Проблемы и перспективы молекулярной генетики. Том 1 - Свердлов Е.Д.
ISBN 5-02-002753-7
Скачать (прямая ссылка):
I Щ1Я
ph-d
ph-p
I I I I I I l ill
bcn92 wapl Cyp4dl Cyp4d8 dNmd3 103B4.2 msta msts \ lgrl Cg 14053 —I-1-1-1-1-1-1-1
20
30
40
50
60
70
80
90
100
110 120 т.п.н
Puc. 20. Инактивация генов района 2DF при приближении к гетерохроматину
Показана область эу-гетерохроматической границы в перестройке Х-хромосомы In(lLR)pn2a. Гены, для которых были проведены количественные измерения активности, отмечены красным цветом
К ст. И.П. Арман, А.Б. Девина
ПЯТ'
1
Ь
{
и
*
К
v
Т:г
Рнс. 21. Клетки Saccharomyces cerevisiae
Вверху: дрожжевые клетки, активно размножающиеся почкованием; внизу: отдельная пара материнское (более крупная) и дочерней клеток; на поверхности материнской клетки заметны “шрамы” от предыдущих почкований
О
Вегетативные
гаплоидные
клетки
Почкующаяся
зигота
Вегетативная
диплоидная
клетка
Аск со спорами Рис. 22. Жизненный цикл дрожжей Saccharomyces cerevisiae
Гаплоидная клетка содержит набор из п различных хромосом, у диплоидов каждая хромосома гаплоидного набора представлена двумя гомологами (2/7). Индивидуальные гаплоидные клетки обладают типом спаривания, или полом; полов у них два - а и а. Зиготы образуются при слиянии клеток противоположного пола
ПРИРОДНАЯ ХРОМОСОМА ДРОЖЖЕЙ TEL Ml CEN М2 ARS
TEL
А
Yip
I
E
C=*
YAC
Puc. 24. Рекомбинантные векторы и искусственная хромосома дрожжей
А - природная хромосома и ее основные элементы: TEL - теломера, Ml и М2 - гены-маркеры ARS - автономно реплицирующаяся последовательности, CEN - центромера; Б - Yip - кольцевой вектор бактерии, содержащий ген-маркер дрожжей - Ml; В - YRp - в состав Yip включена ARS-последовательность; Г - YCp - в состав YRp включена CEN-последовательность; Д - YLp - линейный вектор; YRp фланкирован TEL последовательностями; Е — YAC - в состав YLp включена CEN-последовательность, гены Ml и М2 расположены по обе стороны CEN и маркируют правое и левое плечи искусственной хромосомы (см. табл. 1.1)
ДНК
Трансформация сферопластов
TEL cen X х TEL
<3 М К-К
Рекомбинация w
TEL cen
\
Рис. 25. Схема TAR-клонирования: конструирование YAC in vivo
ДНК человека вводят в клетки дрожжей одновременно с двумя линеаризованными векторами, в составе которых гены дрожжей {Ml и М2) и CEN, а на флангах каждого вектора - TEL- и Alu-последсвательно-сти. YAC образуется за счет процессов гомологичной рекомбинации между Alu-послвдоватслыюстями (черные блоки) ДНК человека и векторов (Larionov et al., 1996а)
Рис. 26. Этапы отбора колоний трансформантов с YAC, содержащими ДНК человека, при TAR-клонировании (Larionov et al., 1996а)
1 - колонии первичных трансформантов; 2 - генетическая селекция; 3 - изоляция YAC методом PFGE; 4 - окраска бромистым этидием и гибридизация с зондом ДНК человека
Рис. 30. Качественное определение активности лихсназы в клетках дрожжей, содержащих контрольную плазмиду HERV-K LicB и плазмиды HERV-K LTR-LicB
Колонии трех контрольных (плазмида LicB) и трех независимых трансформантов, содержащих плазмиду LTR-LicB, инкубировали в течение 3-10 Ч на среде с лихенаном 13 зависимости от времени инкубации усиливается ореол свечения вокруг растущих колоний. Контрольные колонии ореола не образуют
Рис. 27. Гибридизация продуктов Alu PCR ДНК YAC, содержащих HERV-K LTR, с метафаз-ными хромосомами человека (метод FISH)
Стрелки указывают на сигнал гибридизации
Доза, Гр
Рис. 34. Кривые выживания после 7-облучения диплоидов, гомо-гетерозиготных по мутациям rad9A и rad53
Кривые соответствуют результатам усреднения экспериментальных значений радиочувствительности клеток, полученных в каждом случае для 3 штаммов одинакового генотипа; показаны среднеквадратичные ошибки. Для сравнения дана кривая, ожидаемая при аддитивности влияния двух мутаций на радио-чувствительность клеток
»J
К ст. В.Г. Никифорова
Каталити 1 еский цен ip 3D
Крыша
Передней ДНК-дуплекс
+15
3 РН К
замок
З'РНК
гщшутая назад)
Стенка
: Л !Ь
канал
замок
? «гавлснис
5 РНК
Заслонка
Рис. 36. Модель активного центра (А) и трехмерная структура минимальной РНК-полимеразы Thermus aquaticus (Б)
К ст. С.З. Миндлина и др.
р-лактамаза
О s II /Ч /СН3
R—СН — С — NH—СН — СН С(
I хсн3
NH-> 0=С-N-СН — СООН
гидролиз Р-лактамного кольца
|| /5\ /СН3
R — СН — С — NH — СН — СН С(
I III Чсн3
NHo 0=с-N-СН—СООН
I I
но н
Рис. 37. Инактивация антибиотика ампициллина ферментом р-лактамазой
Ген bla на плазмиде - ген, кодирующий р-лактамазу. Красным обозначено интактное p-J цо ампициллина, синим - гидролизованное кольцо неактивной формы
Рис. 38. Перемещение плазмид из одной бактерии в другую
Розовым кольцом обозначена конъюгативная плазмида
Hg2+
HgO
I
Внешняя
среда
Наружная оболочка
*
Транспортный белок Р
Периплазма
\
Тргнсг ор гнь
у*
й(елок Т
Внутренняя
мембрана
\
*
HgO
Цитоплазма
Диффузия
Рис. 39. Механизм устойчивости бактерий к неорганическим соединениям ртути (по: Osborn et al., 1997)
Описание дано в тексте
Т Р
и
merA
Рис. 40. Генетическая организация транспозона Tn501 (Grinsted et al., 1990)
Условные обозначения: неправильные прямоугольники соответствуют генам, заостренные концы указывают направление транскрипции. Гены тег-оперона закрашены красным: R - ген merR, регулирует индукцию оперона ионами Hg2+; Т, Р - гены тегТ, тегР, участвуют в транспорте ионов Hg2+ внутрь клетки; ген тег А, кодирует фермент ртуть-редуктазу, который восстанавливает токсичные ионы Hg2+ до металлической ртути; D - ген merD, участвует в дополнительной регуляции оперона; 1 (orfl), 2 (orfl) - гены с неизвестной функцией. Гены, необходимые для транспозиции, закрашены зеленым: ген tnpR кодирует резольвазу и ген tnpA — транспоза^'- res — r^v-область; треугольники на концах транспозона - инвертированные повторы
