Молекулярная биология. Структура и функция белков - Степанов В.М.
ISBN 5-06-002573-Х
Скачать (прямая ссылка):
25
^СН3 CJJ, yf^s
о сн о сн
II I II I
С„ВбШ2-0-С-С1 + NU2—с«—СОИ —* CeHsCHj-O-C-NH—св—шш
Бензилоксикарбо- Валин Бензилоксикарбонилвалин
нилхлорид
У ?
' 1
Если надобность в защите миновала, бензилоксикарбонильную группу отщепляют гидрированием в присутствии палладиевого катализатора или действием бромистого водорода в ледяной уксусной, кислоте:
0 10 & 0
3—NH—.. NHjCH-C-OT-.. + СО2 + СДСН,
II I
CeHeCH2-0~C“fffl~CHH
Бензилоксикарбонилпептид Пептид
Широко применяют трет-бутохсикарбонилъиую (ВОС) группу. Ее вводят, ацилируя аминогруппу ангидридом моно-трет-бугилового эфира угольной кислоты (ВОС-аншдридом), отщепление же достигается мягким действием кислотных агентов — трифторуксусной кислоты или хлористого водородаг в органических растворителях:
*
сн, о о сн, сн, о
I II II I I II
сиа-с—0-C-0-C-0-C—СН3+ Ifflj-CHj-COOH —* CHa-C-ft-C-fH-CHjCOOH —*
I I I
CH3 CH3 CH3
ВОС-ангидрид Глицин Треш-бутоксикарбонил-
(ВОС)*глицин
I*
СНз Q & 0 R 0 ^
I II I II I II .
-¦ CH3-C-0-C-M-CH-C-NH-... 2-* NH2-CH-C-f®“... + СО2 + С=СН2
| СНа^
СНв
ВОС-Пептид Пептид со свободной Иэобутилен
а-вминогруппой
В последнее время, особенно в автоматическом синтезе пептидов, все чаще используют 9-флуоренилметилоксикарбонильную группу (Ртоснгруппу). Ее вводят, действуя на аминокислоту или пептид соответствующим Хлорангидридом:
26
\ II. I
сн—ch2—o—c-ci + nh2-ch-co-nh-ch2-co-...
CH 'SJ
II I
CH CH F mo с—хлорид
/“4
. CH CH
II I
CH C П PH
\ и Г
| сн—С H 2“0—С—NH—CH—C0-NH-€H2“C0—... ДипеРидин*»
«'S/\
j j j Fmoc-пептид
CH CH
CH CH
II I
сн с
V \ i8
> I C=CH2 + co2 + nh2-ch—CO—NH-€H2-CQ-..
Пептид
I I
)Н СИ
’"Вызывает элиминирование водорода, указанного стрелкой.
Известно множество других защитных групп, обладающих теми или иными преимуществами и недостатками и применяемых в различных схемах синтеза. Необходимость использования большого их набора обусловлена тем, что специфические группы требуются для защиты функциональных групп боковых цепей, причем деблокирование (*-аминогрупп необходимо проводить каждый раз перед новой стадией синтеза, тогда как защита боковых групп не должна затрагиваться в этих условиях. Их отщепляют в самом конце синтеза пептида.
2.2.2. Защита u-карбоксмльвой группы
Для этой цели обычно Используют превращение карбоксильной группы в метиловый или трет-бутиловый эфиры по реакциям, описанным в гл. 1. Для отщепления метилового эфира прибегают к егб омылению щелочью, которое не всегда протекает гладко и создает опасность рацемизации С-концевого остатка. Трem-бутил овые эфиры удобно расщеплять мягкой обработкой кислотными агентами, например трифторуксусной кислотой:
СН
з
I . “Ч
. NH-cm-coo-c—сиз -?-» .. nh-chi-cooh + с=си2 I сн8/
СНз
Трето-бутиловый эфир Изобутилен
2.2.3. Образование пептидной связи
Для образования пептидной связи, которое при химическом синтезе, как правило, проводят в отсутствие воды, необходима активация карбоксильной группы. Возможна, впрочем, и активация ot-амипогруп-пыу однако ее практически не применяют. Активированное производное защищенной по аминогруппе аминокислоты или пептида может быть получено в отдельной реакции, а иногда и выделено или образовано непосредственно перед конденсацией с аминокомпонентом (аминокислотой или пептидом с защищенной карбоксильной группой).
Реакция в присутствии карбодшшидов. Ацилированная аминокислота реагирует с —(карбрдиими&ной)-группировкой, образуя соответствующую О-ацилмочееину. Это активированное производное > вступает в реакцию с аминокомпонентом, причем образуются пептид т двузамещенная мочевина:
28
СН3
