Биотехнология малотоннажного производства микробного протеина - Стахеев И.В.
ISBN 5-343-00786-4
Скачать (прямая ссылка):
при pH ниже 4,3.
101
Засевные дрожжи из малого аппарата в большой передают в период их
максимального размножения. Количество дрожжевых клеток должно находиться
в пределах 250-300 млн/см3, в том числе почкующихся 20- 25%, мертвых-не
более 5-7%. При меньшем количестве дрожжевых клеток необходимо увеличить
время выращивания с добавлением питательных веществ.
Выращивание дрожжей в большом аппарате чистой культуры. Большой аппарат
чистой культуры, как и малый АЧК, снабжен барботером с подводом воздуха и
пара, змеевиком с подводом горячей и холодной воды, гильзой для
термометра, люком для мойки аппарата и продуктовыми и канализационными
трубопроводами. Заполнение большого АЧК не должно превышать 65% общей
вместимости. Перед заполнением аппарата его хорошо промывают водой и
пропаривают в течение 1 ч при температуре 100-105 °С. Один раз в 10 дней
или в случае появления инфекции после первого пропаривания большой АЧК
заполняют водой до 6-6,5 м3, воду кипятят острым паром 1 ч, затем
спускают в канализацию, а аппарат вторично обрабатывают паром при
давлении 0,05 МПа в течение 1 ч.
После снятия давления в аппарате в него набирают
6,5 м3 питательной среды с температурой 70-80 °С и стерилизуют при
температуре 100-105 °С 1 ч. По окончании стерилизации прекращают подачу
пара в аппарат, снижают давление до 0,01 МПа, в барботер подают воздух, а
в змеевики - холодную воду и расхолаживают среду до температуры 28-30 °С.
При этой температуре с помощью сжатого воздуха или самотеком вносят
засевные дрожжи из малого АЧК. Среду хорошо перемешивают воздухом и часть
ее отбирают в малый АЧК. Аппараты чистой культуры работают одновременно
по принципу непрерывного размножения с возвратом матки. Через каждые 8-10
дней засев в малом АЧК проводят чистой культурой дрожжей, выращенной в
лабораторных условиях.
Выращивание дрожжей ведут в течение 10-12 ч при температуре 28-30°С, pH
среды 4,3-5,0 и аэрации 60- 70 м3 на 1 м3 аэрируемой среды в 1 ч.
Засевные дрожжи из большого АЧК вносят в дрож-жерастильный чан в стадии
их максимального размножения не реже 1 раза в сутки. В процессе
выращивания в большом АЧК каждый час регистрируют температуру
102
и pH среды, не реже 1 раза в 4 ч определяют количество дрожжевых клеток.
В конце выращивания оно должно составлять не менее 300-350 млн/см3, что
устанавливают методом микробиологического контроля.
Выращивание кормовых дрожжей. В качестве рабочих дрожжерастильных чанов
могут быть использованы аппараты любой конструкции, изготовленные из
нержавеющей стали, имеющие рубашку, снабженные мешалкой и барботажным
устройством для продувания воздуха.
Выращивание ведут непрерывным или отъемно-до-ливным способом. В начале
производства или после длительных остановок в промытый и
дезинфицированный дрожжерастильный чан сначала подают пастеризованную и
охлажденную до 35-40 °С среду, а затем дрожжи из большого АЧК. Количество
подаваемых за-севных дрожжей, как и полезный объем большого АЧК, должно
составлять не менее 10% объема культуральной жидкости заполненного
дрожжерастильного чана. При меньшем количестве засевных дрожжей процесс
накопления биомассы в чане тормозится, создаются условия для появления
инфекции.
В дрожжерастильный чан подают 5 м3 питательной среды, которую
перемешивают и аэрируют, затем вносят засевные дрожжи (весь объем
большого АЧК). Началом заполнения чана считают момент подачи в него
засевных дрожжей. Через 1 ч от начала заполнения в дрожжерастильный чан
подают еще 5,5 м3 питательной среды, через 3 ч - еще 4, через 5 ч - 4,
через 8 ч -
5,5 м3 до конечного объема 24 м3, что составляет 60% вместимости
аппарата. Более высокое заполнение емкости недопустимо.
Заполнение чана питательной средой происходит при постоянной аэрации 55-
60 м3/(м3-ч), температуре 30- 32 °С, pH 4,3-5,0.
Через 16-18 ч после начала заполнения аппарата, когда концентрация
дрожжевых клеток достигает 400- 500 млн/см3, начинают непрерывно отбирать
дрожжевую суспензию и добавлять пастеризованную и охлажденную до 30 °С
питательную среду. Для стабилизации условий выращивания дрожжей в
дрожжерастильном чане поддерживается постоянный уровень культуральной
жидкости, т. е. приток культуральной среды, засев-
10?
ных дрожжей и отбор дрожжевой суспензии взаимно увязываются.
В дрожжерастильном аппарате поддерживают температуру 30-32 °С и pH 4,3-
5,0. В условиях непрерывного процесса для нормального накопления биомассы
необходима интенсивная аэрация, равномерное поступление питательной среды
с достаточным содержанием солей, а также автоматическое регулирование pH
среды и температуры. Резкое изменение активной кислотности и температуры,
неравномерная подача питательной среды отрицательно влияют на накопление
биомассы дрожжей.
Количество дрожжевых клеток в культуральной жидкости характеризует
состояние процесса. Для поддержания концентрации биомассы дрожжей в
оптимальном размере и сохранения культивируемого штамма в аппарат один
