Методы очистки белков - Скоупс Р.
Методы очистки белков
Автор: Скоупс Р.Издательство: М.: Мир
Год издания: 1985
Страницы: 358
Читать: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145
Скачать:
ROBERT К. SCOPES
PROTEIN PURIFICATION
Principles and Practice
With 145 Figures
SPRINGER —VERLAG NEW YORK HEIDELBERG BERLIN
Р.СКОУПС
МЕТОДЫ ОЧИСТКИ БЕЛКОВ
Перевод с английского проф. В. К. Антонова
«МИР» МОСКВА 1985
УДК 577.112.083 С 44 ББК 28.072
Скоупс Р.
С 44 Методы очистки белков: Пер. с англ.—М.: Мир, 1985.—• 358 с., ил.
Книга известного австралийского биохимика, написанная на основе собственного 20-летнего опыта работы в области препаративной биохимии. Изложены принципы и методы основных способов выделения и очистки белков, определения их концентрации и ферментативной активности.
Предназначена для биохимиков, иммунологов, химиков и других специалистов, занимающихся выделением и очисткой белков.
Редакция биологической литературы
© 1982 by Springer-Verlag New York Inc.
All rights reserved
Authorized translation from English language edition published by Springer-Verlag Berlin Heidelberg New York Tokyo © перевод на русский язык, «Мир», 1985
2001040000—508 С 041(01)—85
130—85, ч. 1
ББК 28.072 57.04
ОТ ПЕРЕВОДЧИКА
Выделение и очистка белков во многом представляют собой самостоятельную область биохимии, и достигнутые здесь успехи в значительной мере предопределили тот огромный прогресс в наших знаниях о химии живого, который наблюдается в последние десятилетия. Овладеть этой наукой не так просто. Для этого мало знать теоретические основы используемых методов — необходимо также научиться искусно обращаться с белками, и здесь советы «бывалых» людей крайне ценны.
Предлагаемая вниманию читателя книга — это не теоретическое руководство и не свод практических методик, а скорее систематизированный сборник именно таких советов. В этом отношении она будет очень полезна исследователям, которые еще только начинают входить в эту область. Это не означает, что автор пренебрегает теоретическими обоснованиями своих рекомендаций. Во многих случаях теория изложена достаточно подробно, но делается это так, что суть метода может понять даже человек, весьма далекий от проблем физической химии.
С каждым годом появляются все новые, весьма изощренные методы белковой химии. В книге освещены многие последние разработки, хотя некоторые из них, например жидкостная хроматография высокого давления, лишь кратко упоминаются. Но если исследователь усвоил важнейшие приемы работы с бел-ками, ему уже не так трудно овладеть и новыми методами.
Таким образом, эта книга не повторяет многочисленных руководств по очистке белков, существующих в мировой литературе и тем более таких руководств на русском языке. Она наверняка найдет своего читателя, особенно среди студентов, аспирантов и молодых исследователей, сталкивающихся с трудностями при выделении и очистке белков. Однако и искушенный специалист в данной области узнает из этой книги много для себя полезного.
В заключение мне хотелось бы поблагодарить И. В. Антонова и О. П. Чвилеву за помощь в переводе и подготовке русского издания к публикации.
В. /С. Антонов
ПРЕДИСЛОВИЕ
Эта книга — итог двадцатилетних исследований, связанных с очисткой ферментов. Они были начаты отчасти потому, что в то время, когда я работал над докторской диссертацией и мне понадобилась креатинкиназа для регенерации АТР, мы не могли позволить себе покупать препараты очищенных ферментов, да и вряд ли они были тогда в продаже. Я до сих пор испытываю удовольствие, если мне удается выделить достаточно чистый фермент из сложной смеси белков; движимый лишь желанием испытать свои силы и из чисто академического интереса я и теперь провожу много времени за очисткой ферментов, даже если конечный продукт мне, по существу, и не нужен. В те дни все приходилось проверять опытным путем: подбирали условия фракционирования белков сульфатом аммония и органическими растворителями, пробовали, адсорбируется ли фермент на кальций-фосфатном геле. Больше практически ничего и не было. В настоящее же время мы располагаем огромным разнообразием методов, материалов и подходов к проблеме очистки ферментов. Трудности сейчас заключаются не в том, чтобы умело манипулировать несколькими доступными приемами, а в том, чтобы суметь выбрать наиболее подходящий метод из огромного их множества.
Цель этой книги—ознакомить новичков в данной области со всем арсеналом существующих сейчас методов фракционирования белков и проанализировать их достоинства и недостатки с тем, чтобы исследователь смог выбрать метод, который позволил бы решить стоящую перед ним задачу. Наряду с такими традиционными приемами, как фракционирование белков солями, здесь представлены также многие современные достижения в аффинной хроматографии и сходных с ней методов. Хотя все эти новые методы в целом ряде случаев дали блестящие результаты, оказалось, что с их помощью нельзя разрешить все проблемы. В течение двух лет, пока готовилась рукопись данной книги, появилось много новых методик и, что не менее важно, было выпущено много новых химических препаратов. По мере поступления в продажу новых материалов мы вно-
