Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Тёрнер Э. -> "Биосенсоры: основы и приложения" -> 296

Биосенсоры: основы и приложения - Тёрнер Э.

Тёрнер Э., Карубе И., Уилсон Дж. Биосенсоры: основы и приложения — М.: Мир, 1992. — 614 c.
Скачать (прямая ссылка): biosensoriosnoviiprilojeniya1992.djvu
Предыдущая << 1 .. 290 291 292 293 294 295 < 296 > 297 298 299 300 301 302 .. 355 >> Следующая

является оптическое волокно. В этом случае свет также вводится под углом,
большим 0О, и распространяется вдоль волокна благодаря полному
внутреннему отражению. Оптические волокна, выпускаемые для систем связи,
обладают отличными оптическими свойствами. Вследствие малого диаметра и
(в принципе) неограниченной длины оптического волокна число отражений в
таком волокне, используемом в качестве ЭВО, может быть очень большим.
Чтобы поверхность волокна привести во взаимодействие с исследуемым
образцом, с волокна заводского изготовления, предназначенного для системы
связи, необходимо удалить защитную оболочку и покрытие. Это относительно
легко сделать в случае покрытых пластиком кварцевых волокон
(производимых, например, фирмой Fibre Optique Industries, Питивьерс,
Франция) с диаметром сердцевины от 0,2 до 1,5 мм. На рис. 33.7 показана
схема волоконно-оптической системы (с диаметром сердцевины 0,6 мм). В
проточной цилиндрической ячейке вытянутую нить опускают в исследуемый
раствор на участке длиной 64 мм. Концы волокна закреплены в металлических
насадках и отполированы. Линзы задают апертурный угол около 70°.
Волокна других типов, например кварцевые волокна для систем связи
(диаметры центральных жил 5-50 мкм), трудно использовать из-за их малого
размера. Аналогично в случае длинных оптических волокон трудно рассчитать
углы падения и соответственно эффективные толщины из-за усложнения
оптических путей и режима преобразования света, связанного с изгибами
волокон. Данные об использовании таких волокон в иммуноанализе
отсутствуют.
33.3.2. Поверхностный плазменный резонанс
Основные оптические компоненты систем для регистрации ППР сходны с
компонентами, используемыми в спектроскопии НПВО (ср. рис. 33.3 и
33.1,а). В качестве ЭВО здесь выступают призмы, с сенсорной стороны
покрытые тонкой пленкой металла (например, Ag, Au, Al или Си).
Для детектирования плазмонного резонанса используют несколько методов.
Наиболее распространенным является измерение ослабленного отражения как
функции угла падения при фиксированной длине волны или как функции длины
волны при фиксированном угле падения. В первом случае можно измерять
угловые сдвиги порядка 0,0005° [11]. Во втором случае, измеряя
интенсивность отраженного света при постоянном угле падения,
соответствующем полувысоте минимума отражения, регистрируют изменения
показателя преломления порядка 0,00001 [27]. Еще один метод заключается в
измерении интенсивности света, рассеянного вследствие шероховатости
поверхности пленки, как функции угла падения при фиксированной длине
волны. Геометрия системы в данном случае сходна с используемой при
регистрации НПВОФ под прямым углом (см. рис. 33.1,г).
528
Глава 33
33.3.3. Требования к оптическим материалам
При выборе оптического материала для ЭВО необходимо принимать во внимание
его оптические характеристики (показатель преломления, полоса
пропускания, качество поверхности), механические свойства (твердость,
хрупкость), химическую природу (инертность, адсорбционная способность
белков, доступность химических групп для ковалентного связывания с
белками).
Оптические и механические аспекты данной проблемы детально обсуждаются в
работе [16], где приведены показатели преломления и полосы пропускания
для ряда материалов в видимой, УФ-, ИК- и дальней ИК-обласги спектра.
Противоположные поверхности ЭВО должны быть плоскими и параллельными, а
их качество достаточно высоким, чтобы свести к минимуму световые потери,
обуславливаемые рассеянием. Важно также, чтобы материал ЭВО был
достаточно прочным и нехрупким, чтобы не возникало проблем с его •
обработкой при изготовлении ЭВО и особенно при подготовке поверхности.
Чаще всего ЭВО изготовляют из кварца, оптические и химические свойства
которого хорошо изучены. Полоса пропускания кварца находится в диапазоне
от 0,3 до 2,3 мкм, что позволяет проводить измерения в УФ-, видимой и
ближней ИК-области. Кварц - довольно прочный материал, его относительно
легко обрабатывать. В качестве вполне доступных кварцевых ЭВО можно
использовать предметные стекла для микроскопов и жилы кварцевых волокон с
пластиковым покрытием.
33.3.4. Иммобилизация антител
Ключевым фактором успешного развития СВО-приборов для иммуноанализа
является иммобилизация одного из компонентов иммунохимической пары на
поверхности ЭВО. Методика иммобилизации должна не только удовлетворять
таким требованиям, как воспроизводимость, захват большого количества
белка, сохранение иммунохимической активности и устойчивости, но и не
вызывать химических или физических изменений на поверхности, которые
могли бы приводить к нежелательным оптическим эффектам (например,
рассеянию света). Поскольку в большинстве работ по данному вопросу
использовали кварц или стекло, мы ограничимся обсуждением только этих
материалов. Кроме того, в дальнейшем мы будем рассматривать только
иммобилизацию белков. На поверхностях ЭВО можно иммобилизовать и многие
Предыдущая << 1 .. 290 291 292 293 294 295 < 296 > 297 298 299 300 301 302 .. 355 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed