Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Платэ Н.А. -> "Физиологически активные полимеры" -> 46

Физиологически активные полимеры - Платэ Н.А.

Платэ Н.А., Васильев А.Е. Физиологически активные полимеры — М.: Химия, 1986. — 296 c.
Скачать (прямая ссылка): fiziologicheskieaspektifiziologii1986.djvu
Предыдущая << 1 .. 40 41 42 43 44 45 < 46 > 47 48 49 50 51 52 .. 118 >> Следующая

Другой путь получения полимеров, содержащих НАД, заключается в использовании его производных по С(8) аденино-вой группы. Введенный в это положение остаток 3-меркапто-пропионовой кислоты позволил получить карбодиимидным методом амиды НАД с полиэтиленимином и поли-?-лизином [91]. Скорость восстановления полиэтилениминового производного алкогольдегидрогеназой составила почти половину от скорости восстановления НАД, однако скорость восстановления того же производного лактатдегидрогеназой была очень мала (3 %). Производное с поли-1-лизином мало эффективно в обоих случаях. В подобных условиях 4-(НАД-Ы6)-3-гидроксибути-рильные производные оказались более активны, причем во всех случаях производные полиэтиленимина активнее, чем производные поли-1-лизина.
Декстрановые производные НАД, заключенные в микрокап-сУлы, вместе с дегидрогеназной системой оказались способны
Аналогично производным НАД были синтезированы водорастворимые изомерные производные ФАД с полиэтиленимином (4.35) и (4.36) [93].
[—NCH2CH2——[—NHCH2CH2—]у COCH2CH(OH)CH2NH
[—NCHjCHj—]х—[—nhch2ch2—]у COCH2CH(OH)CH2
R
(4.36)
сн2ор(о)ор(о)осн2(сн)зсн2
. I I— I' пн
он он
он он I
н30 н3с
о
Полимер (4.36) способен реактивировать апоферменты глю-козооксидазы и оксидазы D-аминокислот образуя холофермен-ты с активностью 15 и 5 % соответственно от активности нативных ферментов. Для полимера (4.35) эти значения составляют 97 и 20 %. Оптимум реактивации апооксидазы /)-аминокислот достигнут за 4 ч для НАД и за 24 ч для обоих полимерных производных. Показано, что полимер стабилизирует структуру глюкозооксидазы.
Повышение стабильности и эффективности действия НАД-зависимых ферментов в растворах может быть достигнуто ковалентным связыванием кофермента или его низкомолекулярного производного с апоферментом [94]. В этом случае в роли полимера-носителя выступает сам активируемый апофермент. Такой прием, по-видимому, важен для создания циркулирующих ферментов медицинского назначения с эндогенно обусловленной активностью. В [95] предложен интересный метод ковалентного связывания кофакторов с активным центром ферментов. Метод основан на способности сополимера акролеина с частично кватернизованным 4-винилпиридином образовывать комплексы с молекулами глобулярных белков так, что белковая глобула оказывается покрытой полимерной оболочкой, содержащей альдегидные группы. Формиатдегидрогеназа в виде комплекса с №-(6-аминогексил)ацетамид-НАД+ и азид-ионом была обработана упомянутым выше сополимером, в результате чего молекула модифицированного кофактора оказалась связанной с белком в его активном центре через амино-
группу «вставки» и альдегидную группу покрывающего белок полимера. После блокирования свободных альдегидных групп этаноламином и борогидридного восстановления был получен конъюгат, проявлявший свою активность более эффективно, чем исходный фермент в присутствии кофактора в растворе. По-видимому, закрепление диссоциирующей коферментной части сложных ферментов особенно важно при их транспорте, функционировании и непрерывной регенерации в организме в условиях, отличных от тех, в которых они функционируют обычно. Более того, оказалось возможным придать новые качества ферментам, связывая с ними обычно не свойственные им коферменты. Так, химотропсин, ковалентно связанный с аналогами флавинов, был способен катализировать не только гидролиз, но и окислительно-восстановительные превращения [96].
Подобно НАД с декстраном Т-70 связывали и кофермент А [97]. Взаимодействием О-(2,3-эпоксипропил) декстрана с бис-s.S-(Ы6-аминогексилацетамидо) коферментом А после восстановления было получено декстрановое производное (4.37)
nhch2conh(ch2)6nhch2ch(oh)ch2o—д О- (Г
Чг'Ч/ о CH2OPOPOCH2C(CH3)2CH(OH)CONHCH2CH2CONHCH2CH2SH
W „c/ S
Ъг ,«)
Как исходный аналог кофермента А, так и полимер (4.37) оказались коферментативно активны с ферментами ацетил-СоА-синтетазой, цитратсинтетазой, фосфотрансацетилазой и сукцинаттиокиназой, однако сродство полимера (4.37) к ферментам значительно меньше, чем у самого СоА. Эффективность полимера (4.37) в системе фосфотрансацетилаза — цитратсин-тетаза значительно ниже, чем для СоА, вследствие низкой скорости процесса.
Из приведенных данных видно, что полимерные производные коферментов сами по себе менее эффективны, чем низкомолекулярные коферменты. Причины этого заключаются как в модификации молекул кофакторов, так и в ограничении их подвижности полимером-носителем, причем для разных ферментов эффективность одних и тех же полимер-коферментов может быть разная. Поэтому правильный выбор точки модификации кофактора и применение достаточно длинной «вставки» играют в данном случае решающую роль. Подробно различные аспекты применения полимерных производных кофакторов рассмотрены в обзоре [98].
4.4. ПОЛИМЕРНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ВЕЩЕСТВ С ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Предыдущая << 1 .. 40 41 42 43 44 45 < 46 > 47 48 49 50 51 52 .. 118 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed