Биология в 3 томах. Tом 3 - Тейлор Д.
ISBN 5-03-003687-3
Скачать (прямая ссылка):
Рас. 25.33. Няня кормит из бутылочки ребенка, больного тяжелой формой комбинированного иммунодефицита (SC]D). Чтобы не заразить ребенка, няня одета в комбинезон, закрывающий все тело, а ее лицо и волосы закрыты маской. Генная терапия этого заболевания проводится путем введения гена, кодирующего фермент, в клетки костного мозга и последующей пересадки таких клеток ребенку, в организме которого они смогут образовывать нормальные лимфоциты.
БОТАНИКА
В 1990 г. в США двое детей в возрасте 4 и 9 лет были выбраны для генной терапии. В выделенные лимфоциты детей с помощью ре-тровирусного вектора был встроен нормальный ген аденозиндезаминазы и после этого лимфоциты вернули на место. Лечение нужно было повторять каждые 1—2 месяца. Через год было отмечено заметное улучшение: дети проявляли иммунный ответ и начали ходить в школу.
Этические проблемы
Пожалуй, не много найдется людей, которые считают, что терапия соматических клеток неприемлема с этической точки зрения, особенно, если при лечении используют такие простые приспособления, как, например, ингалятор. Это аналогично использованию любого другого фармацевтического продукта. Однако терапия половых клеток вызывает оживленные дискуссии. Она открывает целое направление евгеники, которая уже обсуждалась в предыдущем разделе при рассмотрении генетического скрининга. Для «улучшения нормального гена» можно использовать те же методы, которые применяют для исправления поврежденного гена, вызывающего наследственную болезнь. Под «улучшением гена» подразумевают добавление желаемых свойств. Американцы уже продемонстрировали желание увеличить рост своих детей. В Индии и Китае, где считается более престижным иметь сыновей, по данным статистики аборту чаще подвергаются плоды женского пола. Если люди уже сейчас готовы пойти по пути выбора пола своих детей, то почему бы им в будущем не использовать генную инженерию для отбора других наследуемых характеристик?
Терапия половых клеток опасна тем, что изменения, внесенные в геном пациента, передадутся всем последующим поколениям. Вряд ли мы имеем право воздействовать на будущие поколения. Кроме того, если есть хотя бы очень малая вероятность, что «вылеченный» ген в каких-то обстоятельствах может оказаться вредным, генная терапия проводиться не должна. Для любой формы генной терапии должны быть разработаны строгие регулирующие процедуры. Пока этого нет, в ряде стран терапия половых клеток временно признается незаконной.
ММА им. И.М. Сеченова
_Прикладная генетика 265
25.7.12. Генетическая дактилоскопия и генотипирование
Метод генетической дактилоскопии был разработан Алеком Джеффризом (Alec Jeffreys) и его коллегами в 1984 г. в Лестерском университете. Более поздний и более чувствительный вариант этого метода известен как генотипирование. Метод получил известность среди населения благодаря его использованию в громких уголовных делах, таких как дело футболиста О. Дж. Симпсона в США в 1995 г.
В геноме человека содержится около 100 ООО генов (по последним данным их существенно меньше). Гены кодируют белки, однако около 95% ДНК является некодирующей. Функция такой ДНК пока неизвестна, но возможно, она участвует в формировании правильной структуры хромосом в клетке. Около 30—40% такой ДНК представлена короткими последовательностями оснований, которые многократно повторяются. Некоторые из повторяющихся последовательностей разбросаны по всей ДНК, однако есть и такие, которые объединены в группы (кластеры), или другими словами, расположены тан-демно. Такие «тандемные повторы» называют сателлитной ДНК (впервые они были выделены в виде отдельной фракции ДНК после центрифугирования). Каждый кластер повторяющихся последовательностей принято называть сателлитом. Число повторов в сателлитах варьирует. В некоторых из них (их называют минисателли-тами) последовательности повторяются лишь несколько раз. Между отдельными индивидуумами обнаруживается огромное разнообразие в числе повторов этих коротких последовательностей (они являются «гипервариабельными»). Поэтому минисателлиты иногда обозначают VNTR (variable number tandem repeats). Каждый индивидуум имеет в определенном локусе два аллельных минисателлита: один наследуется от матери и один от отца. Генетическая дактилоскопия представляет собой анализ длин миниса-теллитных последовательностей данного индивидуума.
Процедура
ДНК выделяют из клеток и обрабатывают рестриктазой. Для разделения полученных фрагментов используют электрофорез в агарозном геле; при этом фрагменты выстраиваются по размерам, как уже объяснялось в разд. 25.1 и показа-
Д. Тейлор, Н. Грин, У. Стаут. БИОЛОГИЯ, т. 3
БОТАНИКА
266 Глава 25
Рис. 25.34. Генетическая дактилоскопия.
но на рис. 25.4. Дальнейшая процедура описана в разд. 25.7.9 и иллюстрируется рис. 25.34. Для переноса ДНК на нитроцеллюлозный или нейлоновый фильтр используют Саузерн-блоттинг. Затем проводят гибридизацию ДНК с радиоактивным ДНК-зондом, который представляет собой последовательность, комплементарную повторяющейся минисателлитной последовательности и идентифицируют связавшиеся с зондом фрагменты с помощью радиоавтографии.
