Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Тёрнер Э. -> "Биосенсоры: основы и приложения" -> 186

Биосенсоры: основы и приложения - Тёрнер Э.

Тёрнер Э., Карубе И., Уилсон Дж. Биосенсоры: основы и приложения — М.: Мир, 1992. — 614 c.
Скачать (прямая ссылка): biosensoriosnoviiprilojeniya1992.djvu
Предыдущая << 1 .. 180 181 182 183 184 185 < 186 > 187 188 189 190 191 192 .. 355 >> Следующая

пламени кислород - природный газ, пока он не примет форму шарика
(диаметром 0,3-0,7 мм). Затем проволочку заплавляют в мягкий стеклянный
капилляр, который также плавят в кислородном пламени газовой горелки.
После этого кончик электрода полируют тонкой шкуркой ( № 2000) до тех
пор, пока не очистится поверхность пластины (анод). Платиново-стеклянный
анод вставляют в посеребренную трубку из нержавеющей стали (внутренний
диаметр 0,4 мм, длина 2 см), служащую в датчике катодом. Всю конструкцию
плотно фиксируют нагреванием в кислородном газовом пламени.
Кончик электрода погружают на 5 с в 1%-ный раствор диацетилцеллюлозы
(фирма Eastman Kodak, США) в смеси (1:1) ацетона и этанола и затем
экспонируют 5 мин в парах ацетона. Эту процедуру повторяют дважды. Далее
кончик погружают на 30 с в 2,5%-ный раствор диацетилцеллюлозы в смеси
(1:1) ацетона и этанола. 0,2 мкл предварительно приготовленного раствора
глюкозооксидазы (50 мг глюкозооксидазы из Aspergillus niger, типа II,
17300 ед. активности/г,
Игольчатые глюкозные сенсоры и их клиническое применение
Рис. 23.1. Схема глюкозного сенсора игольчатого типа: 1 -Pt анод; 2-
стекло;
3-Ад катод; 4- полиуретан; 5-диацетилцеллюлозная мембрана с
иммобилизованной глюкозооксидазой.
к
0,6 ~ 0,8 мм
фимы Sigma Chemical, США, растворяют в 1 мл дистиллированной воды) капают
на кончик электрода, повернутого смоченным концом вверх. Для
иммобилизации глюкозооксидазы туда же капают 0,1 мкл 2%-ного раствора
глутарового альдегида (Wako Pure Chemical Industries Ltd., Япония).
Электрод выдерживают на воздухе в течение 2 ч при 25 °С и затем
экспонируют 5 мин в парах ацетона также при 25 'С. Кончик погружают на 2
с в 2%-ный раствор полиуретана (Japan Erastran Co., Япония) в
тетрагидрофуране (Wako Pure Chemical Industries Ltd., Япония), после чего
сушат на воздухе. Далее кончик погружают еще на 10 с в 15%-ный раствор
полиуретана в смеси (1:1) тетрагидрофурана и димегилформамида (Wako Pure
Chemical Industries Ltd., Япония). До начала работы изготовленный таким
способом глюкозный сенсор игольчатого типа (рис. 23.1) хранят в
холодильнике.
23.4. Характеристики глюкозного сенсора in vitro
23.4.1. Методика определения характеристик cejicopa in vitro
Игольчатый глюкозный сенсор, поляризованный при +0,6 В, соединяют с
усилителем тока (POG-200A, фирмы Unic Medical Co., Ltd., Япония), который
преобразует ток 1 мА в напряжение 100 мВ. Для регистрации сигнала сенсора
используют перьевой самописец (VP6621A, Matsushita Communication
Industrial Co., Япония).
Характеристики сенсора in vitro определяют в 0,9%-ном растворе NaCl,
содержащем 7% бычьего альбумина (фракция V, фирма Miles, США). Испытания
проводят при различных концентрациях глюкозы в термостатируемой камере с
регулируемыми скоростью потока и давления кислорода. Градуировку по
выходному току сенсора проводят после его стабилизации, которая занимает
по меньшей мере 10 мин.
23.4.2. Дрейф и шум при измерениях
Дрейф базовой (нулевой) линии и уровень шума сенсора выражают как
процентное изменение выходного тока сенсора по отношению к его отклику в
5,5 мМ растворе глюкозы. Дрейф базовой линии обычно составлял 0,8 + 0,3%
за 24 ч, а шум находился в диапазоне 0,3 ± 0,4%. Остаточный ток в не
содержащем глюкозы солевом растворе составлял 1,3 + 0,6% (табл. 23.2).
334
Глава 23
Таблица 23.2. Типичные характеристики игольчатого глюкозного сенсора in
vitro
Характеристика сенсора Численное значение
Остаточный ток, % 1,3 + 0,6
Дрейф базовой линии, %/24 ч 0,8 + 1,3
Уровень шума, % 0,3 + 0,4
Сигнал, генерируемый при концентрации глюкозы 5,5 ммоль/л, 1,2 ±0,4
нА
Диапазон концентраций глюкозы, в котором градуировочный 0-27,5
график линеен, ммоль/л
Время отклика сенсора (достижения 90%-ного уровня сигнала) Т г 16,2
± 6,2
90% ' с Температурный коэффициент, %/град 2,3 + 1,0
Примечание: приведенные результаты представляют собой среднее значение
+ стандартное отклонение для 15
сенсоров. Все значения приведены в процентах от значения сигнала при
концентрации глюкозы 5,5 ммоль/л.
23.4.3. Зависимость отклика сенсора от концентрации глюкозы
Величина и скорость изменения выходного сигнала сенсора при изменении
концентрации глюкозы измеряли, промывая камеру 0-27 ммоль/л растворами
глюкозы при 37 "С. Сенсор достаточно хорошо реагировал на изменения
концентрации глюкозы. Время нарастания сигнала до 90%-ного уровня,
характеризующее скорость отклика сенсора, составляло 16,2 + 6,2 с. В
указанном диапазоне концентраций отклик сенсора был линейным.
23.4.4. Влияние температуры и давления кислорода
При изменении температуры раствора от 33 до 42 °С температурный
коэффициент отклика сенсора составлял 2,3 + 1,0% град. Зависимость тока
от парциального давления кислорода проверяли, используя газовые смеси
кислород - азот переменного состава. Парциальное давление кислорода (15-
150 мм рт. ст.) контролировали с помощью кислородного датчика. Выходной
ток глюкозного сенсора в 5,5 ммоль/л растворе глюкозы увеличивался всего
Предыдущая << 1 .. 180 181 182 183 184 185 < 186 > 187 188 189 190 191 192 .. 355 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed