Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Третьяков Н.Н. -> "Практикум по физиологии растений" -> 11

Практикум по физиологии растений - Третьяков Н.Н.

Третьяков Н.Н. Практикум по физиологии растений — М.: Агропромиздат, 1990. — 271 c.
ISBN 5-10-001653-1
Скачать (прямая ссылка): praktikumpofiziologii1990.djvu
Предыдущая << 1 .. 5 6 7 8 9 10 < 11 > 12 13 14 15 16 17 .. 102 >> Следующая

Наименование
I 3 5 7 10 15 30 25
Разность потенциалов, мВ:
между погруженной в раствор частью корня и его основанием между зонами корня
лов при ступенчатом погружении корня — вначале каждые 2 мм, затем каждые 5 мм. Результаты записывают по форме (табл. 9).
Установление зависимости градиентов биопотенциалов от ионного состава среды. Корень пятидневного проростка кукурузы закрепляют в зажиме электрода на расстоянии 1 см от зерновки. Другой электрод опускают в испытуемый раствор. При последовательном (ступенчатом) погружении корня регистрируют знак и величину разности потенциалов в растворах КО и СаС12 следующих концентраций: 0,1; 1,0; 10,0 мМ и в буферных растворах КС1 с pH: 5,0; 7,0; 9,0.
По данным опытов строят график: по оси ординат откладывают величины разности потенциалов для каждой из трех зон корня (в милливольтах), по оси абсцисс — концентрации испытуемых катионов. Отмечают зависимость разности потенциалов от концентрации калия и pH растворов.
Материалы и оборудование. Пятидневные проростки кукурузы, раствор 1 мМ КС 1 + 0,5 мМ СаСЬ; 0,1; 1,0; 10,0 мМ растворы KG1 и СаС12; 0,1 М; 1,0; 10,0; 100,0 мМ растворы СаСЬ; буферные растворы с pH: 5,0; 7,0; 9,0.
Стаканы па 100 мл высотой 8.. .10 см, хлорсеребряпые электроды, штативы с держателем для электродов, милливольтметр постоянного тока (рН-метр).
Работа 14. УСТАНОВЛЕНИЕ ЗАВИСИМОСТИ
БИОПОТЕНЦИАЛОВ КЛЕТОК КОРНЯ ОТ ТЕМПЕРАТУРЫ
Вводные пояснения. Одна из составляющих разности биоэлектрических потенциалов обусловлена работой
мембранных элсктрогенных насосов и поэтому связана с основным энергетическим процессом — дыханием. Дыхание при низкой температуре может быть «выключено». Это сопровождается деполяризацией клетки.
Цель работы — выявить зависимость мембранной разности потенциалов эпидермальных клеток корня от температуры и определить температурный коэффициент этой зависимости.
Порядок работы. Определение зависимости мембранных потенциалов клеток э и и б л е-мы .корня от температуры. Корень четырехшестидневного проростка тыквы длиной 5.. .6 см фиксируют в щелевидной камере глубиной 3 мм и шириной
1,5 мм, вырезанной в пластине из плексигласа толщиной 4 мм (рис. 2). Через камеру пропускают раствор (1 мМ КСИ-0,5 мМ СаСЬ). В боковой стенке камеры есть отверстие диаметром 1 мм, через которое вводят микроэлектрод.
-Для охлаждения раствора и корня камеру закрепляют на термостолпке мпкрохолодилышка ТО С-11, включенного в электрическую сеть через автотрансфор-
Рпе. 2. Блок-схем;] установки дли изучения темпорачуриой зависимости разности потенциалов клеток корпя:
1 — проросток 'Iыкпи; 2 -- 1Ц1МШППДШ1Я камера; 3 — микроскоп МБС-1; 4 — электрод ершшишн; Я - мпкроздектрод; 6'— милливольтметр постоянного тока (pH негр); 7 — самотоку mini милл тольтметр постоянного тока; й — самописец; V ~ приПор, регистрирующий 1 емпературу раствора; 1U— микротерм не гир конструкции И. Г, Кирмапоы: // — охлаждающий чиеме it
'IfКЗ-11; - питающее yeipoiierno ТОО-11; 13 аитотргшеформнтор ЛАТР-2;
I ! ¦ - с lafnuni hi гор напряжения
матор ЛАТР-2. Регулируя напряжение тока питания охлаждающего столика, можно плавно менять режим охлаждения. Температуру раствора в камере регистрируют при помощи микротермистора МТ-54 конструкции В. Г. Карманова.
Микроэлектроды изготавливают из специального стекла пирекс, на полуавтоматической установке МЭ-3 или МЭ-4 и заполняют 2,5 мМ раствором КС1 (диаметр кончика микроэлектрода 0,5. ..1 мкм). Для тонкой подачи микроэлектрода (точность до 0,5 мкм) используют микроманипулятор ММ-1 или верньерное устройство от микроскопа, на подвижной части которого крепят хлорсеребряный электрод ЭВЛ-1МЗ с микроэлектродом.
Электрод сравнения, выполненный аналогично на основе промышленного хлорсеребряного электрода, погружают в раствор, омывающий корень. Микроэлектрод вводят г под микроскопом МБС-1 при увеличении Х80... X 140.
Прежде чем ввести микроэлектрод в клетку, регистрируют межэлектродную разность потенциалов в растворе, омывающем корень при 22 °С. Далее под микроскопом при помощи микроманипулятора электрод вводят в эпидермальную клетку зоны растяжения — начала образования корневых волосков, т. е. в 6.. .8 мм от кончика корня. При удачном введении микроэлектрода регистрируется устойчивая разность потенциалов (с
учетом межэлектродной РП) порядка 150. ..175 мВ. Падение РП после введения электрода возможно вследствие травмирования, клетки или введения электрода в межклеточное пространство. При стабильном значении мембранной разности потенциалов начинают охлаждать камеру, увеличивая напряжение питания термостолика при помощи автотрансформатора таким образом, чтобы скорость изменения температуры составляла примерно 0,5 °С в минуту. При 12 и 2°С регистрируют РП в течение 10. ..15 мин. Плавно восстанавливая исходный температурный режим, наблюдают восстановление РП. При снижении температуры с 22 до 12°С температурный коэффициент составляет 1,2. ..1,3, в диапазоне 12...2°С он увеличивается до 2. ..2,5.
Предыдущая << 1 .. 5 6 7 8 9 10 < 11 > 12 13 14 15 16 17 .. 102 >> Следующая
Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed