Биология в 3 томах. Tом 2 - Тейлор Д.
ISBN 5-03-003686-5
Скачать (прямая ссылка):
Методика
Снимите лоскут эпидермиса с внутренней стороны мясистого листа (чешуи) луковицы или с черешка ревеня. Ревень удобнее потому, что его клеточный сок окрашен, однако у лука эпидермис снимается легче. Сначала на поверхности растения делают надрез скальпелем, а потом пальцами или пинцетом приподнимают и отрывают лоскут наружного слоя клеток. Быстро перенесите этот лоскут на предметное стекло в две-три капли дистиллированной воды. Осторожно накройте препарат покровным стеклом и рассмотрите его под микроскопом. Зарисуйте несколько эпидермальных клеток. Снимите еще один лоскут эпидермиса, но поместите его не в дистиллированную воду, а в 1 M раствор сахарозы. Наблюдайте клетки в течение 15 мин при большом увеличении микроскопа и зарисовывайте изменения, происходящие с одной или двумя из них. Можно продемонстрировать обратимость процесса, смыв раствор сахарозы под покровным стеклом дистиллированной водой. Избыток жидкости удаляйте фильтровальной бумагой.
Результаты
На рис. 13.3 показаны внешние изменения эпидермальных клеток лука в 1 M растворе сахарозы с течением времени.
" Протопласт отстает от клеточной стенки 1,5 мин
1,75 мин
2 мин
2,25 мин
Различные степени плазмолиза одной клетки (сначала его скорость высока, затем снижается)
Опыт 13.1. Изучение осмоса в живых растительных клетках
Материалы и оборудование Луковица или молодой черешок ревеня Микроскоп
По 2 предметных и покровных стекла
Спустя 10 мин
Плазмолизированные клетки
Плазмалемма
Рис. 13.3. Внешние изменения эпидермальных клеток лука входе плазмолиза. Полоски эпидермиса оставляли в 1 Mрастворе сахарозы разное время.
БОТАНИКА
ММА им. И.М. Сеченова
Д. Тейлор, Н. Грин, У. Стаут. БИОЛОГИЯ, т. 2
Транспорт у растений
103
13.1.8. Осмотическое движение воды из клетки в клетку
Рассмотрим ситуацию, проиллюстрированную на рис. 13.4, когда друг с другом контактируют две растительные клетки с разными водными потенциалами.
Полностью проницаемая клеточная стенка
Клетка А Ч>=-1200 кПа vr = 800 кПа %- -2000 кПа
Полупроницаемая
і олл п 14"^ плазмалемма V= 800 кПа Л
\уг = 600 кПа
- -1400 кПа
. ^________•<
Рис. 13.4. Две соседние растительные клетки.
13.4. а) У какой клеш водный потенциал выше (менее отрицательный)?
б) В каком направлении движется вода благодаря осмосу?
в) В состоянии равновесия у клеток будет один и тот же водный потенциал, равный среднему арифметическому его исходных значений, т. е. -1000 кПа. Допуская, что у/0 практически
не изменился, определите, какими будут равновесные у/г у клеток А и В?
13.1.9. Влияние на мембраны нагревания и спиртов
Некоторые воздействия, например обработка этанолом или нагревание, нарушают избирательную проницаемость клеточных мембран. Хотя мембраны и сохраняются, но они ведут себя так, будто в них пробиты бреши, т. е. они перестают быть барьером для крупных молекул типа сахарозы. Высокие температуры и спирты денатурируют мембранные белки, а концентрированные спирты, кроме того, растворяют липиды.
Опыт. 13.2. Определение среднего осмотического потенциала клеточного сока в препарате растительных клеток методом начального плазмолиза
Осмотический потенциал растительных клеток определяют разными путями, но удобнее всего делать это методом начального плазмолиза. Он основан на следующих соотношениях:
1) \|/ клетки = \|/0 + \|/г; \|/ раствора - \|/0.
2) \|/ клетки = \j/ раствора, когда эти две системы находятся в состоянии равновесия.
Набор образцов растительной ткани приводят в состояние равновесия с растворами различной концентрации (с разными водными потенциалами); цель этого — подобрать раствор, который вызывает начальный плазмолиз, т. е. заставляет протопласты сморщиваться настолько, что они только-только начинают отставать от клеточной стенки. В этот момент гидростатический потенциал клетки равен нулю, поскольку протопласт уже не давит на клеточную стенку, так что \|/ клетки = XjZ0ICfIeTKH= \|/раствора= \|/0 раствора (см. уравнения выше). Другими словами, осмотический потенциал раствора, вызывающего начальный плазмолиз, такой же, как и у цитоплазмы.
На самом деле осмотические потенциалы клеток одной и той же ткани неодинаковы, так что одни клетки плазмолизируются в более разбавленных растворах, чем другие. Условно считается, что плазмолиз начинается тогда, когда плазмолизируется 50% клеток. В этом случае остальные 50% неплазмолизированы, т. е. «средняя клетка» как бы находится в состоянии начального плазмолиза. Полученная величина отражает среднее значение осмотического потенциала ткани.
Материалы и оборудование
Луковица или черешок ревеня
6 чашек Петри
6 пробирок
Штатив для пробирок
Этикетки или восковой карандаш
2 градуированные пипетки на 10 или 25 мл
2 мензурки на 100 мл
Тонкая кисточка
Дистиллированная вода
1 M раствор сахарозы
Тонкие пинцеты
БОТАНИКА
Пастеровские пипетки Предметные и покровные стекла Микроскоп Миллиметровка
Бритвенное лезвие или острый скальпель
http://www.fiveshop.ru/catalog/britvennye_nabory/