Физиологически активные полимеры - Платэ Н.А.
Скачать (прямая ссылка):
Снижение общей токсичности комплексов ДНК с антрациклиновыми антибиотиками может быть достигнуто при внутри-брюшинном введении животным (по сравнению с внутривенным введением). Однако устойчивые к этим двум антибиотикам' опухолевые клетки остаются устойчивыми и к их комплексам с ДНК. В то же время неоднократное введение повышенных доз адриамицина животным (35—40 мг/кг) по соображениям пониженной токсичности производили в виде комплексов с ДНК. При этом терапевтическая эффективность комплексов повышается за счет эндоцитоза опухолевыми клетками. Комплексы дауномицина с ДНК недостаточно устойчивы в кровотоке и, возможно, постепенно высвобождают там антибиотик, чем и объясняется их более высокая токсичность по сравнению с комплексами адриамицина, которые более стабильны [155]. Однако данные экспериментальной и клинической фармакокинетики не подтверждают лизосомотропного механизма действия комплекса дауномицина с ДНК [156]. Авторы полагают,
что наблюдаемые эффекты обусловлены постепенным гидролизом комплекса в кровяном русле. Этот вывод согласуется с данными, полученными при изучении накопления дауномицина и его комплекса в клетках [157]. Для адриамицина, иммобилизованного на нерастворимых носителях (Сефадекс, Сефаро-за и т. д.), обнаружена явная противоопухолевая активность [158]. Авторы полагают, что мишень адриамицина находится ,не внутри клетки, а представляет собой элементы клеточной поверхности. Если эти данные подтвердятся, то открывается луть создания эффективных и мало токсичных противоопухолевых ФАП, действующих на клеточную мембрану, но не проникающих внутрь клетки.
Для повышения стабильности комплексов дауномицина и .адриамицина с ДНК проводили химическую модификацию агликоновой или гликозидной части антибиотиков, однако без «особого успеха. Другой путь получения прочных комплексов — замена эндоцитируемого полимера-носителя ДНК на белок, с жоторым антрациклиновые антибиотики могут быть связаны ковалентно [159].
Белковые носители противоопухолевых антибиотиков могут •быть биологически нейтральными (например, альбумин) и биологически активными (антитела к поверхности клеток органа-мишени или к опухоль-специфическим антигенам поверхности злокачественных клеток). В последнем случае достигается целевой транспорт ФАВ к опухолевым клеткам. Кроме белков в качестве носителя противоопухолевых антибиотиков используется декстран.
Конъюгат актиномицина D с бычьим сывороточным альбумином, полученный карбодиимидным методом, показал несколько повышенный терапевтический индекс по сравнению с исходным антибиотиком (7,3 по сравнению с 4,3) [124]. Связывание дауномицина с альбумином амидной связью показало, что ФАВ не может отделиться в активной форме от носителя -в результате ферментативного гидролиза, так как аминогруппа в углеводородной части антибиотика (в даунозамине) не высвобождается [159]. Как уже отмечалось, основное требование к ФАП противоопухолевого действия состоит в том, что ¦связь между ФАВ и полимером-носителем должна оставаться стабильной при циркуляции ФАП в кровяном русле (т. е. при действии сериновых протеаз при pH « 7), но эффективно расщепляться после эндоцитоза в лизосомах под действием лизо-сомальных ферментов при pH = 4,5. «Вставка» между антибиотиком и белком позволяет выполнить указанное условие. В работе [160] описана tjuc-аконитильная «вставка» между дауномицином и полимером, которая стабильна при pH = 7, но достаточно быстро гидролизуется при pH < 6. Другой вариант «вставки», содержащий остатки пептидов, предложен в работе [161].
—¦]„— COCH2CH2CO— NH-Alb
------------------------ '----------v--------' '--2----'
дауномицин- вставка альбумин
Х= Leu, Ala—Leu, Leu—Ala—Leu, Ala—Leu—Ala—Leu; n= 0-4
Конъюгаты (4.55) синтезированы карбодиимидным методом взаимодействием аминокислотных или пептидных производных дауномицина с сукцинилированным альбумином (10—21 молекула антибиотика на моль белка). Выбор аминокислот во «вставках» был сделан с учетом скорости их гидролиза кислыми протеазами (особенно связь «вставка» — антибиотик) на модельных пептидных производных дауномицина. Переваривание лизосомальными ферментами показало, что эффективно высвобождают дауномицин только конъюгаты с три- или тет-рапептидной «вставкой» (60 и 75 % за 10 ч соответственно при оптимальном pH = 5,5). Конъюгаты стабильны в сыворотке крови (отщепляется менее 2,5% антибиотика за сутки). Конъюгаты без аминокислотной «вставки» или только с одной аминокислотой были не активны по отношению к лейкозу L 1210 и, по-видимому, мало токсичны. Действие конъюгата с дипеп-гидной «вставкой» было подобно действию самого антибиотика в меньших дозах. Конъюгаты с три- или тетрапептидной «вставкой» были заметно активнее исходного ФАВ и менее токсичны. Из этого видно, что физиологическая активность конъюгатов зависит, по-видимому, от скорости гидролиза в лизосомах, а устойчивость в плазме крови обусловливает низкую токсичность из-за отсутствия свободного антибиотика в циркуляции. Сукцинилированный альбумин сам по себе подвергается активному эндоцитозу клетками L 1210, что усиливает активность полученных на его основе конъюгатов. Конъюгаты с три-или тетрапептидной «вставкой», но с несукцинилированным альбумином мало активны.
