости и устойчивости к неблагоприятным воздействиям.
Результаты определения активности фермента записывают по форме (табл. 31).
31. Определение активности каталазы
Ярус Навеска Выделилось Активность каталазы, мл
листьев .'ИСТЬСВ, г 0} за 3 мин, мл Оа па X г сырого материала
Верхний 0,5
И и ж и ий 0,5
Материалы и оборудование. Растение с листьями нескольких ярусов, проросткп пшеницы или другой культуры, промытый речной песок, порошок мела, 3 %-й раствор перекиси водорода.
Фарфоровые ступки с пестиками, пипетки на 5 мл, мерные цилиндры на 25 мл, прибор для определения активности каталазы, песочные часы на 3 мин, весы с разновесами.
Работа 51 ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ, ГЛУТАТИОНА И ОБЩЕЙ РЕДУЦИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ
РАСТИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ МЕТОДОМ ПЕТТА В МОДИФИКАЦИИ ПРОКОШЕВА
Вводные пояснения. Аскорбиновая кислота — неустойчивое соединение, способное к обратимому окислению и восстановлению, что обусловлено наличием в молекуле двух еыольных гидроксильных групп, легко окисляющихся в дикетогруппировку.
Глутатион — трипептид, состоящий из остатков глутаминовой кислоты, цистеина и гликокола. Благодаря сульфгидрильной группе глутатион может подвергаться окислительно-восстановительным превращениям.
Аскорбиновая кислота и глутатион — сильные восстановители и могут восстанавливать —S—S— связи белков, а также функционируют как промежуточные переносчики водорода при окислении некоторых органических кислот в процессе дыхания. Окислительно-восстановительные превращения аскорбиновой кислоты в растениях связаны с ферментативными превращениями окисленного и восстановленного глутатиона. Содержание этих веществ в растительных тканях служит показателем их восстановительной и общей физиологической активности.
Определение содержания аскорбиновой кислоты основано на ее способности восстанавливать 2,6-дихлор-фенолиндофенол. Последний дает два вида реакции. Один обусловлен изменением pH среды: в щелочной
среде окраска интенсивно-синяя, в кислой — бледнокрасная. Второй вид реакций — восстановительно-окислительный переход от окисленной формы (темио-сиияя окраска) в восстановленную (бесцветная). Последнюю реакцию и используют для определения аскорбиновой кислоты. Титруют до появления розового окрашивания, обусловленного избытком индикатора в кислой среде.
Определение содержания глутатиона основано на его способности восстанавливать свободный йод, образующийся при титровании экстракта из растений йода-том калия в кислой среде.
Аскорбиновая кислота, как и глутатион, восстанавливает свободный йод, поэтому титрованием устанавливают суммарную восстановительную активность растительной ткани, которую выражают в миллилитрах
йодата калия. Содержание глутатиона находят, вычитая из данных титрования экстракта йодатом калия данные титрования 2,6-дихлорфенолиндофенолом.
Порядок работы. Помещают в фарфоровую ступку
Предыдущая << 1 .. 42 43 44 45 46 47 < 48 > 49 50 51 52 53 54 .. 102 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed